论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4
页 |
| Abstract | 第4-10
页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-16
页 |
| · 理化性质 | 第10-11
页 |
| · 氯胺酮药学作用机理和毒副作用 | 第11-12
页 |
| · 药学作用机理 | 第11
页 |
| · 对N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体的拮抗用 | 第11
页 |
| · 与其他受体相互作用 | 第11
页 |
| · 毒副作用 | 第11-12
页 |
| · 氯胺酮检测研究进展 | 第12-15
页 |
| · 氯胺酮体内代谢 | 第12
页 |
| · 尿液中氯胺酮检测研究 | 第12-14
页 |
| · 血液中氯胺酮检测研究 | 第14
页 |
| · 毛发中氯胺酮检测研究 | 第14-15
页 |
| · 研究目的与意义 | 第15
页 |
| · 展望 | 第15-16
页 |
| 第2章 噬菌体展示肽库淘选氯胺酮模拟表位的研究 | 第16-31
页 |
| · 材料 | 第17-19
页 |
| · 实验材料 | 第17
页 |
| · 仪器和设备 | 第17
页 |
| · 主要试剂和培养基的配制 | 第17-19
页 |
| · 淘选部分 | 第17-18
页 |
| · ELISA部分 | 第18-19
页 |
| · 实验方法 | 第19-23
页 |
| · E.coli ER2738菌株的保藏 | 第19-20
页 |
| · E.coli ER2738菌株生长曲线的绘制 | 第20
页 |
| · 抗氯胺酮单克隆抗体的纯化 | 第20
页 |
| · SDS-PAGE鉴定氯胺酮单克隆抗体 | 第20
页 |
| · 噬菌体展示肽库第一轮淘选方法 | 第20-21
页 |
| · 噬菌体扩增与纯化 | 第21
页 |
| · 噬菌体滴度测定 | 第21
页 |
| · 第二到四轮淘选方法 | 第21
页 |
| · 噬菌体单菌落的扩增 | 第21-22
页 |
| · 氯胺酮模拟表位的鉴定 | 第22
页 |
| · 间接非竞争ELISA方法检测噬菌体克隆 | 第22
页 |
| · 间接竞争ELISA方法鉴定氯胺酮模拟表位 | 第22
页 |
| · 噬菌体基因组DNA纯化与测序 | 第22-23
页 |
| · 琼脂糖凝胶电泳鉴定噬菌体基因组DNA | 第23
页 |
| · 结果 | 第23-29
页 |
| · 抗氯胺酮单克隆抗体SDS-PAGE电泳结果 | 第23-24
页 |
| · E.coli ER2738生长曲线 | 第24
页 |
| · 淘选回收率计算 | 第24
页 |
| · 氯胺酮模拟抗原表位噬菌体筛选结果 | 第24-26
页 |
| · 模拟表位噬菌体基因组DNA、随机插入序列测序结果分析 | 第26-29
页 |
| · 基因组DNA琼脂糖凝胶电泳结果 | 第26
页 |
| · 模拟表位噬菌体插入DNA测序结果分析 | 第26
页 |
| · 模拟表位的计算机分析结果 | 第26-29
页 |
| · 讨论 | 第29-30
页 |
| · 洗脱时间对淘选的影响 | 第29
页 |
| · 减少非目的噬菌体出现机率的方法 | 第29-30
页 |
| · 小结 | 第30-31
页 |
| 第3章 氯胺酮间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第31-41
页 |
| · 材料 | 第31-32
页 |
| · 实验材料 | 第31
页 |
| · 仪器和设备 | 第31
页 |
| · 主要试剂配制 | 第31-32
页 |
| · 实验方法 | 第32-34
页 |
| · 间接非竞争ELISA实验方法的建立 | 第32
页 |
| · 酶标板均一性检测 | 第32
页 |
| · 间接竞争ELISA实验方法的建立 | 第32-33
页 |
| · 间接竞争ELISA最佳条件的优化 | 第33
页 |
| · 包被条件的优化 | 第33
页 |
| · 封闭液的优化 | 第33
页 |
| · HRP标记抗IgG抗体反应时间的优化 | 第33
页 |
| · 棋盘滴定法确定最佳抗原包被浓度和最佳抗体稀释倍数 | 第33
页 |
| · 间接竞争ELISA检测氯胺酮标准曲线的制作 | 第33-34
页 |
| · 交叉反应实验 | 第34
页 |
| · 精密度 | 第34
页 |
| · 灵敏度与最低检出限 | 第34
页 |
| · 结果与分析 | 第34-39
页 |
| · 酶标板均一性的检测 | 第34-35
页 |
| · 间接竞争ELISA方法最佳条件的优化 | 第35-37
页 |
| · 最佳包被条件的确定 | 第35
页 |
| · 最佳封闭液的确定 | 第35
页 |
| · HRP标记抗IgG抗体最佳反应时间的确定 | 第35
页 |
| · 抗原最佳包被浓度与抗体最佳稀释倍数确定 | 第35
页 |
| · 最佳实验条件确定 | 第35-37
页 |
| · 标准曲线的制作 | 第37
页 |
| · 交叉反应实验 | 第37-38
页 |
| · 精密度 | 第38-39
页 |
| · 灵敏度和最低检出限 | 第39
页 |
| · 讨论 | 第39-40
页 |
| · 小结 | 第40-41
页 |
| 第4章 噬菌体模拟表位间接竞争ELISA方法的建立 | 第41-55
页 |
| · 材料 | 第41-42
页 |
| · 实验材料 | 第41
页 |
| · 仪器和设备 | 第41
页 |
| · 主要试剂配制 | 第41-42
页 |
| · 方法 | 第42-44
页 |
| · 间接非竞争ELISA实验方法的建立 | 第42
页 |
| · 间接竞争ELISA实验方法的建立 | 第42
页 |
| · 间接竞争ELISA最佳条件的优化 | 第42-43
页 |
| · 包被条件的优化 | 第43
页 |
| · 封闭液的优化 | 第43
页 |
| · HRP标记抗M13单克隆抗体反应时间的优化 | 第43
页 |
| · 棋盘滴定法确定最佳抗原包被浓度和最佳抗体稀释倍数 | 第43
页 |
| · 间接竞争ELISA检测氯胺酮标准曲线的制作 | 第43
页 |
| · 灵敏度与最低检出限 | 第43-44
页 |
| · 精密度 | 第44
页 |
| · 结果与分析 | 第44-53
页 |
| · 间接竞争ELISA方法最佳条件的确定 | 第44-48
页 |
| · 最佳包被条件的确定 | 第44
页 |
| · 最佳封闭液的确定 | 第44
页 |
| · HRP标记抗M13单克隆抗体最佳反应时间的确定 | 第44-46
页 |
| · 抗氯胺酮单克隆抗体最佳包被浓度与噬菌体最佳稀释倍数确定 | 第46-47
页 |
| · 最佳实验条件确定 | 第47-48
页 |
| · 标准曲线的制作 | 第48-52
页 |
| · 灵敏度和最低检出限 | 第52
页 |
| · 精密度 | 第52-53
页 |
| · 讨论 | 第53-54
页 |
| · 噬菌体保存实验探讨 | 第53
页 |
| · 模拟表位分析 | 第53-54
页 |
| · 小结 | 第54-55
页 |
| 第5章 结论 | 第55-56
页 |
| 致谢 | 第56-57
页 |
| 参考文献 | 第57-60
页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第60
页 |
