论文目录 | |
摘要 | 第1-7
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Abstract | 第7-14
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第一章 引言 | 第14-24
页 |
· CIA 概况 | 第14
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· CAV 病原学 | 第14-18
页 |
· CAV 病毒学分类与结构特性 | 第14-15
页 |
· CAV 理化特性 | 第15
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· CAV 培养、复制及转录 | 第15-16
页 |
· CAV 基因编码蛋白及功能研究 | 第16-18
页 |
· 蛋白与蛋白相互作用研究的相关技术 | 第18-22
页 |
· 噬菌体表面呈现技术 | 第18-19
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· 串联亲和纯化技术 | 第19
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· 免疫共沉淀技术 | 第19-20
页 |
· GST 融合蛋白沉降技术 | 第20
页 |
· 酵母双杂交系统 | 第20-21
页 |
· 蛋白质芯片技术 | 第21-22
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· 鸡贫血病毒蛋白与蛋白相互作用研究进展 | 第22
页 |
· 本研究的目的及意义 | 第22-24
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第二章 鸡贫血病毒蛋白多克隆抗体的制备 | 第24-33
页 |
· 材料和方法 | 第24-28
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· 菌株与质粒 | 第24
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· 实验动物 | 第24
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· 主要仪器 | 第24-25
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· 试剂与药品 | 第25
页 |
· 试剂配制 | 第25-26
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· CAV VP1、VP2 和VP3 基因的克隆与表达 | 第26-27
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· 融合蛋白多克隆抗体的制备 | 第27
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· 融合蛋白多克隆抗体的鉴定 | 第27-28
页 |
· 结果 | 第28-31
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· 目的基因克隆及鉴定结果 | 第28
页 |
· 蛋白的融合表达及鉴定 | 第28-29
页 |
· 兔抗VP1、VP2 和VP3 多克隆抗体的效价测定 | 第29
页 |
· 制备的多克隆抗体与真核表达的VP1、VP2 和VP3 蛋白反应原性检测 | 第29-30
页 |
· 制备的多克隆抗体Western blot 分析 | 第30-31
页 |
· 讨论 | 第31-33
页 |
· 大肠杆菌表达系统 | 第31
页 |
· 鸡贫血病毒VP1 蛋白的原核表达 | 第31-32
页 |
· 鸡贫血病毒非结构蛋白的原核表达 | 第32-33
页 |
第三章 鸡贫血病毒VP1、VP2 和VP3 蛋白之间的相互作用研究 | 第33-47
页 |
· 材料与方法 | 第33-39
页 |
· 病毒、菌株、质粒、抗体、细胞 | 第33
页 |
· 试剂与药品 | 第33-35
页 |
· 相关试剂配制方法 | 第35-36
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· 鸡贫血病毒VP1、VP2 和VP3 基因酵母双杂交载体的构建 | 第36
页 |
· 酵母双杂交重组诱饵质粒的转化及自激活性的检测 | 第36-37
页 |
· 酵母双杂交载体共转化Mav203 酵母感受态细胞 | 第37
页 |
· VP1、VP2 和VP3 真核表达及IFA、Western blot 分析 | 第37-38
页 |
· 免疫共沉淀试验(Co-IP) | 第38-39
页 |
· 激光共聚焦试验 | 第39
页 |
· 结果 | 第39-44
页 |
· 鸡贫血病毒VP1、VP2 和VP3 基因酵母双杂交载体的构建 | 第39-40
页 |
· 构建的诱饵载体自激活作用的鉴定 | 第40-41
页 |
· 酵母双杂交筛选结果 | 第41-42
页 |
· 免疫共沉淀试验结果 | 第42-43
页 |
· 激光共聚焦试验结果 | 第43-44
页 |
· 讨论 | 第44-47
页 |
· 鸡贫血病毒蛋白之间相互作用 | 第44-45
页 |
· 酵母双杂交系统 | 第45-46
页 |
· 互作蛋白的进一步验证 | 第46-47
页 |
第四章 鸡贫血病毒蛋白相互作用域的定位研究 | 第47-54
页 |
· 材料与方法 | 第47-48
页 |
· 毒株、细胞、质粒 | 第47
页 |
· 主要试剂 | 第47
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· VP1、VP2 和VP3 缺失片段酵母双杂交载体构建 | 第47
页 |
· 酵母双杂交载体共转化Mav203 感受态及阳性重组子筛选 | 第47-48
页 |
· 结果 | 第48-51
页 |
· 酵母双杂交载体构建 | 第48-50
页 |
· 截短片段酵母双杂交试验筛选结果 | 第50-51
页 |
· 讨论 | 第51-54
页 |
· VP1-VP2 蛋白相互作用域定位研究 | 第51-52
页 |
· VP2-VP3 蛋白相互作用域定位研究 | 第52-53
页 |
· 小结 | 第53-54
页 |
第五章 结论 | 第54-55
页 |
参考文献 | 第55-62
页 |
致谢 | 第62-63
页 |
作者简历 | 第63页 |