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犬瘟热病毒的分离、鉴定及单克隆抗体的研制
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犬瘟热病毒的分离、鉴定及单克隆抗体的研制
论文目录
 
摘要第1-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第9-10页
综述第10-21页
　　1 病原特征第10-15页
　　　　· CDV的理化特性第10页
　　　　· CDV的分子生物学特点第10-15页
　　　　　　· 核蛋白基因和核蛋白(N)第11-12页
　　　　　　· 磷蛋白基因和磷蛋白(P)第12页
　　　　　　· 融合蛋白基因和融合蛋白(F)第12-13页
　　　　　　· 基质蛋白基因和基质蛋白(M)第13页
　　　　　　· 血凝蛋白基因和血凝素蛋白(H)第13-15页
　　　　　　· 大蛋白基因和大蛋白(L)第15页
　　2 流行病学第15-16页
　　3 临床症状第16页
　　4 犬瘟热病毒病的致病机理第16-17页
　　5 CDV的实验室诊断第17-20页
　　　　· 病毒的分离培养第17-18页
　　　　· 电镜检查第18页
　　　　· 包涵体检测第18页
　　　　· 免疫荧光抗体(FA)染色法第18-19页
　　　　· 酶联免疫吸附试验(ELISA)第19页
　　　　· RT-PCR检测第19-20页
　　6 本研究的目的与意义第20-21页
第一章 犬瘟热病毒的分离与鉴定第21-33页
　　1 材料第21-23页
　　　　· 病毒来源第21页
　　　　· 细胞第21页
　　　　· 主要溶液配制第21-22页
　　　　· 主要试剂第22页
　　　　· 主要仪器及耗材第22-23页
　　2 试验方法第23-27页
　　　　· 样品的处理及病毒分离培养第23页
　　　　· 病变样品的RT-PCR检测第23-25页
　　　　　　· 引物的设计和合成第23页
　　　　　　· RNA的提取第23-24页
　　　　　　· 反转录第24页
　　　　　　· PCR扩增第24-25页
　　　　　　· 琼脂糖凝胶电泳第25页
　　　　· 细小病毒的PCR检查第25-26页
　　　　　　· 引物的设计和合成第25页
　　　　　　· 病变细胞DNA的提取第25页
　　　　　　· PCR扩增第25-26页
　　　　　　· 琼脂糖凝胶电泳第26页
　　　　· 血凝试验第26页
　　　　　　· 红细胞悬液的制备第26页
　　　　　　· 血凝实验第26页
　　　　· 组织培养半数感染量(TCID_(50))测定第26页
　　　　· 病毒理化试验第26-27页
　　　　　　· 病毒囊膜试验第26-27页
　　　　　　· 病毒核酸型试验第27页
　　　　　　· 病毒酸碱敏感试验第27页
　　　　　　· 病毒温度敏感性试验第27页
　　3 实验结果第27-31页
　　　　· 分离病毒感染VERO细胞产生的细胞病变第27-28页
　　　　· CDV的RT-PCR检测第28页
　　　　· 细小病毒的PCR检测第28-29页
　　　　· 血凝试验第29页
　　　　· 病毒TCID_(50)第29-30页
　　　　· 病毒的理化试验第30-31页
　　　　　　· 病毒囊膜试验第30页
　　　　　　· 病毒核酸型试验第30-31页
　　　　　　· 病毒酸碱敏感试验第31页
　　　　　　· 温度敏感性试验第31页
　　4 讨论第31-33页
第二章 抗犬瘟热病毒单克隆抗体的制备第33-45页
　　1 材料第33-35页
　　　　· 细胞系和病毒株第33页
　　　　· 常用溶液配制第33-34页
　　　　· 动物第34页
　　　　· 主要试剂第34页
　　　　· 主要仪器及耗材第34-35页
　　2 方法第35-40页
　　　　· 抗原的制备第35页
　　　　· 动物免疫第35页
　　　　· 融合第35-36页
　　　　　　· 骨髓瘤细胞的准备第35页
　　　　　　· 脾淋巴细胞的准备第35-36页
　　　　　　· 饲养细胞的准备第36页
　　　　　　· 细胞融合第36页
　　　　· 最佳抗原包被浓度和抗体稀释度的确定第36-37页
　　　　· 检测板的准备第37页
　　　　· 杂交瘤细胞的检测及筛选第37页
　　　　· 阳性杂交瘤细胞的亚克隆第37-38页
　　　　· 腹水的制备第38页
　　　　· 单抗特性的鉴定第38-39页
　　　　　　· 单抗效价测定第38页
　　　　　　· 单抗特异性鉴定第38页
　　　　　　· 亚类鉴定第38-39页
　　　　　　· 杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性鉴定第39页
　　　　· 单抗的反应性第39-40页
　　　　　　· 间接ELISA试验第39页
　　　　　　· 间接免疫荧光试验第39页
　　　　　　· 微量细胞培养中和试验第39-40页
　　3 结果第40-43页
　　　　· 杂交瘤细胞株的建立第40页
　　　　· 单抗腹水效价测定第40页
　　　　· 单抗特异性鉴定第40页
　　　　· 亚类鉴定第40-41页
　　　　· 杂交瘤分泌抗体的稳定性第41页
　　　　· 单抗的反应性第41-42页
　　　　　　· 间接ELISA试验第41页
　　　　　　· 间接免疫荧光试验第41-42页
　　　　· 微量细胞培养中和试验第42-43页
　　4 讨论第43-45页
参考文献第45-53页
致谢第53 页

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