论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6
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| ABSTRACT | 第6-11
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| 第一章 绪论 | 第11-29
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| · 植物病原细菌的致病机理研究 | 第11-16
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| · 主要的植物病原细菌 | 第11-13
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| · 病原细菌的侵染过程 | 第13-14
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| · 植物病原细菌的致病生化因子及致病相关基因 | 第14-16
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| · 双组分调控系统 | 第16-25
页 |
| · 双组分调控系统的序列特征 | 第17-19
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| · 双组分调控系统的分布 | 第19
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| · 双组分调控系统的调控机理 | 第19-22
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| · 双组分调控系统的功能 | 第22-24
页 |
| · 双组分调控系统是理想的药物候选靶标 | 第24-25
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| · 十字花科黑腐病菌及其双组分调控系统基因 | 第25-27
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| · 十字花科黑腐病菌 | 第25-26
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| · 十字花科黑腐病菌基因组注释的双组分调控系统基因 | 第26-27
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| · 已报道的Xcc双组分调控系统基因 | 第27
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| · 本研究的主要内容、目的和意义 | 第27-29
页 |
| · 本研究的主要内容 | 第27
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| · 本研究的目的和意义 | 第27-29
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| 第二章 材料与方法 | 第29-49
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| · 研究用菌株和质粒 | 第29-30
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| · 常规微生物学操作 | 第30-34
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| · 培养基 | 第30-31
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| · 培养条件 | 第31
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| · 菌株的保存 | 第31
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| · 常用抗生素 | 第31-32
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| · 突变体营养缺陷型检测 | 第32
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| · 胞外多糖的检测 | 第32-33
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| · 胞外酶的检测 | 第33-34
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| · Xcc生长曲线的测定 | 第34
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| · 分子操作技术 | 第34-47
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| · 常用试剂、溶液、缓冲液 | 第34-36
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| · DNA分子生物学操作 | 第36-41
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| · 聚合酶链式反应(PCR) | 第41-43
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| · 十字花科黑腐病菌总RNA提取 | 第43-45
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| · 细菌的转化与接合实验 | 第45-47
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| · 植株试验 | 第47-49
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| · 植株材料 | 第47
页 |
| · 器皿与工具 | 第47
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| · 致病性试验 | 第47-48
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| · 过敏反应 | 第48-49
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| · 从叶片回收细菌及叶内生长曲线 | 第49
页 |
| 第三章 Xcc基因组中colRS同源基因分析 | 第49-56
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| · Xcc 8004基因组中colRS的同源基因 | 第49-51
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| · colS和colR同源基因在Xcc 8004基因组中的遗传结构 | 第51
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| · Xcc 8004 colS和colR同源基因编码ColS和ColR的结构域 | 第51-53
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| · colRS同源基因产物保守结构域氨基酸序列多重比对 | 第53-54
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| · Xcc 8004 colS同源基因产物的跨膜结构分析 | 第54-55
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| · 小结 | 第55-56
页 |
| 第四章 colRS同源基因突变体构建及其在寄主叶表定殖分析 | 第56-67
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| · Xcc 8004 colRS同源基因突变体构建 | 第56-62
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| · 整合突变体构建的原理 | 第56-58
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| · Xcc 8004 colRS同源基因整合突变体构建 | 第58-62
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| · Xcc 8004 colRS同源基因突变体在寄主叶表定殖分析 | 第62-63
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| · NK1049突变体的遗传互补 | 第63-66
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| · 互补载体的制备 | 第64
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| · PCR扩增互补基因片段 | 第64-65
页 |
| · pLAFR3互补重组质粒的酶切验证 | 第65-66
页 |
| · 互补菌株在寄主叶表定殖分析 | 第66
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| · 小结 | 第66-67
页 |
| 第五章 colR_(Xcc)突变体的基本生理、代谢表型 | 第67-73
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| · NK1049不是营养缺陷型突变体 | 第67
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| · colR_(Xcc)突变不影响Xcc 8004菌株的运动能力 | 第67-68
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| · 半固体培养基平板检测泳动 | 第67-68
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| · 显微观察细菌的运动 | 第68
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| · colR_(Xcc)突变不影响Xcc胞外酶和胞外多糖的产生 | 第68-70
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| · 供试Xcc菌株菌液的准备 | 第68
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| · 胞外蛋白酶的检测 | 第68-69
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| · 胞外淀粉酶的检测 | 第69
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| · 胞外纤维素酶的检测 | 第69-70
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| · 胞外多糖的检测 | 第70
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| · 生物膜形成检测 | 第70-71
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| · NK1049突变体在液体培养基中的生长状况 | 第71-72
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| · NK1049突变体膜的渗透性分析 | 第72
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| · 小结 | 第72-73
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| 第六章 colR_(Xcc)与十字花科黑腐病菌的抗逆性有关 | 第73-75
页 |
| · NK1049抗重金属、有机溶剂、渗透压胁迫实验 | 第73
页 |
| · NK1049抗酸碱胁迫实验 | 第73
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| · 小结 | 第73-75
页 |
| 第七章 colR_(Xcc)与Xcc的致病性和HR反应相关 | 第75-78
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| · NK1049对寄主植物的致病力显著降低 | 第75
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| · NK1049在植物中的生长显著降低 | 第75-76
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| · NK1049在非寄主植物辣椒ECW-10R的HR反应显著降低 | 第76-77
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| · 小结 | 第77-78
页 |
| 第八章 colR_(Xcc)与hrp基因的表达调控关系 | 第78-82
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| · RT-PCR验证colR_(Xcc)突变对hrp基因转录的影响 | 第78-79
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| · colR_(Xcc)对hrpG和hrpX基因转录无明显影响 | 第79
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| · colR_(Xcc)正调控hrpC和hrpE转录单元的表达 | 第79
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| · hrpG或hrpX对colR_(Xcc)基因的表达无明显影响 | 第79
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| · 小结 | 第79-82
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| 第九章 讨论与结论 | 第82-86
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| · colR_(Xcc)与Xcc的定殖有关 | 第82-83
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| · colR_(Xcc)影响Xcc的抗逆性 | 第83
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| · colR_(Xcc)影响Xcc的生长速率 | 第83
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| · colR_(Xcc)影响Xcc侵染植物的能力 | 第83
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| · colR_(Xcc)调节膜渗透性 | 第83-84
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| · colR_(Xcc)可能调控hrp基因表达 | 第84
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| · colR是一个重要的双组分调控系统基因 | 第84-86
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| 参考文献 | 第86-101
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| 附件 | 第101-109
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| 附表1 colR_(Xcc)突变体验证PCR产物测序 | 第101-105
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| 附表2 互补colR_(Xcc)DNA片段测序 | 第105-109
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| 致谢 | 第109页 |
