多个抗虫基因转化超甜玉米的研究 |
论文目录 | | | 1 前言 | 第1-10
页 | | 2 材料和方法 | 第10-26
页 | | · 材料 | 第10-14
页 | | · 实验方法 | 第14-26
页 | | · 超甜玉米外植体的准备和愈伤组织诱导 | 第14
页 | | · 质粒DNA的提取 | 第14-17
页 | | · 质粒DNA小量提取及纯化 | 第15-16
页 | | · 质粒DNA大量提取及纯化 | 第16-17
页 | | · 基因枪轰击转化 | 第17-18
页 | | · DNA 微弹的制备 | 第17
页 | | · 轰击材料准备 | 第17
页 | | · 轰击 | 第17-18
页 | | · 转化体的筛选 | 第18
页 | | · 植株分化再生与移栽 | 第18
页 | | · 超甜玉米子房注射法转化 | 第18-19
页 | | · 质粒DNA 浓度准备 | 第18
页 | | · 离体超甜玉米子房注射方法 | 第18
页 | | · 田间超甜玉米子房注射方法 | 第18-19
页 | | · 转基因植株抗虫性鉴定 | 第19
页 | | · 转基因植株的DNA 提取 | 第19-21
页 | | · 转基因玉米基因组DNA 快速提取 | 第19-20
页 | | · 转基因玉米植株总DNA 的大量提取 | 第20-21
页 | | · 转基因植株PCR 扩增 | 第21-22
页 | | · 转基因植株Southern 杂交分析 | 第22-24
页 | | · 目的片段回收 | 第22-23
页 | | · 转基因植株总DNA酶切、电泳及转膜 | 第23
页 | | · 探针标记 | 第23
页 | | · 预杂交及杂交 | 第23-24
页 | | · 洗膜及信号检测 | 第24
页 | | · 转基因植株基因表达分析(RT-PCR) | 第24-26
页 | | · 转基因植株总RNA提取 | 第24
页 | | · 反转录cDNA 第一链的合成 | 第24
页 | | · 目的基因 PCR 扩增 | 第24-26
页 | | 3 结果与分析 | 第26-64
页 | | · 基因枪法超甜玉米抗虫基因转化 | 第26-46
页 | | · 超甜玉米基因转化胚性愈伤组织受体系统的建立 | 第26-31
页 | | · 不同基因型胚龄与胚大小 | 第26-27
页 | | · 不同基因型胚龄与愈伤组织诱导 | 第27-28
页 | | · 2,4-D浓度对愈伤组织诱导的作用 | 第28-29
页 | | · AgNO_3和脯氨酸对诱导愈伤组织的作用 | 第29-30
页 | | · 除草剂Basta 筛选浓度试验 | 第30-31
页 | | · 超甜玉米稳定、高效再生成株系统的建立 | 第31-35
页 | | · 愈伤组织继代时间与植株再生的关系 | 第31-32
页 | | · 预再生与愈伤组织继代状态的关系 | 第32
页 | | · 蔗糖和激素配比对愈伤组织分化再生的影响 | 第32-34
页 | | · 愈伤组织直接分化再生与预分化后再生的比较 | 第34
页 | | · 再生植株生根、壮苗及移栽技术 | 第34-35
页 | | · 基因枪转化超甜玉米愈伤组织情况 | 第35-36
页 | | · 基因枪转化超甜玉米愈伤组织情况 | 第35-36
页 | | · 基因枪转化超甜玉米愈伤组织及再生植株体系 | 第36
页 | | · 质粒酶切及目的基因片段回收 | 第36-37
页 | | · 转基因T_0 植株PCR 检测 | 第37-38
页 | | · 转基因T_0 植株的Southern blot 分析 | 第38-40
页 | | · 转基因T_1代植株Southern blot 分析 | 第40-41
页 | | · T_1代植株抗虫性分析 | 第41-43
页 | | · 转基因T_2代植株基因表达分析(RT-PCR) | 第43-44
页 | | · 小结 | 第44-46
页 | | · 子房注射法将抗虫基因导入超甜玉米的研究 | 第46-64
页 | | · 离体子房注射法转化 | 第46
页 | | · 田间子房注射法转化 | 第46-47
页 | | · 转基因T_0 植株PCR 检测 | 第47
页 | | · 转基因T_0植株的Southern blot验证 | 第47-48
页 | | · 转基因T_1 代植株田间玉米螟抗性鉴定 | 第48-49
页 | | · 转基因T_1代植株室内玉米螟抗性鉴定 | 第49-50
页 | | · 子房注射法转基因植株T_1代PCR 检测 | 第50
页 | | · 子房注射法转基因植株T_1代Southern blot 验证 | 第50-51
页 | | · 小结 | 第51-64
页 | | 4 讨论 | 第64-68
页 | | · 促进愈伤组织诱导,改善愈伤组织质量 | 第64
页 | | · 提高转基因植株再生频率,减少无性变异 | 第64-65
页 | | · 子房注射法转化的可行性 | 第65-66
页 | | · 多基因共转化提高基因转化效率和频率 | 第66
页 | | · 本研究特色及创新 | 第66-67
页 | | · 进一步研究设想 | 第67-68
页 | | 5 结论 | 第68-70
页 | | 致谢 | 第70-71
页 | | 参考文献 | 第71-88
页 | | 英文摘要 | 第88-92
页 | | 附录A 文献综述 | 第92-127
页 | | 附录B 缩写词及英汉对照 | 第127-129
页 | | 附录C 学位论文承诺书 | 第129页 |
|
|
|
