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不吸水链霉菌基因转移系统的建立及嘧肽霉素生物合成基因的研究

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不吸水链霉菌基因转移系统的建立及嘧肽霉素生物合成基因的研究
论文目录
 
摘要第1-10页
Abstract第10-12页
前言第12-13页
第一章 抗生素生物合成的分子生物学研究进展第13-38页
  · 抗生素生物合成相关基因的研究策略第13-16页
  · 链霉菌抗生素生物合成基因的功能分析第16-17页
  · 抗生素生物合成基因簇的研究进展第17-32页
  · 组合生物合成简介第32-34页
  · 嘧肽霉素的介绍第34-38页
第二章 不吸水链霉菌辽宁变种的紫外诱变第38-47页
  1 材料与方法第38-40页
  2 结果与分析第40-46页
    · 野生型嘧肽霉素产生菌的紫外诱变第40页
    · 不产素突变株的形态变化第40-42页
    · 不产素突变株的传代稳定性第42页
    · 高产菌株的选育第42-43页
    · 发酵液活性测定第43-44页
    · 突变菌株的分子生物学验证第44-46页
  3 小结第46-47页
第三章 原生质体法建立不吸水链霉菌的质粒转化系统第47-70页
  第一节 突变株UV2136原生质体的制备和再生第47-57页
    1 材料与方法第47-50页
    2 结果与分析第50-56页
      · 菌丝生长适宜条件的选择第50-53页
      · 酶解系统适宜条件的选择第53-55页
      · 再生条件的选择第55-56页
    3 小结第56-57页
  第二节 突变株UV2136转化系统的建立和优化第57-70页
    1 材料与方法第57-61页
    2 结果与分析第61-68页
      · 突变株UV2136抗药性标记的筛选第61-62页
      · 质粒pIJ702向突变株UV2136的转化第62-67页
      · 大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pWHM3向突变株UV2136的转化第67-68页
    3 小结第68-70页
第四章 接合转移在不吸水链霉菌中的应用第70-86页
  第一节 接合转移质粒载体的构建第70-83页
    1 材料与方法第70-72页
    2 结果与分析第72-82页
      · 菌株04-2-2的抗药性分析第72-73页
      · pKC1139-tsr的构建第73-77页
      · pSET152-tsr的构建第77-82页
    3 小结第82-83页
  第二节 接合转移在不吸水链霉菌辽宁变种中的应用第83-86页
    1 材料与方法第83-84页
    2 结果与分析第84-85页
      · pKC1139-tsr向不吸水链霉菌辽宁变种的转化第84-85页
      · pSET152-tsr不能转化不吸水链霉菌辽宁变种第85页
    3 小结第85-86页
第五章 嘧肽霉素生物合成基因CytoA、B、C的克隆和功能分析第86-109页
  1 材料与方法第86-91页
  2 结果与分析第91-108页
    · 链霉菌基因组DNA最佳酶切条件的摸索第91-92页
    · 含互补基因的转化子的获得第92-93页
    · 插入片段的获得第93-94页
    · 插入片断的序列分析第94-97页
    · 克隆基因的功能分析第97-108页
  3 小结第108-109页
第六章 cytoD的克隆和功能分析第109-121页
  1 材料与方法第109-110页
  2 结果与分析第110-120页
    · CGA合酶基因片段的获得第110-112页
    · 利用地高辛标记检测不吸水链霉菌中的同源片段第112-113页
    · 不吸水链霉菌中CGA合酶基因同源片段的克隆第113页
    · 不吸水链霉菌中CGA合酶基因同源片段的序列分析第113-115页
    · 生物合成相关基因cytoD的功能分析第115-120页
  3 小节第120-121页
第七章 结论与讨论第121-126页
  1 嘧肽霉素的紫外诱变第121页
  2 嘧肽霉素生物合成阻断突变株的原生质体制备和再生第121-122页
  3 嘧肽霉素生物合成阻断突变株基因转移系统的建立第122-123页
  4 接合转移建立不吸水链霉菌辽宁变种的质粒转移系统第123页
  5 嘧肽霉素生物合成相关基因cytoA、cytoB、cytoC的克隆和功能分析第123-124页
  6 嘧肽霉素生物合成基因cytoD的克隆和序列分析第124页
  7 本论文的创新与不足之处第124-126页
参考文献第126-139页
致谢第139-140页
附录第140 页

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