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牛乳酪蛋白ACE抑制肽的Caco-2细胞水平转运吸收机制研究

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牛乳酪蛋白ACE抑制肽的Caco-2细胞水平转运吸收机制研究
论文目录
 
摘要第4-6页
ABSTRACT第6-9页
中英文缩写对照第9-13页
1 绪论第13-24页
  1.1 牛乳酪蛋白的组成及性质第13-14页
  1.2 生物活性肽的研究进展第14-20页
    1.2.1 活性肽的概述及分类第14-17页
    1.2.2 乳源活性肽的研究进展第17-18页
    1.2.3 活性肽的的制备方法第18-19页
    1.2.4 活性肽的吸收机制概述第19-20页
  1.3 多肽肠道上皮吸收的研究进展第20-22页
    1.3.1 肠道上皮吸收屏障的概述第20页
    1.3.2 FITC荧光标记技术在肠道上皮吸收研究中的应用第20页
    1.3.3 基于Caco-2 单层细胞膜模型的活性肽的吸收机制研究第20-22页
  1.4 本课题主要研究内容及技术路线第22-24页
    1.4.1 主要内容第22-23页
    1.4.2 本研究技术路线第23-24页
2 牛乳酪蛋白体外模拟消化液的生物活性研究第24-39页
  2.1 实验材料与方法第24-26页
    2.1.1 实验材料与试剂第24-25页
    2.1.2 主要仪器与设备第25-26页
  2.2 实验方法第26-30页
    2.2.1 蛋白酶活力的测定第26-27页
    2.2.2 体外模拟消化牛乳酪蛋白第27-28页
    2.2.3 酪蛋白水解度(DH)的测定第28页
    2.2.4 水解液DPPH自由基清除率的测定第28页
    2.2.5 水解液ACE抑制活性的测定第28-29页
    2.2.6 水解物的RP- HPLC检测第29-30页
    2.2.7 水解液的LC-MS/MS检测第30页
  2.3 结果与讨论第30-38页
    2.3.1 酪蛋白水解度(DH)的变化第30-31页
    2.3.2 酪蛋白水解物的抗氧化活性分析第31-32页
    2.3.3 酪蛋白水解物的ACE抑制率分析第32-33页
    2.3.4 酪蛋白水解物RP-HPLC图谱分析第33-35页
    2.3.5 酪蛋白水解物的LC-MS/MS结果分析第35-38页
  2.4 本章小结第38-39页
3 FITC-牛乳酪蛋白的体内吸收研究第39-54页
  3.1 实验材料与试剂第39-41页
    3.1.1 实验材料与试剂第39-40页
    3.1.2 主要仪器与设备第40-41页
  3.2 实验方法第41-44页
    3.2.1 荧光标记牛乳酪蛋白及荧光标记率的检测第41页
    3.2.2 SDS-PAGE分析FITC-酪蛋白水解液第41-43页
    3.2.3 FITC-酪蛋白大鼠体内消化实验第43页
    3.2.4 FITC-酪蛋白水解液在肠非翻转模型中的通透性检测第43-44页
    3.2.5 在体消化物的RP-HPLC检测第44页
  3.3 结果与讨论第44-53页
    3.3.1 FITC-酪蛋白荧光标记率的结果第44-45页
    3.3.2 FITC-酪蛋白在人工胃液及人工肠液中的稳定性分析第45-49页
    3.3.3 FITC-酪蛋白在大鼠肠道吸收过程分析第49-51页
    3.3.4 不同肠段对FITC-酪蛋白水解液的通透性分析第51-53页
    3.3.5 大鼠消化物RP-HPLC图谱分析第53页
  3.4 本章小结第53-54页
4 基于Caco-2 单层细胞模型的ACE抑制肽吸收机制研究第54-76页
  4.1 材料试剂与仪器第54-57页
    4.1.1 实验材料与试剂第54-56页
    4.1.2 主要仪器设备第56-57页
  4.2 实验方法第57-60页
    4.2.1 Caco-2 单层细胞模型的构建及验证第57-59页
    4.2.2 ACE抑制肽细胞毒性试验第59页
    4.2.3 培养条件对RYLGY跨膜转运的影响第59-60页
    4.2.4 ACE抑制肽的吸收机制研究第60页
    4.2.5 ACE抑制肽的RP-HPLC检测第60页
    4.2.6 三种混合长肽的LC-MS/MS检测第60页
  4.3 结果与讨论第60-74页
    4.3.1 Caco-2 细胞模型验证结果第60-64页
    4.3.2 细胞毒性实验结果第64页
    4.3.3 培养条件对RYLGY跨膜转运量影响的实验结果第64-66页
    4.3.4 ACE抑制肽的吸收机制实验结果第66-73页
    4.3.5 三种混合长肽LC-MS/MS结果分析第73-74页
  4.4 本章小结第74-76页
5 结论与展望第76-77页
  5.1 结论第76页
  5.2 展望第76-77页
致谢第77-78页
参考文献第78-88页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第88-90页

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