解脂耶氏酵母脂肪酶的分子改造和高效表达
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解脂耶氏酵母脂肪酶的分子改造和高效表达
论文目录
摘要
第1-5页
ABSTRACT
第5-8页
1 绪论
第8-17页
· 脂肪酶简介
第8-9页
· 脂肪酶的应用
第9-11页
· 脂肪酶在食品中的应用
第9页
· 脂肪酶在医药中的应用
第9-10页
· 脂肪酶在洗涤剂中的应用
第10页
· 脂肪酶在皮革中的应用
第10页
· 脂肪酶在生物柴油生产中的应用
第10-11页
· 脂肪酶在生物传感器中的应用
第11页
· 脂肪酶的结构及催化机理
第11页
· 毕赤酵母表达系统
第11-12页
· 毕赤酵母表达载体
第11-12页
· 外源基因转化与整合
第12页
· 全基因合成
第12-14页
· 全基因合成方法学进展
第13-14页
· 解脂耶氏酵母脂肪酶Lip2的研究进展
第14-16页
· 本课题研究目的及意义
第16-17页
2 实验材料与方法
第17-36页
· 实验材料
第17-20页
· 菌株与质粒
第17页
· 酶及生化试剂
第17页
· 培养基及所用溶液
第17-19页
· 实验仪器
第19-20页
· 实验方法
第20-36页
· Y. lipolytica lipase解脂耶氏脂肪酶基因lip2的克隆和毕赤酵母工程菌的构建
第20-22页
· 新型脂肪酶基因的设计,合成和重组构建
第22-23页
· PFLD1启动子的克隆和重组子的构建
第23-25页
· 毕赤酵母系统重组子的构建
第25-26页
· 毕赤酵母感受态细胞的制备
第26-27页
· 毕赤酵母的电转化
第27页
· 重组工程菌的筛选及验证
第27-29页
· 重组工程菌的摇瓶发酵
第29-31页
· PichiaPink表达产物糖基化位点的预测和内切糖苷酶对糖基化位点的酶切
第31页
· 重组子在台式发酵罐中的发酵
第31-32页
· 毕赤酵母基因工程菌发酵条件的优化
第32-34页
· 细胞鲜重,脂肪酶活性和蛋白质含量的测定
第34-35页
· 发酵过程中发酵上清液的脂肪酶酶活力测定
第35页
· 发酵过程中发酵上清液的SDS-PAGE
第35-36页
3 结果与讨论
第36-51页
· 人工合成基因的设计与合成
第36-41页
· 天然基因与合成基因之间脂肪酶的表达比较与分析
第41-42页
· 不同启动子类型之间脂肪酶表达的比较与分析
第42-43页
· 不同毕赤酵母表达系统之间脂肪酶表达的比较与分析
第43-46页
· 最适PH
第46页
· 最适温度
第46-48页
· 讨论
第48-51页
· 影响外源基因在毕赤酵母中高效表达的原因
第48-49页
· 基因的拷贝数
第49页
· 启动子对Lip2表达的影响
第49页
· 信号肽对Lip2表达的影响
第49-51页
4 结论
第51-52页
5 参考文献
第52-59页
6 致谢
第59-60页
附录
第60-61页
攻读学位期间的研究成果
第61页
本篇论文共
61
页,
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。
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