论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5
页 |
| Abstract | 第5-10
页 |
| 第一章 RNA 沉默及其应用的研究进展 | 第10-19
页 |
| 1 引言 | 第10
页 |
| 2 RNA 沉默的分类 | 第10-13
页 |
| · 转录水平的基因沉默(TGS) | 第11
页 |
| · 转录后的基因沉默(PTGS) | 第11-13
页 |
| 3 RNA 沉默机制 | 第13-15
页 |
| 4 RNA 沉默的信号 | 第15-16
页 |
| · 可能的信号分子 | 第15
页 |
| · 信号分子传导的特点 | 第15-16
页 |
| 5 RNA 沉默的病毒抑制子 | 第16-18
页 |
| · 植物病毒抑制子干扰基因沉默的机制 | 第16
页 |
| · 植物病毒抑制子的分类 | 第16-17
页 |
| · 病毒抑制子的鉴定方法 | 第17
页 |
| · 病毒抑制子需要解决的问题 | 第17-18
页 |
| 6 RNA 沉默的应用展望 | 第18-19
页 |
| 第二章 TuMV HC-Pro 基因反向重复植物表达载体的构建 | 第19-27
页 |
| 1 材料 | 第19
页 |
| · 质粒与菌种 | 第19
页 |
| · 酶与化学试剂 | 第19
页 |
| · 抗生素 | 第19
页 |
| 2 方法 | 第19-24
页 |
| · 植物表达载体的构建策略 | 第19-20
页 |
| · 目的基因的扩增 | 第20-22
页 |
| · HC-Pro 基因反向重复植物表达载体的构建 | 第22-24
页 |
| · 三亲交配法将 pCambia1301-TuMV HC-Pro 导入农杆菌 EHA105 | 第24
页 |
| 3 结果与讨论 | 第24-27
页 |
| · HC-Pro 基因的克隆和反向重复植物表达载体的构建 | 第24-27
页 |
| 第三章 反向重复 TuMV HC-Pro 基因转化烟草的研究 | 第27-43
页 |
| 1 材料 | 第27-28
页 |
| · 植物材料 | 第27
页 |
| · 菌株 | 第27
页 |
| · 培养基与抗生素 | 第27-28
页 |
| · 抗血清与毒源 | 第28
页 |
| 2 方法 | 第28-32
页 |
| · 反向重复 HC-Pro 基因转化烟草 | 第28-29
页 |
| · 转基因烟草植株对 TuMV 的抗性分析 | 第29
页 |
| · 转基因烟草的分子生物学检测 | 第29-32
页 |
| 3 结果与分析 | 第32-41
页 |
| · 烟草再生体系 Hyg 筛选压的确定 | 第32-33
页 |
| · 烟草再生体系 Kan 筛选压的确定 | 第33
页 |
| · 转基因烟草植株的获得 | 第33-34
页 |
| · 转基因烟草植株对 TuMV 的抗性分析 | 第34-38
页 |
| · 转基因烟草植株的分子生物学检测 | 第38-41
页 |
| 4 讨论 | 第41-43
页 |
| 第四章 反向重复 TuMV HC-Pro 基因转化拟南芥的研究 | 第43-49
页 |
| 1 材料 | 第43
页 |
| · 植物材料 | 第43
页 |
| · 质粒和菌株 | 第43
页 |
| 2 方法 | 第43-44
页 |
| · 拟南芥的播种 | 第43
页 |
| · 拟南芥的转化 | 第43-44
页 |
| · 转基因拟南芥 Hyg 筛选压的确定 | 第44
页 |
| · 转基因拟南芥植株的 PCR 检测 | 第44
页 |
| · 转基因拟南芥植株的 RT-PCR 检测 | 第44
页 |
| 3 结果与分析 | 第44-48
页 |
| · 拟南芥 Hyg 筛选压的确定 | 第44-47
页 |
| · 转基因拟南芥的分子生物学检测 | 第47-48
页 |
| 4 讨论 | 第48-49
页 |
| 第五章 雪里蕻高效再生体系的构建 | 第49-56
页 |
| 1 材料 | 第49
页 |
| · 植物材料 | 第49
页 |
| · 培养基 | 第49
页 |
| 2 方法 | 第49-50
页 |
| · 无菌苗的获得 | 第49
页 |
| · 不定芽的诱导 | 第49-50
页 |
| · 不定根的诱导 | 第50
页 |
| · 组培苗的移栽 | 第50
页 |
| 3 结果与分析 | 第50-54
页 |
| · 不定芽的诱导 | 第50-53
页 |
| · 不定根的诱导 | 第53-54
页 |
| 4 讨论 | 第54-56
页 |
| 第六章 反向重复 TuMV HC-Pro 基因转化雪里蕻的研究 | 第56-69
页 |
| 1 材料 | 第56
页 |
| · 植物材料 | 第56
页 |
| · 菌株 | 第56
页 |
| · 培养基与抗生素 | 第56
页 |
| 2 方法 | 第56-58
页 |
| · 雪里蕻的组织培养 | 第56-57
页 |
| · 外植体 Hyg 筛选压的确定 | 第57
页 |
| · 雪里蕻外植体的遗传转化 | 第57
页 |
| · 抑制褐化实验 | 第57-58
页 |
| · 乙酰丁香酮(AS)浓度的确定 | 第58
页 |
| · 转基因雪里蕻植株的 PCR 检测 | 第58
页 |
| 3 结果与分析 | 第58-67
页 |
| · 不同植物生长调节剂配比对不定芽分化的影响 | 第58
页 |
| · 外植体预培养天数的确定 | 第58-59
页 |
| · 外植体 Hyg 筛选压的确定 | 第59-61
页 |
| · 菌液浓度和 Car 浓度的确定 | 第61-62
页 |
| · 农杆菌侵染时间的确定 | 第62-63
页 |
| · 暗培养时间的确定 | 第63-64
页 |
| · 预筛选时间的确定 | 第64
页 |
| · 抑制褐化实验 | 第64-65
页 |
| · 乙酰丁香酮(AS)浓度的确定 | 第65-66
页 |
| · 转基因雪里蕻植株的获得 | 第66
页 |
| · 转基因雪里蕻植株的 PCR 检测 | 第66-67
页 |
| 4 讨论 | 第67-69
页 |
| 参考文献 | 第69-77
页 |
| 附录 | 第77-91
页 |
| 致谢 | 第91
页 |
