论文目录 | |
摘要 | 第12-13
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Abstract | 第13-15
页 |
1 引言 | 第15-34
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· 研究的目的和意义 | 第15-17
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· 骨桥蛋白的来源及纯化 | 第17-19
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· 骨桥蛋白的来源 | 第17
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· 骨桥蛋白基因的性状 | 第17
页 |
· 骨桥蛋白在机体中的分布 | 第17-18
页 |
· 骨桥蛋白表达调控 | 第18
页 |
· 骨桥蛋白的纯化 | 第18-19
页 |
· 蛋白层析方法及凝胶选择概述 | 第19-23
页 |
· 层析技术的原理 | 第19
页 |
· 层析一般目标及方法 | 第19-20
页 |
· 层析技术的分类 | 第20-21
页 |
· 层析凝胶选择 | 第21-23
页 |
· 骨桥蛋白结构与功能研究 | 第23-27
页 |
· 一级结构—氨基酸序列比较 | 第23-24
页 |
· 二级结构预测及结构模型 | 第24-25
页 |
· 翻译后修饰 | 第25
页 |
· 结构—功能分析 | 第25-27
页 |
· 蛋白结构研究方法 | 第27-33
页 |
· 二级结构预测方法简介 | 第27-29
页 |
· 三级结构预测方法 | 第29-30
页 |
· 二级结构测定方法简介 | 第30-32
页 |
· 三级结构测定方法 | 第32-33
页 |
· 本课题主要研究内容 | 第33
页 |
· 课题创新点 | 第33-34
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2 材料 | 第34-36
页 |
· 实验材料 | 第34
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· 主要试剂 | 第34-35
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· 主要仪器 | 第35-36
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3 方法 | 第36-45
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· 牛乳骨桥蛋白纯化工艺优化 | 第36-37
页 |
· 牛乳前处理及DEAE-Sephacel 阴离子交换层析 | 第36
页 |
· 去除酪蛋白实验 | 第36
页 |
· Phenyl–Sepharose 疏水作用层析 | 第36-37
页 |
· SOURCE 5RPC ST 反相作用层析 | 第37
页 |
· 牛乳骨桥蛋白的再鉴定 | 第37-39
页 |
· 制胶和制样 | 第37-38
页 |
· 电泳 | 第38-39
页 |
· 检测 | 第39
页 |
· 蛋白含量测定 | 第39-40
页 |
· 各洗脱峰蛋白含量测定 | 第39
页 |
· 各步层析洗脱峰骨桥蛋白含量检测 | 第39-40
页 |
· 骨桥蛋白抑制晶体生长活性的扫描电镜实验 | 第40-42
页 |
· 石英基片亲水性处理 | 第40
页 |
· 晶体生长抑制实验 | 第40-41
页 |
· 对比实验 | 第41
页 |
· 扫描电镜观察 | 第41-42
页 |
· 骨桥蛋白抑制晶体生长活性的原子吸收实验 | 第42-44
页 |
· 标准曲线及回收率实验 | 第42-43
页 |
· 各洗脱峰组分对草酸钙晶体生长抑制活性的原子吸收实验 | 第43-44
页 |
· 不同浓度骨桥蛋白抑制草酸钙晶体生长的原子吸收实验 | 第44
页 |
· 骨桥蛋白二级结构的傅里叶红外光谱测定 | 第44-45
页 |
· 方法 | 第44
页 |
· 图谱处理 | 第44-45
页 |
4 结果与分析 | 第45-66
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· 牛乳骨桥蛋白纯化优化 | 第45-48
页 |
· DEAE-Sephacel 阴离子交换层析 | 第45
页 |
· Phenyl–Sepharose 疏水作用层析 | 第45-47
页 |
· SOURCE 5RPC ST 反相作用层析 | 第47-48
页 |
· 不同色谱层析各个洗脱峰骨桥蛋白的SDS-PAGE 结果 | 第48-51
页 |
· 各层析步骤中蛋白含量测定结果 | 第51-53
页 |
· 各洗脱峰蛋白含量测定 | 第51-52
页 |
· 各洗脱峰骨桥蛋白含量测定标准曲线绘制 | 第52
页 |
· 各步层析洗脱峰骨桥蛋白含量检测 | 第52
页 |
· 各纯化步骤所得骨桥蛋白及最终纯度计算 | 第52-53
页 |
· 各层析步骤洗脱峰对草酸钙晶体生长影响的扫描电镜实验 | 第53-62
页 |
· DEAE–Sephacel 色谱层析各梯度洗脱组分对晶体生长抑制作用的扫描电镜实验 | 第55-59
页 |
· Phenyl–Sepharose 6FF 疏水作用层析洗脱各组分对晶体生长的抑制作用 | 第59-61
页 |
· SOURCE 5RPC ST 反相作用层析各洗脱组分对晶体生长抑制作用的扫描电镜实验 | 第61-62
页 |
· 骨桥蛋白抑制晶体生长活性的原子吸收实验 | 第62-63
页 |
· 骨桥蛋白二级结构的傅里叶红外光谱测定 | 第63-66
页 |
5 讨论 | 第66-71
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· 牛乳骨桥蛋白纯化优化 | 第66-67
页 |
· 牛乳骨桥蛋白的再鉴定 | 第67-68
页 |
· 牛乳骨桥蛋白二级结构测定 | 第68-71
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6 结论 | 第71-72
页 |
致谢 | 第72-73
页 |
参考文献 | 第73-81
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攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第81页 |