论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-10
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| ABSTRACT | 第10-12
页 |
| 第1章 绪论 | 第12-36
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| · 革兰氏阴性细菌的群体感应系统 | 第13-23
页 |
| · 革兰氏阴性细菌群体感应系统的信号分子 | 第14-17
页 |
| · AHL 类信号分子的合成 | 第17-18
页 |
| · 几种革兰氏阴性细菌群体感应类型 | 第18-23
页 |
| · 海洋费氏弧菌（Vibrio fischeri）群体感应系统 | 第18-20
页 |
| · 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）群体感应系统 | 第20-22
页 |
| · 胡萝卜软腐欧文氏菌（Erwinia carotovora）群体感应系统 | 第22
页 |
| · 根癌土壤杆菌（Agrobacterium tumefaciens）群体感应系统 | 第22-23
页 |
| · 革兰氏阳性细菌的群体感应系统 | 第23-25
页 |
| · 革兰氏阳性细菌群体感应系统的概况 | 第23-24
页 |
| · 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）群体感应系统 | 第24-25
页 |
| · 细菌种间的群体感应系统 | 第25-28
页 |
| · 细菌种间群体感应系统的概况 | 第25-26
页 |
| · 哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）群体感应系统 | 第26-28
页 |
| · 群体感应在生物防治中的作用 | 第28-29
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| · AHL 降解酶的研究进展 | 第29-35
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| · AHL-内酯酶 | 第29-34
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| · AHL-内酯酶概述 | 第29-31
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| · AHL-内酯酶结构特性 | 第31-33
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| · AHL-内酯酶活性检测 | 第33-34
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| · AHL-酰胺酶 | 第34-35
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| · 本研究的目的和意义 | 第35-36
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| 第2章 苏云金芽胞杆菌 aiiA 基因的克隆和生物信息学分析 | 第36-77
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| · 材料和方法 | 第36-42
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| · 实验材料 | 第36
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| · 质粒和菌株 | 第36
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| · 试剂 | 第36
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| · 缓冲液 | 第36
页 |
| · 实验方法 | 第36-42
页 |
| · 引物设计 | 第36-37
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| · 质粒DNA 的制备 | 第37-38
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| · 基因组DNA 的制备 | 第38
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| · aiiA 基因的克隆 | 第38-41
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| · 16S rRNA 基因的克隆 | 第41-42
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| · 基因测序与数据处理 | 第42
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| · 结果与分析 | 第42-73
页 |
| · 克隆aiiA 基因的Bt 菌株的种属分析 | 第42-48
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| · aiiA 基因的PCR 扩增和分子克隆 | 第48-56
页 |
| · AHL-Lactonase 结构分析 | 第56-73
页 |
| · AHL-Lactonase 理化表征分析 | 第56-59
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| · AHL-Lactonase 的同源性分析 | 第59-62
页 |
| · AHL-Lactonase 亲水性分析 | 第62-64
页 |
| · AHL-Lactonase 活性结构域预测 | 第64-66
页 |
| · AHL-Lactonase 空间结构分析 | 第66-70
页 |
| · AHL-Lactonase 进化树分析 | 第70-73
页 |
| · 小结与讨论 | 第73-77
页 |
| 第3章 含 aiiA 基因工程菌的表达及其抗病活性分析 | 第77-101
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| · 材料和方法 | 第77-87
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| · 实验材料 | 第77-78
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| · 菌株与质粒 | 第77
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| · 试剂 | 第77
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| · 培养基 | 第77
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| · 缓冲液 | 第77-78
页 |
| · 仪器 | 第78
页 |
| · 实验方法 | 第78-87
页 |
| · 表达载体构建 | 第78-82
页 |
| · 外源基因的诱导表达及表达条件优化 | 第82-84
页 |
| · GST-AHL-Lactonase 包涵体的制备与变性及复性 | 第84-85
页 |
| · 可溶性表达AHL-Lactonase-B15 的分离纯化 | 第85-86
页 |
| · AHL-Lactonase 活性的检测 | 第86
页 |
| · AHL-Lactonase 对胡萝卜软腐欧文氏杆菌抗病性测定 | 第86-87
页 |
| · 结果与分析 | 第87-97
页 |
| · GST-AHL-Lactonase 包涵体的表达 | 第87-92
页 |
| · 诱导时间对GST-AHL-Lactonase 表达的影响 | 第87
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| · 培养温度对GST-AHL-Lactonase 表达的影响 | 第87-88
页 |
| · IPTG 浓度对GST-AHL-Lactonase 表达的影响 | 第88-89
页 |
| · GST-AHL-Lactonase 变性复性 | 第89-90
页 |
| · 复性后GST-AHL-Lactonase 活性检测 | 第90-91
页 |
| · 复性后GST-AHL-Lactonase 的抗病性测定 | 第91-92
页 |
| · AHL-Lactonase 的可溶性表达 | 第92-97
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| · IPTG 浓度对AHL-Lactonase-B15 表达的影响 | 第92-93
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| · 诱导表达温度和时间对AHL-Lactonase-B15 表达的影响 | 第93-95
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| · 镍离子亲和层析纯化结果 | 第95
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| · AHL-Lactonase-B15 活性的检测 | 第95-96
页 |
| · AHL-Lactonase-B15 抗病性测定 | 第96-97
页 |
| · 小结与讨论 | 第97-101
页 |
| 第4章 AHL-Lactonase-B15 酶动力学研究 | 第101-113
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| · 材料和方法 | 第101-103
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| · 实验材料 | 第101
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| · 菌株 | 第101
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| · 试剂 | 第101
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| · 仪器 | 第101
页 |
| · 实验方法 | 第101-103
页 |
| · AHL-Lactonase-B15 的分离纯化及纯度鉴定 | 第101
页 |
| · AHL-Lactonase-B15 蛋白含量的测定 | 第101
页 |
| · AHL-Lactonase-B15 活力测定方法 | 第101-102
页 |
| · 温度对AHL-Lactonase-B15 活力影响测定的方法 | 第102-103
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| · pH 对AHL-Lactonase-B15 活力影响测定的方法 | 第103
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| · 动力学参数Km 值确定的方法 | 第103
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| · 结果与分析 | 第103-111
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| · 底物含量与HPLC 峰面积的关系 | 第103-105
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| · 温度对AHL-Lactonase-B15 活力的影响 | 第105-107
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| · pH 对AHL-Lactonase-B15 活力的影响 | 第107-109
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| · AHL-Lactonase-B15 动力学参数 | 第109-111
页 |
| · 小结与讨论 | 第111-113
页 |
| 第5章 苏云金芽胞杆菌 LLB19 发酵培养基配方优化及发酵 培养基对 AHL 的降解作用 | 第113-126
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| · 材料和方法 | 第113-115
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| · 实验材料 | 第113
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| · 菌株 | 第113
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| · 培养基 | 第113
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| · 实验方法 | 第113-115
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| · 发酵培养条件 | 第113
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| · 芽胞量测定 | 第113
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| · 发酵培养基的优化 | 第113-114
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| · 发酵培养基对AHL 影响分析 | 第114-115
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| · 结果与分析 | 第115-125
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| · 单因子实验 | 第115-117
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| · 碳源单因子 | 第115-116
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| · 氮源单因子 | 第116-117
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| · Plackett-Burman 设计法筛选培养基中影响发酵液芽胞产量的重要因子 | 第117-118
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| · 爬坡路径方法确定发酵培养基重要影响因子的最适浓度范围 | 第118-119
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| · 响应面分析法确定发酵培养基最佳浓度配方 | 第119-123
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| · 模型验证 | 第123
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| · 发酵培养基对AHL 影响分析 | 第123-125
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| · 小结与讨论 | 第125-126
页 |
| 第6章 总结与展望 | 第126-128
页 |
| 参考文献 | 第128-141
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| 附录 | 第141-142
页 |
| 致谢 | 第142页 |
