论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-9
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| 英文摘要 | 第9-18
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| 符号说明 | 第18-19
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| 前言 | 第19-24
页 |
| 技术路线图 | 第24-27
页 |
| 第一章 抑瘤基因DLC-1在鼻咽癌中的表达 | 第27-47
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| 第一节 材料和方法 | 第27-35
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| 1.材料 | 第27-29
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| 2.方法 | 第29-35
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| 第二节 实验结果 | 第35-43
页 |
| 1.筛选标本 | 第35
页 |
| 2.RNA质量检测 | 第35-36
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| 3.差异RT-PCR检测DLC-1基因在鼻咽癌及鼻咽炎组织中的表达情况 | 第36-37
页 |
| 4.Real-time RT-PCR分析DLC-1的表达 | 第37-39
页 |
| 5.RT-PCR与Real-time RT-PCR结果统计学分析 | 第39
页 |
| 6.原位杂交检测DLC-1基因在正常上皮和鼻咽癌中的定位 | 第39-40
页 |
| 7.DLC-1蛋白在鼻咽癌组织中的表达和定位 | 第40-42
页 |
| 8.DLC-1基因mRNA水平以及蛋白水平表达的小结 | 第42-43
页 |
| 第三节 分析与讨论 | 第43-47
页 |
| 1.鼻咽癌标本的处理和激光捕获显微切割 | 第43-44
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| 2.real-time PCR技术 | 第44
页 |
| 3.DLC-1基因在鼻咽癌中表达下调或缺失 | 第44-47
页 |
| 第二章 探讨DLC-1基因在鼻咽癌中异常表达的可能机制 | 第47-86
页 |
| 第一节 材料和方法 | 第47-65
页 |
| 1 材料 | 第47-53
页 |
| 2 主要方法 | 第53-65
页 |
| 第二节 实验结果 | 第65-80
页 |
| 1.DLC-1基因突变检测结果 | 第65-69
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| 2.DLC-1的-29位点(A/T)SNP与人鼻咽癌易感性的关联分析 | 第69-71
页 |
| 3.DLC-1基因在鼻咽癌组织中LOH情况的分析 | 第71
页 |
| 4.DLC-1基因在鼻咽癌细胞系及鼻咽癌组织中甲基化情况分析 | 第71-76
页 |
| 5.5-Aza-Cd药物干预鼻咽癌细胞 | 第76-77
页 |
| 6.甲基转移酶(DNMTs)对DLC-1表达的影响 | 第77-78
页 |
| 7.局部甲基化分析DLC-1启动子活性的改变 | 第78-80
页 |
| 第三节 分析与讨论 | 第80-86
页 |
| 1.基因突变在DLC-1表达下调中的作用 | 第80-81
页 |
| 2.LOH在DLC-1基因表达下调中的作用 | 第81-82
页 |
| 3.DNA异常甲基化在DLC-1基因表达下调中的作用 | 第82-84
页 |
| 4.启动子区异常甲基化是DLC-1表达下调或缺失的主要机制 | 第84-86
页 |
| 第三章 DLC-1基因在鼻咽癌细胞中的功能研究 | 第86-118
页 |
| 第一节 材料与方法 | 第86-99
页 |
| 1 材料 | 第86-88
页 |
| 2 方法 | 第88-99
页 |
| 第二节 实验结果 | 第99-113
页 |
| 1 真核表达载体DLC-1/pcDNA3.1(+)的构建 | 第99-102
页 |
| 2 建立稳定表达DLC-1基因的5-8F细胞系 | 第102-105
页 |
| 3 稳定转染DLC-1基因对鼻咽癌细胞5-8F生物学特性的影响 | 第105-113
页 |
| 第三节 分析与讨论 | 第113-118
页 |
| 1.DLC-1抑制了鼻咽癌细胞的增殖能力 | 第113
页 |
| 2.DLC-1抑制鼻咽癌细胞的迁移和侵袭 | 第113-114
页 |
| 3.DLC-1影响鼻咽癌细胞生物学特性的可能原因 | 第114-118
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| 结论 | 第118-119
页 |
| 参考文献 | 第119-129
页 |
| 综述 | 第129-136
页 |
| 致谢 | 第136-138
页 |
| 攻读学位期间主要研究成果目录 | 第138-139
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