【关键词】  微血管密度；血管内皮生长因子；彩色多普勒血流显像

　　乳腺良、恶性肿瘤鉴别一直是研究的重点,本研究选用免疫组化法检测术后肿瘤组织内的微血管密度及血管内皮生长因子表达状况,探讨彩色多普勒血流显像应用的血管病理学基础,评价其应用价值。

　　1  资料与方法

　　1.1  临床资料  我院住院乳腺肿瘤患者92例,患者皆女性,术前未行化疗或放疗,其中乳腺癌46例,年龄23岁~74岁,平均年龄48岁,均为原发癌;其他乳腺良性病变46例,年龄26岁~66岁,平均年龄42岁。以上病例均经手术及病理证实。

　　1.2  方法  采用美国产HDI 5000彩色多普勒超声诊断系统,探头频率7.5 MHz，选用乳腺常规检测程序。首先,二维切面常规显示乳腺肿瘤的不同切面,观察肿瘤的声像图特征,以及双腋窝淋巴结是否肿大,作出声像图诊断，然后,用彩色的普勒血流显像(CDFI)多切面仔细观察肿瘤内部及周边血流情况、血管分布状态,选取血流信号最丰富区域进行脉冲多普勒取样,调整声束与血流入射夹角＜60°,获得动脉血流频谱,测量血流频谱参数,即最大流速(Vmax),最低流速(Vmin)及阻力指数(RI)，CDFI血流信号分级判定,按Adler方法［1］。术后病理常规石蜡包埋,连续5 μm厚切片2张,贴附于涂有多聚赖氨酸的防脱片上,采用SP法:分别进行VEGF免疫组化染色,经PBS液多次冲洗后,苏木素复染、脱水，二甲苯透明,树胶封片。血管内皮生长因子的计数:胞浆内含有棕黄或棕褐色颗粒的肿瘤细胞被计数为阳性细胞，每张切片选择5个区在400倍视野下连续计数100个瘤细胞,以组织中阳性细胞所占的百分比,将其分为4级:阳性细胞或阳性细胞＜5%为阴性(-);＜20个阳性细胞为低度表达(+);20个~50个阳性细胞为中度表达(++);＞50个阳性细胞为高度表达(+++)。MVD计数:先在低倍镜(40)下任选乳腺肿瘤组织中一个微血管的部位,然后在高倍镜(200)下进行观察,按照Weidner等的评判标准,计算乳腺肿瘤内……