论文目录 | |
| 论文研究目的和创新点 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第一部分 肝星状细胞Toll样受体3(TLR3)激活抑制乙型肝炎病毒感染 | 第14-44页 |
| 第一章 前言 | 第14-24页 |
| 1.1 乙型肝炎病毒 | 第14-16页 |
| 1.1.1 概述 | 第14-15页 |
| 1.1.2 HBV病毒结构和复制周期 | 第15-16页 |
| 1.2 肝脏天然免疫与HBV | 第16-22页 |
| 1.2.1 Toll样受体信号通路 | 第17-18页 |
| 1.2.2 RIG-I样受体信号通路 | 第18-19页 |
| 1.2.3 干扰素信号通路及抗病毒ISG | 第19-22页 |
| 1.3 肝星状细胞与肝脏免疫 | 第22-24页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第24-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 细胞与质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 实验耗材与试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第25页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第25页 |
| 2.2.3 Real time-PCR检测细胞RNA | 第25-27页 |
| 2.2.4 ELISA检测LX-2细胞上清中IFN-β和IFN-λ1/3的表达 | 第27-28页 |
| 2.2.5 ELISA检测HepG2细胞上清中HBeAg和HBsAg的表达 | 第28页 |
| 2.2.6 Western blot检测细胞内蛋白表达 | 第28-30页 |
| 2.2.7 MTS检测PolyI:C对LX-2细胞的毒性作用 | 第30-31页 |
| 第三章 实验结果 | 第31-41页 |
| 3.1 PolyI:C对LX-2细胞的毒性作用 | 第31页 |
| 3.2 PolyI:C诱导LX-2细胞表达IFN-β和IFN-λ | 第31-32页 |
| 3.3 PolyI:C诱导LX-2细胞内IRF3和IRF7激活 | 第32-34页 |
| 3.4 TCI抑制PolyI:C诱导的IFN和IRF表达 | 第34页 |
| 3.5 TLR3激活的LX-2细胞上清对HBV的抑制作用 | 第34-36页 |
| 3.6 LX-2细胞产生的IFN在抗HBV作用中发挥重要作用 | 第36-38页 |
| 3.7 PolyI:C处理的LX-2细胞上清诱导HepG2细胞表达ISG | 第38-39页 |
| 3.8 PolyI:C处理的LX-2细胞上清激活HepG2细胞JAK/STAT信号通路 | 第39-41页 |
| 第四章 讨论 | 第41-44页 |
| 第二部分 激活胞质DNA感受器抑制人类免疫缺陷病毒感染巨噬细胞 | 第44-83页 |
| 第一章 研究背景 | 第44-60页 |
| 1.1 HIV/AIDS | 第44-49页 |
| 1.1.1 HIV/AIDS概述 | 第44-46页 |
| 1.1.2 HIV结构和复制周期 | 第46-47页 |
| 1.1.3 HIV治疗 | 第47-49页 |
| 1.2 DNA感受器与天然免疫 | 第49-54页 |
| 1.2.1 DNA感受器概述 | 第49-53页 |
| 1.2.2 DNA感受器与HIV | 第53-54页 |
| 1.3 IFN信号通路与HIV | 第51-57页 |
| 1.4 MicroRNA与HIV感染 | 第57-58页 |
| 1.5 CC趋化因子和HIV感染 | 第58-60页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第60-68页 |
| 2.1 实验材料 | 第60-61页 |
| 2.1.1 实验耗材与试剂 | 第60页 |
| 2.1.2 细胞 | 第60-61页 |
| 2.1.3 病毒株 | 第61页 |
| 2.2 实验方法 | 第61-68页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第61页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第61页 |
| 2.2.3 细胞活力检测 | 第61页 |
| 2.2.4 HIV病毒感染 | 第61-62页 |
| 2.2.5 细胞内总RNA提取及逆转录PCR | 第62页 |
| 2.2.6 Real time-PCR检测细胞内mRNA和HIV病毒RNA表达 | 第62-64页 |
| 2.2.7 Real time-PCR检测巨噬细胞内microRNAs表达 | 第64页 |
| 2.2.8 巨噬细胞上清中HIV逆转录酶(HIV RT)活性检测 | 第64-65页 |
| 2.2.9 提取巨噬细胞内DNA检测HIV Strong Stop DNA水平 | 第65页 |
| 2.2.10 Western blot检测巨噬细胞蛋白表达 | 第65-66页 |
| 2.2.11 酶联免疫吸附实验(ELISA)检测巨噬细胞上清中蛋白的表达 | 第66-67页 |
| 2.2.12 中和抗体抑制IFN与其受体结合实验 | 第67页 |
| 2.2.13 共聚焦显微镜观察感染或未感染的巨噬细胞形态 | 第67-68页 |
| 第三章 实验结果 | 第68-80页 |
| 3.1 Poly(dA:dT)或poly(dG:dC)对巨噬细胞的毒性作用 | 第68页 |
| 3.2 DNA感受器激活对HIV感染的影响 | 第68-72页 |
| 3.3 DNA感受器激活诱导巨噬细胞表达IFN-β和IFN-λ1 | 第72页 |
| 3.4 DNA感受器激活诱导巨噬细胞IRF3和IRF7磷酸化 | 第72-73页 |
| 3.5 Poly(dA:dT)激活巨噬细胞JAK/STAT信号通路 | 第73-74页 |
| 3.6 DNA感受器激活诱导巨噬细胞内抗HIV ISG表达 | 第74-77页 |
| 3.7 DNA感受器激活诱导CC趋化因子抑制HIV病毒进入巨噬细胞 | 第77-78页 |
| 3.8 Poly(dA:dT)和poly(dG:dC)刺激诱导抗HIV microRNA表达 | 第78-80页 |
| 第四章 讨论 | 第80-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 缩略词表 | 第95-96页 |
| 读博期间发表的文章 | 第96-97页 |
| 毕业感言和致谢 | 第97-99页 |
