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抗Bt小菜蛾的选育、受体基因克隆及PTD对Cry1Ac的增效作用
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抗Bt小菜蛾的选育、受体基因克隆及PTD对Cry1Ac的增效作用
论文目录
 
摘要第1-5 页
ABSTRACT第5-9 页
第一章 绪论第9-27 页
　　· Bt研究进展第9-14 页
　　　　· Bt杀虫晶体蛋白的结构与功能关系第9-11 页
　　　　· Bt杀虫机理第11-13 页
　　　　· 害虫对Bt的抗性发展第13-14 页
　　· Bt受体蛋白与昆虫抗性的研究概况第14-21 页
　　　　· Bt受体蛋白的分离鉴定第15-16 页
　　　　· Bt受体蛋白与抗性产生的关系第16-17 页
　　　　· 小菜蛾结合位点模型第17-19 页
　　　　· 毒素受体蛋白基因序列特征第19-21 页
　　· 蛋白转导研究最新进展第21-26 页
　　　　· PTD的发现第22-24 页
　　　　· PTD的转导机制第24 页
　　　　· PTD融合分子制备第24-25 页
　　　　· PTD应用概述第25-26 页
　　· 研究目的意义第26-27 页
　　　　· 研究目的第26 页
　　　　· 研究意义第26 页
　　　　· 研究内容第26-27 页
第二章 小菜蛾室内继代饲养和抗性选育第27-41 页
　　· 小菜蛾人工继代饲养技术研究第27-31 页
　　　　· 材料和方法第27-28 页
　　　　· 结果和分析第28-31 页
　　　　· 小结和讨论第31 页
　　· CrylAc毒蛋白和IBt制剂对小菜蛾的抗性选育及生物学参数影响第31-36 页
　　　　· 材料与方法第32-33 页
　　　　· 结果与分析第33-36 页
　　　　· 讨论第36 页
　　· Bt对抗性及敏感小菜蛾拒食活性研究第36-41 页
　　　　· 材料与方法第37-38 页
　　　　· 结果与分析第38-40 页
　　　　· 小结与讨论第40-41 页
第三章 小菜蛾Bt毒素受体蛋白基因的克隆及序列分析第41-86 页
　　· 材料和方法第41-51 页
　　　　· 试验材料第41-44 页
　　　　· 试验方法第44-51 页
　　· 结果与分析第51-84 页
　　　　· 编码APN1的基因克隆、鉴定及序列分析第51-55 页
　　　　· 编码APN2的基因克隆、鉴定及序列分析第55-76 页
　　　　· 编码APN4的基因克隆、鉴定及序列分析第76-82 页
　　　　· 编码类钙粘蛋白基因的克隆、鉴定及序列分析第82-84 页
　　· 讨论第84-86 页
第四章 PTD与CrylAc基因融合载体构建及表达第86-103 页
　　· 实验材料及相关仪器第86-88 页
　　　　· 菌株与质粒第86 页
　　　　· 试剂、培养基与主要缓冲液第86-88 页
　　　　· 培养基第88 页
　　　　· 仪器设备第88 页
　　　　· 供试昆虫第88 页
　　· 实验方法第88-92 页
　　　　· 引物设计和合成第88-89 页
　　　　· CrylAc基因模板制备第89 页
　　　　· Cry1Ac结构域基因的PCR扩增第89 页
　　　　· PCR及酶切产物的纯化、回收第89 页
　　　　· PTD、CrylAc与pET-21b载体的连接第89-90 页
　　　　· 大肠杆菌CaCl2感受态细胞制备第90 页
　　　　· 连接产物转化第90 页
　　　　· 提取质粒DNA第90-91 页
　　　　· 酶切及PCR检测第91 页
　　　　· 序列测定及分析第91 页
　　　　· 融合基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的诱导表达第91 页
　　　　· SDS-PAGE凝胶电泳检测第91-92 页
　　　　· 表达蛋白的免疫检测第92 页
　　　　· 蛋白纯化第92 页
　　　　· 融合蛋白的毒力测定第92 页
　　· 结果与分析第92-101 页
　　　　· PTD-CrylAc融合表达载体构建第92-97 页
　　　　· 融合蛋白的表达纯化第97-101 页
　　　　· 融合蛋白的活性测定第101 页
　　· 讨论第101-103 页
第五章 结论第103-105 页
参考文献第105-113 页
致谢第113-114 页
附录第114-123 页
作者简历第123页

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