论文目录 | |
摘要 | 第1-7
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Abstract | 第7-13
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第一章 绪论 | 第13-19
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· 细粒棘球蚴病的研究进展 | 第13-17
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· 前言 | 第13
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· 细粒棘球蚴的病原学分析 | 第13-14
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· 细粒棘球蚴病的预防和控制 | 第14-15
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· EG95重组抗原的研究进展 | 第15-17
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· C3d分子免疫佐剂的研究 | 第17-18
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· 前言 | 第17
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· C3d的作用原理 | 第17
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· C3d的研究进展 | 第17-18
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· 研究的目的及意义 | 第18-19
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第二章 羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因在杆状病毒中的串联表达 | 第19-38
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· 前言 | 第19
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· 实验材料 | 第19-24
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· 菌株和载体 | 第19
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· 细胞及培养用试剂 | 第19-20
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· 分子生物学试剂 | 第20
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· 免疫学试剂 | 第20
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· 主要化学试剂 | 第20
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· 溶液及其配制方法 | 第20-24
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· 方法 | 第24-31
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· EG95-(C3d)_3原核表达质粒的构建 | 第24-27
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· 重组转移载体的构建及鉴定 | 第27-28
页 |
· 重组转移载体的转座及重组转座子的提取与鉴定 | 第28-30
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· 转染 | 第30
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· 重组杆状病毒的表达及鉴定 | 第30-31
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· 实验结果 | 第31-36
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· 原核表达质粒的构建 | 第31-32
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· 重组转移载体的构建及鉴定 | 第32-34
页 |
· 重组杆状病毒的表达及鉴定 | 第34-36
页 |
· 讨论 | 第36-38
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第三章 细粒棘球蚴EG95s基因的单克隆抗体制备及鉴定 | 第38-49
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· 前言 | 第38
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· 材料 | 第38-40
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· 菌株、细胞及实验动物 | 第38
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· 纯化重组蛋白的相关试剂 | 第38
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· 细胞培养用溶液及其配制 | 第38-39
页 |
· MAbs制备相关试剂及其配制 | 第39
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· 酶联免疫吸附实验(ELISA)使用试剂及其配制 | 第39-40
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· 主要仪器设备 | 第40
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· 方法 | 第40-44
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· 重组EG95蛋白的表达与纯化 | 第40-41
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· 动物免疫 | 第41
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· 间接ELISA筛选方法的建立 | 第41-42
页 |
· 杂交瘤细胞株的建立 | 第42-43
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· 单克隆抗体的大量制备 | 第43
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· 杂交瘤细胞的冻存及复苏 | 第43
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· 单克隆抗体的鉴定 | 第43-44
页 |
· 结果 | 第44-48
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· 重组Eg95s蛋白的表达与纯化 | 第44-45
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· 阴阳性临界值(即cutoff值)的确定 | 第45
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· 细胞融合与筛选 | 第45-46
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· 杂交瘤细胞培养上清液及腹水效价的测定 | 第46
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· MAbs的亚类鉴定 | 第46
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· Western-blot检测 | 第46-47
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· 相加指数法测定单抗识别表位 | 第47-48
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· 讨论 | 第48-49
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第四章 细粒棘球蚴基因的原核与真核表达产物的比较 | 第49-54
页 |
· 前言 | 第49
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· 实验材料 | 第49-50
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· 菌株及细胞 | 第49
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· 主要试剂 | 第49-50
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· 方法 | 第50
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· pET-EG95-(C3d)_3原核表达重组蛋白表达 | 第50
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· EG95 MAbs对pET-EG95-(C3d)_3进行Western-blot检测 | 第50
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· EG95 MAbs对杆状病毒表达的EG95-(C3d)_3重组蛋白进行免疫荧光检测 | 第50
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· 实验结果 | 第50-53
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· pET-EG95-(C3d)_3重组蛋白表达 | 第50-51
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· EG95单克隆抗体对pET-EG95-(C3d)_3重组蛋白Western-blot检测 | 第51-52
页 |
· EG95单克隆抗体对Bacmid-EG95-(C3d)_3重组蛋白间接免疫荧光检测 | 第52-53
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· 讨论 | 第53-54
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第五章 全文结论 | 第54-56
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· EG95-(C3d)_3基因在杆状病毒中的串联表达 | 第54
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· 细粒棘球蚴EG95s基因的单克隆抗体制备 | 第54
页 |
· 细粒棘球蚴基因的原核与真核表达产物的比较 | 第54-56
页 |
参考文献 | 第56-61
页 |
致谢 | 第61-62
页 |
作者简历 | 第62页 |