论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 缩略词表 | 第6-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-26页 |
| 1.1 拟南芥叶扁平细胞发育及其研究进展 | 第10-17页 |
| 1.1.1 拟南芥表皮细胞发育过程 | 第10-11页 |
| 1.1.2 拟南芥叶扁平细胞发育调控基因及分子机理 | 第11-12页 |
| 1.1.3 拟南芥细胞骨架调控扁平细胞的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.4 ROP GTPase信号网络调控拟南芥扁平细胞形态建成 | 第14-17页 |
| 1.2 生长素调控叶扁平细胞形态建成的研究进展 | 第17-22页 |
| 1.2.1 生长素极性运输的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.2 蛋白磷酸化和去磷酸化调控生长素极性运输的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2.3 胞吞回收调控PIN1蛋白的极性分布 | 第19-20页 |
| 1.2.4 生长素通过TMK和ABPl复合体调控ROP信号途径 | 第20-21页 |
| 1.2.5 ROP信号途径通过胞吞回收来调控PIN1蛋白的极性分布 | 第21-22页 |
| 1.3 蛋白磷酸酶PP1研究进展 | 第22-24页 |
| 1.4 本论文的研究意义 | 第24-26页 |
| 第二部分 实验材料及方法 | 第26-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.1 拟南芥材料 | 第26页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第26页 |
| 2.2 实验仪器和试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.1 实验仪器菌 | 第26页 |
| 2.2.2 实验相关酶、试剂和试剂盒 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-37页 |
| 2.3.1 拟南芥植株种植培养 | 第27-28页 |
| 2.3.2 突变体扁平形态分析 | 第28页 |
| 2.3.3 拟南芥基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.3.4 生长素对topp4-1突变体扁平细胞发育的影响 | 第29页 |
| 2.3.5 总RNA的提取及Real-time RT-PCR定量分析 | 第29页 |
| 2.3.6 带HIS标签的PIN1蛋白质的纯化 | 第29页 |
| 2.3.7 带GST标签的蛋白质的纯化 | 第29-30页 |
| 2.3.8 酵母双杂交实验 | 第30-31页 |
| 2.3.9 BiFC实验 | 第31页 |
| 2.3.10 原生质体中游离及外源基因的转化 | 第31-32页 |
| 2.3.11 微丝和微管活体观察及药物处理 | 第32页 |
| 2.3.12 荧光原位杂交实验 | 第32-33页 |
| 2.3.13 基因枪转化外源基因 | 第33页 |
| 2.3.14 ROP2活性测定 | 第33-34页 |
| 2.3.15 体外磷酸化实验 | 第34-35页 |
| 2.3.16 膜蛋白提取和体内磷酸化检测 | 第35-37页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第37-65页 |
| 3.1 一个新的扁平细胞突变体的筛选和鉴定 | 第37页 |
| 3.2 拟南芥topp4-1突变体叶扁平细胞变小,细胞凸出形成缺失 | 第37-40页 |
| 3.3 TOPP4基因突变对叶扁平细胞发育过程的影响 | 第40-42页 |
| 3.4 在topp4-1突变体中超表达TOPP4基因可以恢复其突变表型 | 第42-44页 |
| 3.5 在野生型中超表达TOPP4能促进扁平细胞凸出的形成和伸展 | 第44页 |
| 3.6 在野生型中用artifcial microRNA技术降低TOPP4基因的表达可引起扁平细胞形态缺陷表型 | 第44-46页 |
| 3.7 突变topp4-1蛋白对植株生长有显性负效应,外源施加PP1的抑制剂抑制扁平细胞的凸出的形成 | 第46-48页 |
| 3.8 外源性生长素不能恢复topp4-1扁平细胞形态缺陷 | 第48-50页 |
| 3.9 TOPP4参与到PIN1介导的扁平细胞通路 | 第50-52页 |
| 3.10 TOPP4与PID拮抗调控了扁平细胞形态建成 | 第52-54页 |
| 3.11 TOPP4与PIN1蛋白在体外、体内均有相互作用 | 第54-55页 |
| 3.12 TOPP4能将磷酸化的PIN1去磷酸化 | 第55-57页 |
| 3.13 topp4-1突变体中PIN1在极性定位改变 | 第57-59页 |
| 3.14 TOPP4可能参与到PIN1囊泡运输 | 第59-60页 |
| 3.15 TOPP4调控扁平细胞形态建成依赖于ROP-RIC介导的信号通路 | 第60-62页 |
| 3.16 TOPP4调控扁平细胞形态建成依赖于ROP-RIC介导的细胞骨架 | 第62-64页 |
| 3.17 TOPP4通过调控微管的稳定性和微丝的聚合来调控细胞骨架的分布 | 第64-65页 |
| 第四部分 讨论与展望 | 第65-69页 |
| 4.1 突变topp4-1蛋白对扁平细胞形态建成有显性负效应 | 第65-66页 |
| 4.2 TOPP4通过对PIN1的去磷酸化来调控PIN1的极性分布和囊泡运输 | 第66页 |
| 4.3 TOPP4通过ROP信号通路调控微丝骨架 | 第66-67页 |
| 4.4 TOPP4介导的PIN1去磷酸化调控扁平细胞的形态建成 | 第67页 |
| 4.5 展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 在学期间的研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
