论文目录 | |
| 前言 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| abstract | 第9-18页 |
| 第1章 绪论 | 第18-30页 |
| 1.1 抗原提呈细胞概述 | 第18-20页 |
| 1.1.1 巨噬细胞 | 第18-19页 |
| 1.1.2 树突状细胞（DC） | 第19-20页 |
| 1.2 抗原提呈细胞在肿瘤免疫中的作用及应用 | 第20-25页 |
| 1.2.1 巨噬细胞 | 第20-22页 |
| 1.2.2 DC | 第22-25页 |
| 1.3 阳离子多聚物载体概述 | 第25-30页 |
| 1.3.1 阳离子多聚物的一般性质 | 第26-27页 |
| 1.3.2 常用阳离子多聚物举例 | 第27-28页 |
| 1.3.3 阳离子聚合物载体转染效率的影响因素 | 第28-30页 |
| 第2章 肿瘤导致的免疫内环境异常对金纳米颗粒分布的影响 | 第30-52页 |
| 2.1 引言 | 第30-31页 |
| 2.2 实验材料 | 第31-34页 |
| 2.2.1 细胞 | 第31页 |
| 2.2.2 实验动物 | 第31页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第31-32页 |
| 2.2.4 实验仪器及耗材 | 第32-34页 |
| 2.2.5 主要试剂的配置 | 第34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.3.1 Cy5标记的金球纳米颗粒的合成 | 第34页 |
| 2.3.2 金球纳米颗粒形态的检测 | 第34-35页 |
| 2.3.3 金球纳米颗粒荧光标记效果的测定 | 第35页 |
| 2.3.4 小鼠 4T1乳腺癌细胞系的培养 | 第35页 |
| 2.3.5 小鼠 4T1乳腺癌肿瘤模型的构建 | 第35页 |
| 2.3.6 小动物活体成像系统对金球颗粒在正常与荷瘤小鼠体内分布情况的检测 | 第35-36页 |
| 2.3.7 通过流式细胞仪对正常与荷瘤小鼠体内各种免疫细胞比例和金球颗粒分布情况的检测 | 第36-38页 |
| 2.3.8 小鼠脾脏组织的病理切片观察 | 第38页 |
| 2.3.9 数据处理 | 第38页 |
| 2.4 实验结果 | 第38-49页 |
| 2.4.1 Cy5标记的PEG化金纳米颗粒表征特点均一稳定可用于体内颗粒分布特点的研究 | 第38-39页 |
| 2.4.2 正常小鼠与不同阶段的荷瘤小鼠体内各免疫细胞亚群的比例是不同的 | 第39-44页 |
| 2.4.3 纳米颗粒在正常小鼠与不同阶段的荷瘤小鼠体内的代谢分布情况是不同的，且与粒径的关系也不尽相同 | 第44-49页 |
| 2.5 讨论 | 第49-52页 |
| 第3章 利用鱼精蛋白-DNA-脂质体纳米颗粒体内改造抗原提呈细胞的研究 | 第52-96页 |
| 3.1 引言 | 第52-54页 |
| 3.2 实验材料 | 第54-58页 |
| 3.2.1 细胞 | 第54页 |
| 3.2.2 实验动物 | 第54-55页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第55-56页 |
| 3.2.4 实验仪器、耗材 | 第56-58页 |
| 3.3 实验方法 | 第58-68页 |
| 3.3.1 实验试剂的配置 | 第58-59页 |
| 3.3.2 pCMV-c-myc质粒的构建 | 第59-63页 |
| 3.3.3 鱼精蛋白与质粒DNA的最适结合比例的探究 | 第63-64页 |
| 3.3.4 脂质体-鱼精蛋白-DNA完整纳米颗粒的合成 | 第64-65页 |
| 3.3.5 鱼精蛋白的标记与颗粒水化包载率的初步测定 | 第65页 |
| 3.3.6 RAW 264.7、293T、EG-7 细胞系的培养、传代 | 第65-66页 |
| 3.3.7 纳米颗粒与Lipofectamine 2000 的体外转染 | 第66页 |
| 3.3.8 腹腔巨噬细胞的分离与转染 | 第66-67页 |
| 3.3.9 RAW 264.7、腹腔巨噬细胞的流式细胞仪检测 | 第67页 |
| 3.3.10 C57BL/6 小鼠EG-7 淋巴瘤模型的构建 | 第67页 |
| 3.3.11 纳米颗粒在小鼠体内转染效果的研究 | 第67-68页 |
| 3.3.12 小鼠重要脏器的流式细胞仪检测 | 第68页 |
| 3.4 实验结果 | 第68-90页 |
| 3.4.1 pCMV-c-myc质粒的构建 | 第68-69页 |
| 3.4.2 颗粒中鱼精蛋白与DNA最适结合比例的确定 | 第69-70页 |
| 3.4.3 颗粒内核里层（DP）结构的颗粒表征 | 第70-71页 |
| 3.4.4 颗粒内核里层与外层DNA的第二步结合 | 第71-72页 |
| 3.4.5 颗粒完整内核DPD的颗粒表征 | 第72页 |
| 3.4.6 包载pCMV-EGFP的胆固醇-DOTAP纳米颗粒能够在 293T细胞系与RAW 264.7细胞系中表达绿色荧光蛋白，但表达量较低 | 第72-75页 |
| 3.4.7 包载有pCMV-EGFP质粒的DOTAP-胆固醇纳米颗粒在正常C57BL/6 小鼠体内的表达效率较低 | 第75-79页 |
| 3.4.8 卵磷脂-胆固醇脂质体纳米颗粒的粒径较DOTAP-胆固醇脂质体纳米颗粒有所提高 | 第79页 |
| 3.4.9 颗粒DNA包载量的测定 | 第79-80页 |
| 3.4.10 包载pCMV-c-myc质粒的卵磷脂-胆固醇脂质体纳米颗粒可在RAW 264.7 细胞系与腹腔巨噬细胞中表达c-myc分子 | 第80-82页 |
| 3.4.11 卵磷脂-胆固醇脂质体包载pCMV-c-myc质粒在正常小鼠体内的表达效率较低 | 第82-85页 |
| 3.4.12 卵磷脂-胆固醇脂质体纳米颗粒包载pCMV-c-myc质粒在荷瘤小鼠体内表达的效率较低 | 第85-90页 |
| 3.5 讨论 | 第90-96页 |
| 第4章 利用支链聚乙烯亚胺-DNA-PLGA微米级颗粒体内改造抗原提呈细胞的研究 | 第96-124页 |
| 4.1 引言 | 第96-98页 |
| 4.2 实验材料 | 第98-99页 |
| 4.2.1 细胞 | 第98页 |
| 4.2.2 实验动物 | 第98页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第98-99页 |
| 4.2.4 实验耗材及仪器 | 第99页 |
| 4.3 实验方法 | 第99-101页 |
| 4.3.1 相关试剂的配制 | 第99页 |
| 4.3.2 PEI与DNA结合比例的确定 | 第99页 |
| 4.3.3 DNA-PEI-PLGA微米级颗粒的合成 | 第99-100页 |
| 4.3.4 颗粒DNA包载效率的测定 | 第100页 |
| 4.3.5 腹腔巨噬细胞的分离 | 第100页 |
| 4.3.6 微米级颗粒的体外转染 | 第100-101页 |
| 4.3.7 EG7淋巴瘤皮下接种小鼠模型的构建 | 第101页 |
| 4.3.8 微米级颗粒体内表达效率的测定 | 第101页 |
| 4.4 实验结果 | 第101-119页 |
| 4.4.1 PEI与DNA结合比例的确定及颗粒的相关表征 | 第101-103页 |
| 4.4.2 微米级颗粒DNA包载效率的检测 | 第103页 |
| 4.4.3 以PEI：DNA =6:1（PD 6）的比例合成的PLGA微米颗粒体外可使小鼠腹腔巨噬细胞表达c-myc分子 | 第103-104页 |
| 4.4.4 PD6微米颗粒在正常C57BL/6 小鼠体内可被髓系细胞吞噬，但c-myc的表达效率不高 | 第104-109页 |
| 4.4.5 PD6微米颗粒在EG-7 淋巴瘤荷瘤小鼠体内的摄取相比正常小鼠有所下降下降，c-myc的表达效率仍然较低 | 第109-114页 |
| 4.4.6 以PEI：DNA =30:1(PD30)的比例合成的PLGA微米颗粒在正常C57BL/6 小鼠腹腔髓系细胞内可有效地表达c-myc分子 | 第114-115页 |
| 4.4.7 以PEI：DNA =50:1 (PD50)的比例合成的PLGA微米颗粒在正常C57BL/6 小鼠的腹腔髓系细胞仍中有较明显的表达，其中在DC中的表达效率进一步提高 | 第115-116页 |
| 4.4.8 PD50微米颗粒连续给药后在荷瘤小鼠体内的表达效率明显升高 | 第116-119页 |
| 4.5 讨论 | 第119-124页 |
| 第5章 结论 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-144页 |
| 作者简介及在校期间所发表的论文 | 第144-146页 |
| 致谢 | 第146页 |
