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NDiV致病性初步研究及实时荧光PCR检测方法的建立

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NDiV致病性初步研究及实时荧光PCR检测方法的建立
论文目录
 
中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
前言第10-16页
  1.NDi V介绍第10-14页
    · NDi V的概述第10-11页
    · NDi V分子生物学特征第11-13页
    · NDi V与Cav V、DKNV关联性分析第13-14页
  2.研究的意义和目的第14-16页
第一章 NDi V对动物致病性的研究第16-27页
  · 材料第16-17页
  · 方法第17-20页
    · 标本处理第17-18页
    · NDi V株的获取途径和细胞传代第18-19页
      · 细胞复苏第18页
      · 细胞传代和培养第18页
      · NDi V在C6/36 细胞染毒和观察第18页
      · NDi V病毒滴度的测定(标准品的制备)第18-19页
      · NDi V在蚊虫及哺乳动物细胞中的培养第19页
    · NDi V对小鼠的致病性观察第19-20页
      · NDi V病毒对乳鼠的致病性第19页
      · NDi V对乳鼠脑部及各脏器大体形态学影响分析第19-20页
    · NDi V对鸡致病性第20页
      · NDi V对SPF鸡胚致病性第20页
      · NDi V对雏鸡的毒力试验第20页
  · 结果第20-25页
    · 病毒分离结果第20-21页
    · NDi V病毒滴度测定结果第21-22页
      · NDi V在不同细胞的生长结果第22页
    · NDi V对动物的毒力结果第22-25页
      · 细胞传代的病毒株对小鼠的致病性结果第22-23页
      · NDi V对乳鼠脑部及各脏器大体形态学影响结果第23页
      · NDi V对鸡胚的致病性结果第23-24页
      · NDi V对雏鸡的毒力结果第24-25页
  · 讨论第25-26页
  · 结论第26-27页
第二章 实时荧光PCR检测Nam Dinh病毒方法的建立及初步应用第27-43页
  · 材料第27-29页
  · 方法第29-34页
    · Rd Rp基因特异性片段筛选第29-30页
    · 病毒核酸的提取第30-31页
    · 实时荧光RT- PCR引物反应性实验第31-32页
    · 测序验证第32页
    · Taq Man- MGB探针实时荧光PCR反应体系的建立和优化第32-33页
      · 退火温度的优化第33页
      · 酶用量的优化第33页
      · 探针浓度的优化第33页
      · 上下游引物浓度的优化第33页
      · Mg~(2+)浓度的优化第33页
    · Taq Man-MGB探针实时荧光PCR反应体系的评估第33-34页
      · 特异性试验第33-34页
      · 灵敏度实验第34页
      · 稳定性实验第34页
    · 龙岗区蚊媒携带NDi V的检测第34页
  · 结果第34-41页
    · PCR反应性结果第34-35页
    · RT-PCR产物测序验证结果第35页
    · Taq Man- MGB探针实时荧光PCR反应体系优化结果第35-38页
      · 退火温度优化结果第35-36页
      · Taq DNA聚合酶用量优化结果第36页
      · Taq Man-MGB探针浓度的优化结果第36-37页
      · 引物浓度的优化结果第37-38页
      · Mg~(2+)浓度的优化结果第38页
    · PCR应用性结果第38-40页
      · 特异性实验结果第38-39页
      · 灵敏度实验结果第39-40页
      · 稳定性实验结果第40页
    · 龙岗区蚊媒NDi V携带率结果第40-41页
  · 讨论第41-42页
  · 结论第42-43页
本文研究创新之处第43页
不足之处第43-44页
参考文献第44-47页
综述第47-56页
  参考文献第53-56页
附录 1第56-57页
附录 2第57-58页
硕士期间发表的论文第58-59页
致谢第59-60页

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