论文目录 | |
| 缩略语表 | 第11-13
页 |
| 中文摘要 | 第13-16
页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-37
页 |
| 1 组织培养研究进展 | 第16-23
页 |
| 1．1 茎尖培养 | 第16-18
页 |
| 1．1．1 分离无病毒植株 | 第16-17
页 |
| 1．1．2 快速繁殖 | 第17-18
页 |
| 1．1．3 辐射诱变进行品种改良 | 第18
页 |
| 1．2 叶片、叶柄和匍匐茎等器官的培养 | 第18-19
页 |
| 1．3 花药培养 | 第19-21
页 |
| 1．3．1 单倍体育种 | 第19-20
页 |
| 1．3．2 获得脱毒苗 | 第20-21
页 |
| 1．4 离体胚培养 | 第21-22
页 |
| 1．5 原生质体培养及融合 | 第22-23
页 |
| 1．6 细胞悬浮培养 | 第23
页 |
| 2 影响外植体器官发生的因子及生理研究 | 第23-25
页 |
| 2．1 活性氧与外植体器官发生 | 第23-24
页 |
| 2．2 抗氧化酶与外植体器官发生 | 第24-25
页 |
| 3 组培环境对组培苗生长的影响 | 第25-28
页 |
| 3．1 物理因子 | 第25-26
页 |
| 3．1．1 光 | 第25
页 |
| 3．1．2 温度 | 第25-26
页 |
| 3．1．3 湿度 | 第26
页 |
| 3．1．4 气体的影响 | 第26
页 |
| 3．2 化学因子 | 第26-28
页 |
| 3．2．1 碳源 | 第26-27
页 |
| 3．2．2 离子 | 第27
页 |
| 3．3．3 培养基的pH值 | 第27
页 |
| 3．3．4 支持材料 | 第27-28
页 |
| 4 突变体筛选 | 第28-29
页 |
| 5 种质资源保存 | 第29-30
页 |
| 6 遗传转化 | 第30-37
页 |
| 6．1 GUS，NOS和NPT Ⅱ基因的转化 | 第30-32
页 |
| 6．2 抗虫基因的转化 | 第32
页 |
| 6．3 抗病毒基因的转化 | 第32-33
页 |
| 6．4 抗逆基因的转化 | 第33
页 |
| 6．5 抗除草剂基因工程 | 第33-34
页 |
| 6．6 品质改良的基因工程 | 第34-37
页 |
| 第二章 草莓叶片高效再生体系的建立 | 第37-46
页 |
| 1 材料和方法 | 第37-38
页 |
| 1．1 材料 | 第37-38
页 |
| 1．2 方法 | 第38
页 |
| 1．2．1 培养基 | 第38
页 |
| 1．2．2 不同有色膜处理及其光谱辐射能的测定 | 第38
页 |
| 1．2．3 暗处理 | 第38
页 |
| 1．2．4 培养条件 | 第38
页 |
| 1．3 数据统计 | 第38
页 |
| 2 结果与分析 | 第38-42
页 |
| 2．1 不同激素组合对丰香不定芽分化的影响 | 第38-39
页 |
| 2．2 AgNO_3对草莓不定芽分化的影响 | 第39-40
页 |
| 2．3 不同有色膜物理特性及对丰香不定芽形成的影响 | 第40-41
页 |
| 2．4 暗处理对丰香不定芽形成的影响 | 第41-42
页 |
| 2．5 生根和驯化移栽 | 第42
页 |
| 3 讨论 | 第42-46
页 |
| 第三章 不同有色膜下丰香草莓的再生机理 | 第46-51
页 |
| 1 材料与方法 | 第46-47
页 |
| 1．1 材料 | 第46
页 |
| 1．2 培养基及培养条件 | 第46-47
页 |
| 1．2．1 培养基 | 第46-47
页 |
| 1．2 酶活性和丙二醛(MDA)含量的测定 | 第47
页 |
| 1．3 激素含量测定 | 第47
页 |
| 2 结果与分析 | 第47-49
页 |
| 2．1 外植体在不同有色膜下的生理效应 | 第47-49
页 |
| 2．1．1 叶绿素含量的变化 | 第47
页 |
| 2．1．2 抗氧化酶活性的变化 | 第47-49
页 |
| 2．1．3 MDA含量的变化 | 第49
页 |
| 2．1．4 激素含量的变化 | 第49
页 |
| 3 讨论 | 第49-51
页 |
| 第四章 AgNO_3对草莓外植体生长及抗氧化酶活性的影响 | 第51-58
页 |
| 1 材料与方法 | 第51-53
页 |
| 1．1 材料 | 第51-52
页 |
| 1．2 方法 | 第52-53
页 |
| 1．2．2．1 酶的提取及测定 | 第52
页 |
| 1．2．2．2 叶绿素色素含量 | 第52
页 |
| 1．2．2．3 根系的活力 | 第52
页 |
| 1．2．2．4 IAA含量 | 第52
页 |
| 1．2．2．5 IAA氧化酶活性测定 | 第52
页 |
| 1．2．2．6 脯氨酸含量的测定 | 第52
页 |
| 1．2．2．7 乙烯释放量的测定 | 第52-53
页 |
| 2 结果与分析 | 第53-55
页 |
| 2．1 AgNO_3对草莓根生长的影响 | 第53
页 |
| 2．2 AgNO_3对再生草莓植株生长的影响 | 第53-54
页 |
| 2．3 AgNO_3对草莓叶片抗氧化酶的活性，O_2~(·-)生成速率及MDA含量的影响 | 第54
页 |
| 2．4 AgNO_3对草莓叶片脯氨酸含量，乙烯释放量，IAA含量及其氧化酶活性的影响 | 第54-55
页 |
| 3 讨论 | 第55-58
页 |
| 第五章 抗生素对草莓外植体生长的影响 | 第58-66
页 |
| 1 材料与方法 | 第58-59
页 |
| 1．1 材料 | 第58
页 |
| 1．2 试剂 | 第58-59
页 |
| 1．3 试验设计 | 第59
页 |
| 2 结果与分析 | 第59-62
页 |
| 2．1 Kan对组织培养形态发生的影响 | 第59-60
页 |
| 2．2 Cef对组织培养形态发生的影响 | 第60-61
页 |
| 2．3 Carb对组织培养形态发生的影响 | 第61-62
页 |
| 2．4 Cef和Carb对组织培养形态发生的影响 | 第62
页 |
| 3 讨论 | 第62-66
页 |
| 第六章 抗菌肽D和Insulin基因植物表达载体的构建 | 第66-74
页 |
| 1 材料和方法 | 第67-69
页 |
| 1．1 菌株和质粒 | 第67
页 |
| 1．2 酶及生化药剂 | 第67
页 |
| 1．3 培养基 | 第67
页 |
| 1．4 质粒DNA的小量提取 | 第67
页 |
| 1．5 PCR | 第67-68
页 |
| 1．4 植物重组表达载体pBI12-APD和pBI121-INS的构建 | 第68-69
页 |
| 1．4．1 pBI121-APD载体的构建 | 第68
页 |
| 1．4．2 pBI121-INS载体的构建步骤 | 第68-69
页 |
| 1．5 重组质粒的鉴定 | 第69
页 |
| 1．6 目的基因的序列测定 | 第69
页 |
| 2 结果与分析 | 第69-72
页 |
| 2．1 pBI121-APD和pBI121-INS基因植物表达载体的构建策略 | 第69-70
页 |
| 2．2 pBI121-APD和pBI121-INS基因植物表达载体的酶切鉴定 | 第70-72
页 |
| 2．2．1 pBI121-APD基因植物表达载体的酶切鉴定 | 第70-71
页 |
| 2．2．2 pBI121-INS基因植物表达载体的酶切鉴定 | 第71-72
页 |
| 2．3 目的基因的序列测定 | 第72
页 |
| 3 讨论 | 第72-74
页 |
| 第七章 根癌农杆菌介导法转化草莓及转基因植株的鉴定 | 第74-87
页 |
| 1 材料和方法 | 第74-79
页 |
| 1．1 材料 | 第74-75
页 |
| 1．1．1 植物材料 | 第74
页 |
| 1．1．2 菌株和质粒 | 第74
页 |
| 1．1．3 化学试剂药品 | 第74-75
页 |
| 1．1．4 培养基 | 第75
页 |
| 1．1．5 引物合成 | 第75
页 |
| 1．1．5．1 检测抗菌肽APD基因的引物设计 | 第75
页 |
| 1．1．5．2 检测NPTⅡ基因的引物设计 | 第75
页 |
| 1．1．5．3 检测胰岛素INS基因的引物设计 | 第75
页 |
| 1．2 方法 | 第75-79
页 |
| 1．2．1 农杆菌的培养 | 第75
页 |
| 1．2．2 受体材料的预培养 | 第75
页 |
| 1．2．3 农杆菌侵染 | 第75
页 |
| 1．2．4 共培养、筛选培养、继代培样 | 第75-76
页 |
| 1．2．5 影响农杆菌转化效果的因素 | 第76
页 |
| 1．2．5．1 菌液浓度和侵染时间 | 第76
页 |
| 1．2．5．2 选择培养中抑菌抗生素及浓度的确定 | 第76
页 |
| 1．2．5．3 预培养时间 | 第76
页 |
| 1．2．5．4 共培养时间 | 第76
页 |
| 1．2．5．5 选择方式 | 第76
页 |
| 1．2．6 生根培养 | 第76-77
页 |
| 1．2．7 转基因草莓的分子生物学鉴定 | 第77-79
页 |
| 1．2．7．1 草莓基因组DNA的快速提取(改良SDS法) | 第77
页 |
| 1．2．7．2 PCR检测 | 第77
页 |
| 1．2．7．3 Southern杂交 | 第77-79
页 |
| 1．2．7．3．1 草莓基因组DNA的提取 | 第78
页 |
| 1．2．7．3．2 草莓基因组DNA的酶切 | 第78
页 |
| 1．2．7．3．3 电泳及转膜 | 第78-79
页 |
| 1．2．7．3．4 探针制备及标记 | 第79
页 |
| 1．2．7．3．5 杂交 | 第79
页 |
| 2 结果 | 第79-84
页 |
| 2．1 菌液浓度对转化效率的影响 | 第79-80
页 |
| 2．2 侵染时间对转化效率的影响 | 第80
页 |
| 2．3 预培养时间对转化率的影响 | 第80-81
页 |
| 2．4 共培养时间对转化率的影响 | 第81
页 |
| 2．5 抗生素对农杆菌的抑菌效果 | 第81-82
页 |
| 2．6 筛选方式对转化率的影响 | 第82
页 |
| 2．7 草莓转APD基因植株和转INS基因愈伤组织的获得 | 第82
页 |
| 2．8 转基因草莓植株的检测 | 第82-84
页 |
| 2．8．1 PCR鉴定 | 第82-84
页 |
| 2．8．1．1 草莓APD基因转化株的检测 | 第82-83
页 |
| 2．8．1．2 草莓INS基因转化愈伤组织的检测PCR鉴定 | 第83-84
页 |
| 2．8．2 转基因草莓的Southern blot分析 | 第84
页 |
| 3 讨论 | 第84-87
页 |
| 参考文献 | 第87-98
页 |
| ABSTRACT | 第98-101
页 |
| 博士期间发表的论文 | 第101
页 |
