论文目录 | |
| 独创性声明 | 第1-3
页 |
| 摘要 | 第3-4
页 |
| Abstract | 第4-9
页 |
| 论文图表索引 | 第9-11
页 |
| 缩略词表 | 第11-13
页 |
| 1 引言 | 第13-27
页 |
| 1．1 植物耐盐性研究 | 第14-17
页 |
| 1．1．1 盐分对植物的影响 | 第14
页 |
| 1．1．2 植物耐盐机理 | 第14-17
页 |
| 1．1．2．1 植物信号转导 | 第14-15
页 |
| 1．1．2．2 降低离子的吸收 | 第15
页 |
| 1．1．2．3 离子的外排及区隔化 | 第15-16
页 |
| 1．1．2．4 小分子渗透调节物质的积累 | 第16
页 |
| 1．1．2．5 脱落酸 | 第16
页 |
| 1．1．2．6 渗透蛋白 | 第16-17
页 |
| 1．2 质膜H~+-ATPase的研究进展 | 第17-18
页 |
| 1．2．1 分子结构 | 第17
页 |
| 1．2．2 在盐胁迫下的反应 | 第17-18
页 |
| 1．3 Na~+／H~+逆向转运蛋白的研究进展 | 第18-20
页 |
| 1．3．1 Na~+／H~+逆向转运蛋白的功能特征 | 第18-19
页 |
| 1．3．2 Na~+／H~+逆向转运蛋白基因的遗传转化研究 | 第19-20
页 |
| 1．4 14-3-3蛋白研究进展 | 第20-21
页 |
| 1．4．1 14-3-3蛋白的结构功能 | 第20
页 |
| 1．4．2 14-3-3蛋白研究现状 | 第20-21
页 |
| 1．5 植物基因工程研究进展 | 第21-25
页 |
| 1．5．1 植物基因工程的创立和发展 | 第21-22
页 |
| 1．5．2 植物遗传转化的现状 | 第22-25
页 |
| 1．5．2．1 根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第23-25
页 |
| 1．5．2．2 DNA直接转化法 | 第25
页 |
| 1．6 热点与展望 | 第25
页 |
| 1．7 本论文的研究目的及意义 | 第25-27
页 |
| 2 胡杨14-3-3蛋白基因片段的克隆 | 第27-36
页 |
| 2．1 材料与方法 | 第27-33
页 |
| 2．1．1 材料 | 第27
页 |
| 2．1．2 主要试剂及仪器 | 第27-28
页 |
| 2．1．2．1 试剂 | 第27
页 |
| 2．1．2．2 仪器 | 第27-28
页 |
| 2．1．3 方法 | 第28-33
页 |
| 2．1．3．1 胡杨叶片总DNA的提取(CTAB法) | 第28-29
页 |
| 2．1．3．2 14-3-3蛋白基因同源保守序列的查找 | 第29-30
页 |
| 2．1．3．3 引物设计 | 第30-31
页 |
| 2．1．3．4 PCR反应扩增胡杨14-3-3蛋白基因 | 第31
页 |
| 2．1．3．5 凝胶回收目的片段 | 第31-32
页 |
| 2．1．3．6 目的片段与T-vector连接 | 第32
页 |
| 2．1．3．7 重组质粒的鉴定 | 第32-33
页 |
| 2．2 结果 | 第33-35
页 |
| 2．2．1 胡杨总DNA提取与目的片段的获得 | 第33-34
页 |
| 2．2．2 菌落PCR检测 | 第34
页 |
| 2．2．3 基因序列检测 | 第34-35
页 |
| 2．3 讨论 | 第35-36
页 |
| 3 胡杨Na~+／H~+逆向转运蛋白基因(PeNHA)小球藻表达载体的构建 | 第36-43
页 |
| 3．1 材料与方法 | 第36-41
页 |
| 3．1．1 材料 | 第36-37
页 |
| 3．1．1．1 基因、菌种 | 第36
页 |
| 3．1．1．2 质粒载体 | 第36-37
页 |
| 3．1．2 试剂和仪器 | 第37
页 |
| 3．1．2．1 主要试剂 | 第37
页 |
| 3．1．2．2 主要仪器 | 第37
页 |
| 3．1．3 方法 | 第37-41
页 |
| 3．1．3．1 表达载体的构建 | 第37-41
页 |
| 3．1．3．2 重组质粒的鉴定 | 第41
页 |
| 3．2 结果 | 第41-42
页 |
| 3．2．1 质粒与目的片段(PeNHA)的获得 | 第41
页 |
| 3．2．2 菌落PCR检测 | 第41-42
页 |
| 3．3 讨论 | 第42-43
页 |
| 4 胡杨质膜H~+-ATPase基因的初步筛选 | 第43-53
页 |
| 4．1 材料与方法 | 第43-51
页 |
| 4．1．1 材料 | 第43
页 |
| 4．1．2 主要试剂和仪器 | 第43-44
页 |
| 4．1．2．1 主要试剂： | 第43
页 |
| 4．1．2．2 主要仪器 | 第43-44
页 |
| 4．1．3 方法 | 第44-51
页 |
| 4．1．2．1 噬菌体的体外包装 | 第44
页 |
| 4．1．2．2 文库质量检测 | 第44-46
页 |
| 4．1．2．3 文库扩增 | 第46
页 |
| 4．1．2．4 噬菌斑的原位杂交 | 第46-49
页 |
| 4．1．2．5 阳性噬菌班的挑取 | 第49
页 |
| 4．1．2．6 文库的二筛和三筛 | 第49
页 |
| 4．1．2．7 重组体的鉴定及分析 | 第49-50
页 |
| 4．1．2．8 pExCell的插入片断分析 | 第50-51
页 |
| 4．2 结果 | 第51-52
页 |
| 4．2．1 文库质量检测 | 第51
页 |
| 4．2．2 噬菌斑的原位杂交 | 第51
页 |
| 4．2．3 重组质粒的鉴定 | 第51-52
页 |
| 4．3 讨论 | 第52-53
页 |
| 5 胡杨Na~+／H~+逆向转运蛋白基因(PeNHA)转化群众杨 | 第53-73
页 |
| 5．1 材料与方法 | 第53-64
页 |
| 5．1．1 材料 | 第53-55
页 |
| 5．1．1．1 菌种及质粒 | 第53-54
页 |
| 5．1．1．2 主要试剂和仪器 | 第54-55
页 |
| 5．1．1．3 植物材料 | 第55
页 |
| 5．1．1．4 培养基及条件 | 第55
页 |
| 5．1．2 方法 | 第55-64
页 |
| 5．1．2．1 MS培养基贮液配制 | 第55-56
页 |
| 5．1．2．2 群众杨直接分化再生系统建立 | 第56-57
页 |
| 5．1．2．3 群众杨遗传转化试验 | 第57-60
页 |
| 5．1．2．4 转基因植物的分子鉴定 | 第60-64
页 |
| 5．2 试验结果与分析 | 第64-70
页 |
| 5．2．1 群众杨直接分化再生系统的建立 | 第64-66
页 |
| 5．2．1．1 最佳灭菌方式的选择 | 第64
页 |
| 5．2．1．2 最佳茎分化培养基 | 第64
页 |
| 5．2．1．3 最佳叶分化培养基 | 第64-65
页 |
| 5．2．1．4 最佳生根培养基筛选 | 第65
页 |
| 5．2．1．5 移栽 | 第65-66
页 |
| 5．2．2 群众杨遗传转化试验 | 第66-69
页 |
| 5．2．2．1 转化外植体的选择 | 第66
页 |
| 5．2．2．2 群众杨抗生素筛选最佳浓度的选择 | 第66-67
页 |
| 5．2．2．3 农杆菌浸染群众杨的最适时间选择 | 第67-68
页 |
| 5．2．2．4 转化叶片、叶柄及茎段的分化能力对比 | 第68
页 |
| 5．2．2．5 生长选择培养 | 第68
页 |
| 5．2．2．6 转化生根试验 | 第68-69
页 |
| 5．2．3 转基因群众杨的分子鉴定 | 第69-70
页 |
| 5．2．3．1 群众杨总DNA提取(CTAB法) | 第69
页 |
| 5．2．3．2 转基因群众杨的PCR检测 | 第69-70
页 |
| 5．2．3．3 PCR-Southern杂交 | 第70
页 |
| 5．3 讨论 | 第70-73
页 |
| 5．3．1 直接分化再生系统 | 第70-71
页 |
| 5．3．2 光源对组培苗生根的影响 | 第71
页 |
| 5．3．3 抗生素的无菌处理 | 第71
页 |
| 5．3．4 研究中发现的影响群众杨转化的因素 | 第71-73
页 |
| 5．3．4．1 季节性差异 | 第71
页 |
| 5．3．4．2 转化受体材料的发育程度 | 第71-72
页 |
| 5．3．4．3 乙酰丁香酮(AS)的使用 | 第72-73
页 |
| 6 结论 | 第73-76
页 |
| 6．1 胡杨14-3-3蛋白基因片段的克隆 | 第73
页 |
| 6．2 胡杨Na~+／H~+逆向转运蛋白基因(PeNHA)小球藻表达载体的构建 | 第73
页 |
| 6．3 胡杨质膜H~+-ATPase基因的筛选与克隆 | 第73
页 |
| 6．4 群众杨直接分化再生系统建立 | 第73-74
页 |
| 6．5 农杆菌介导的群众杨遗传转化及再生植株的检测 | 第74
页 |
| 6．6 本论文的创新点 | 第74-75
页 |
| 6．7 下一步研究工作设想与建议 | 第75-76
页 |
| 参考文献 | 第76-81
页 |
| 个人简介 | 第81-82
页 |
| 导师简介 | 第82-83
页 |
| 获得成果目录清单 | 第83-84
页 |
| 致谢 | 第84页 |
