论文目录 | |
| 摘要 | 第11-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-42页 |
| 第一章 HSP32/HO-1的研究进展 | 第16-32页 |
| 1 血红素加氧酶(hemeoxygenase, HO) | 第16-17页 |
| 2 HSP32基因表达的诱导与调节 | 第17-19页 |
| 2.1 HSP32的诱导因子 | 第17-18页 |
| 2.2 HSP32基因表达的调节 | 第18-19页 |
| 3 HSP32及反应产物的保护作用 | 第19-22页 |
| 3.1 抗凋亡 | 第20-21页 |
| 3.2 抗氧化 | 第21页 |
| 3.3 抗炎 | 第21-22页 |
| 3.4 抗增殖 | 第22页 |
| 3.5 促血管生成 | 第22页 |
| 4 HSP32在睾丸中的表达及作用 | 第22-23页 |
| 5 总结 | 第23页 |
| 参考文献 | 第23-32页 |
| 第二章 热对哺乳动物睾丸的影响 | 第32-42页 |
| 1 热处理的方法 | 第32页 |
| 2 热对雄性动物的影响 | 第32-33页 |
| 2.1 全身性影响 | 第32页 |
| 2.2 对精子发生及辜丸细胞的影响 | 第32-33页 |
| 2.3 对激素分泌的影响 | 第33页 |
| 3 热引起的细胞损伤机制 | 第33-34页 |
| 4 热和其他影响因子对睾丸的交互作用 | 第34-35页 |
| 5 遗传可塑性对调节热应激的影响 | 第35-36页 |
| 6 总结 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 第二部分 实验研究 | 第42-94页 |
| 第三章 慢性及急性热应激对小鼠睾丸结构,氧化能力及血清睾酮的影响 | 第42-52页 |
| 1 材料与方法 | 第42-43页 |
| 1.1 材料 | 第42页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第42页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第42页 |
| 1.1.3 药品及试剂 | 第42页 |
| 1.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 1.2.1 小鼠热处理 | 第42-43页 |
| 1.2.2 睾丸组织形态学 | 第43页 |
| 1.2.3 睾丸组织MDA、SOD和GSH-Px的测定 | 第43页 |
| 1.2.4 血清睾酮测定 | 第43页 |
| 1.3 数据分析 | 第43页 |
| 2 结果和分析 | 第43-47页 |
| 2.1 热处理对小鼠体重、睾丸指数及睾丸组织结构的影响 | 第43-46页 |
| 2.2 对小鼠血清睾酮的影响 | 第46-47页 |
| 2.3 热处理对小鼠睾丸组织MDA、SOD和GSH-Px水平的影响 | 第47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 3.1 热处理对小鼠体重、睾丸重量的影响及睾丸组织学变化 | 第48页 |
| 3.2 热处理对小鼠血清睾酮变化 | 第48-49页 |
| 3.3 热处理对小鼠睾丸组织MDA、T-SOD和GSH-Px水平的影响 | 第49页 |
| 4 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 第四章 热应激对小鼠睾丸细胞周期、凋亡及HSP32、CASPASE-3表达的影响 | 第52-68页 |
| 1 材料与方法 | 第52-55页 |
| 1.1 材料 | 第52页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第52页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第52页 |
| 1.1.3 药品及试剂 | 第52页 |
| 1.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 1.2.1 小鼠热处理 | 第52-53页 |
| 1.2.2 睾丸细胞凋亡及周期的测定 | 第53页 |
| 1.2.3 RNA提取 | 第53页 |
| 1.2.4 RNA浓度测定 | 第53页 |
| 1.2.5 荧光定量PCR测定HSP32及Caspase-3 mRNA表达 | 第53-54页 |
| 1.2.5.1 反转录 | 第53-54页 |
| 1.2.5.2 Real-time PCR反应 | 第54页 |
| 1.2.6 蛋白提取 | 第54-55页 |
| 1.2.7 Western blot测定HSP32及Caspase-3蛋白的表达 | 第55页 |
| 1.2.8 免疫组织化学检测HSP32及Caspase-3蛋白的表达 | 第55页 |
| 1.3 数据分析 | 第55页 |
| 2 结果和分析 | 第55-63页 |
| 2.1 热处理对睾丸细胞凋亡及周期的影响 | 第55-57页 |
| 2.2 慢性热处理对小鼠睾丸组织HSP32及Caspase-3 mRNA表达的影响 | 第57-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 3.1 热处理对小鼠睾丸细胞周期及细胞凋亡的影响 | 第63页 |
| 3.2 热处理对小鼠睾丸组织HSP32蛋白表达,Caspase-3蛋白表达及其活性的影响 | 第63-65页 |
| 4 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 第五章 热应激对小鼠睾丸支持细胞凋亡及HSP32表达的影响 | 第68-80页 |
| 1 材料与方法 | 第68-70页 |
| 1.1 材料 | 第68页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第68页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第68页 |
| 1.1.3 药品及试剂 | 第68页 |
| 1.2 实验方法 | 第68-70页 |
| 1.2.1 小鼠睾丸支持细胞的原代培养 | 第68-69页 |
| 1.2.2 细胞热处理及分组 | 第69页 |
| 1.2.3 支持细胞凋亡的检测 | 第69页 |
| 1.2.4 HSP32 mRNA及蛋白表达量的分析 | 第69页 |
| 1.2.5 Caspase-3 mRNA,蛋白及Caspase-3活性表达量的分析 | 第69页 |
| 1.2.6 细胞HSP32及Caspase-3蛋白的免疫组化 | 第69-70页 |
| 1.3 数据分析 | 第70页 |
| 2 结果和分析 | 第70-76页 |
| 2.1 小鼠睾丸支持细胞形态 | 第70页 |
| 2.2 慢性温和及急性转瞬热处理对支持细胞凋亡的影响 | 第70-71页 |
| 2.3 慢性温和热处理对HSP32和Caspase-3 mRNA、蛋白表达及Caspase-3活性的影响 | 第71-73页 |
| 2.4 急性热处理对HSP32和Caspase-3 mRNA、蛋白表达及Caspase-3活性的影响 | 第73-76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-80页 |
| 第六章 阻抑和激活HSP32基因对热处理后小鼠支持细胞凋亡及凋亡通路的影响 | 第80-94页 |
| 1 材料与方法 | 第80-82页 |
| 1.1 材料 | 第80页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第80页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第80页 |
| 1.1.3 药品及试剂 | 第80页 |
| 1.2 实验方法 | 第80-82页 |
| 1.2.1 siRNA的制备 | 第80-81页 |
| 1.2.2 转染(以6孔板为例) | 第81页 |
| 1.2.4 Hemin处理支持细胞浓度的筛选 | 第81页 |
| 1.2.5 支持细胞的热处理及分组 | 第81页 |
| 1.2.6 HSP32蛋白的表达 | 第81页 |
| 1.2.7 细胞凋亡的检测 | 第81-82页 |
| 1.2.8 Caspase-3 mRNA及活性检测 | 第82页 |
| 1.2.9 细胞培养上清中碳氧血红蛋白(HbCO)含量的检测 | 第82页 |
| 1.2.10 细胞内cGMP含量的检测 | 第82页 |
| 1.3 数据分析 | 第82页 |
| 2 结果和分析 | 第82-88页 |
| 2.1 HSP32特异性siRNA引起支持细胞凋亡 | 第82-84页 |
| 2.2 不同Hemin浓度对支持细胞的影响 | 第84页 |
| 2.3 阻抑或激活HSP32基因对热处理后支持细胞HSP32 mRNA及蛋白的表达 | 第84-86页 |
| 2.4 阻抑或激活HSP32基因对热处理后支持细胞凋亡的影响 | 第86-87页 |
| 2.5 阻抑或激活HSP32基因对热处理后支持细胞Caspase-3活性 | 第87页 |
| 2.6 阻抑或激活HSP32基因对热处理后支持细胞培养上清中CO及细胞内cGMP的影响 | 第87-88页 |
| 3 讨论 | 第88-91页 |
| 3.1 HSP32特异性siRNA引起支持细胞凋亡 | 第88-89页 |
| 3.2 不同Hemin浓度对支持细胞的影响 | 第89页 |
| 3.3 阻抑或激活HSP32基因对热处理后支持细胞HSP32表达、Caspase-3活性及细胞凋亡的影响 | 第89页 |
| 3.4 阻抑或激活HSP32基因对热处理后支持细胞培养上清中CO及细胞内cGMP的影响 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-94页 |
| 全文结论 | 第94-96页 |
| 附录 | 第96-104页 |
| 缩略词(ABBREVIATION) | 第104-106页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
