利用反向遗传操作技术构建IBDV候选疫苗株的研究
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利用反向遗传操作技术构建IBDV候选疫苗株的研究
论文目录
摘要
第1-8 页
Abstract
第8-17 页
第一章 绪论
第17-25 页
· IBDV 的结构和分子生物学
第17-19 页
· IBDV 的形态和血清型
第18 页
· IBDV 的基因组和编码蛋白
第18-19 页
· IBD 的流行特点
第19 页
· IBD 的防制
第19-21 页
· IBD 的防控措施
第19-20 页
· IBD 疫苗研究进展
第20-21 页
· 反向遗传技术在新型疫苗研究中的应用
第21-23 页
· 问题与展望
第23-24 页
· 本研究的目的和意义
第24-25 页
第二章 亲本毒株筛选及其全基因组的克隆与序列分析
第25-34 页
摘要
第25 页
· 材料与方法
第25-29 页
· 病毒、鸡胚及试验动物
第25-26 页
· 主要试剂
第26 页
· 引物设计与合成
第26 页
· 病料处理
第26 页
· 病毒复状
第26-27 页
· 毒价的测定
第27 页
· SPF 鸡致死率的测定
第27 页
· IBDV VP2 抗原性预测分析
第27 页
· IBDV 全基因组RNA 的提取
第27 页
· IBDV 全基因组 RNA 的反转录
第27-28 页
· IBDV 全基因组克隆
第28 页
· IBDV 全基因组遗传演化分析
第28-29 页
· 结果
第29-32 页
· ELD_(50)测定及致死率测定结果
第29 页
· VP2 序列及抗原性分析
第29 页
· 全基因组扩增及测序
第29-30 页
· 全基因组遗传演化分析
第30-32 页
· 讨论
第32-34 页
· 亲本毒株的筛选
第32-33 页
· HLJ0504 毒株是一株有代表性的自然重组病毒
第33-34 页
第三章 IBDV 新型疫苗株构建模式的筛选
第34-49 页
摘要
第34 页
· 材料和方法
第34-39 页
· 质粒、细胞和单克隆抗体
第34-35 页
· 主要试剂
第35-36 页
· 引物设计与合成
第36 页
· 核酶结构的引入
第36 页
· 双点突变及VP5 缺失突变
第36 页
· 全基因组克隆的构建
第36-37 页
· 病毒拯救
第37 页
· 拯救病毒IFA 检测
第37-38 页
· 拯救病毒电镜观察
第38 页
· 拯救病毒RT-PCR 鉴定
第38 页
· 拯救病毒体外复制动力学研究
第38 页
· 拯救病毒毒力试验
第38 页
· 试验鸡法氏囊RT-PCR 与序列测定
第38-39 页
· 试验鸡血清抗体的检测
第39 页
· 结果
第39-47 页
· 感染性分子克隆的构建
第39-40 页
· 拯救病毒细胞病变
第40 页
· 拯救病毒IFA 检测
第40-41 页
· 电镜观察
第41 页
· 拯救病毒的 RT-PCR 检测
第41 页
· 拯救病毒体外复制动力学研究
第41-42 页
· 试验鸡症状及剖检变化
第42-43 页
· 试验鸡的囊重比与囊指数
第43-44 页
· 试验鸡法氏囊的组织病理变化
第44 页
· 试验鸡法氏囊的 RT-PCR 与序列测定
第44-45 页
· 试验鸡血清抗体的检测
第45-47 页
· 讨论
第47-49 页
· HLJ0504 细胞嗜性的改变
第47 页
· VP5 是毒力因子
第47-48 页
· 候选疫苗株应具备的特性
第48-49 页
第四章 新型疫苗株的构建及其生物学性状测定
第49-62 页
摘要
第49 页
· 材料和方法
第49-54 页
· 病毒
第49 页
· 质粒
第49-50 页
· 细胞和单克隆抗体
第50 页
· 实验动物
第50 页
· 主要试剂
第50 页
· 引物设计与合成
第50 页
· HLJ0504 株 VP2 基因替换 Gt 株基因组 VP2
第50-52 页
· 感染性分子克隆的构建
第52 页
· 病毒拯救
第52 页
· 拯救病毒IFA 检测
第52 页
· 拯救病毒电镜观察
第52 页
· 拯救病毒 RT-PCR 鉴定
第52 页
· 拯救病毒在CEF 细胞上的复制特性
第52-53 页
· 动物实验
第53 页
· 攻毒保护试验
第53-54 页
· 拯救病毒遗传稳定性试验
第54 页
· 结果
第54-60 页
· VP2 修饰、替换与感染性分子克隆构建
第54-55 页
· 病毒拯救
第55 页
· 拯救病毒IFA 检测
第55 页
· 拯救病毒电镜观察
第55-56 页
· 拯救病毒RT-PCR 鉴定
第56 页
· 拯救病毒复制特性研究
第56-57 页
· 拯救病毒的致病性
第57-58 页
· 拯救病毒的免疫效果评价
第58-59 页
· 拯救病毒的遗传稳定性
第59-60 页
· 讨论
第60-62 页
· 重组病毒rGtHLJVP2 复制特性良好
第60 页
· 重组病毒rGtHLJVP2 对SPF 鸡无致病性
第60 页
· 重组病毒rGtHLJVP2 遗传稳定性良好
第60-61 页
· 重组病毒rGtHLJVP2 免疫原性良好
第61-62 页
第五章 新型疫苗株免疫效果的评价
第62-71 页
摘要
第62 页
· 材料和方法
第62-64 页
· 病毒
第62 页
· 主要试剂
第62 页
· 试验分组与免疫
第62-63 页
· 血清抗体检测
第63 页
· CD4+、CD8+淋巴细胞分离及检测
第63 页
· 疫苗株交叉保护性试验
第63 页
· 疫苗株致病力评估
第63 页
· 疫苗株在法氏囊中的载量检测
第63-64 页
· 试验鸡法氏囊RT-PCR与序列测定
第64 页
· 结果
第64-69 页
· 疫苗株免疫效果评价
第64-65 页
· 疫苗株免疫保护效果
第65-66 页
· 疫苗株的致病力比较
第66-68 页
· 试验鸡法氏囊病毒载量的检测
第68-69 页
· 讨论
第69-71 页
· 疫苗株体液免疫比较
第69 页
· 疫苗株 CD4+、CD8+T 淋巴细胞检测
第69-70 页
· 疫苗株免疫保护效果
第70 页
· 疫苗株的致病性研究
第70-71 页
第六章 结论
第71-72 页
参考文献
第72-79 页
致谢
第79-80 页
作者简历
第80页
本篇论文共
80
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