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禽源肠炎沙门氏菌PmrB基因突变介导粘菌素耐药机制研究

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禽源肠炎沙门氏菌PmrB基因突变介导粘菌素耐药机制研究
论文目录
 
摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
英文缩略词或符号表第6-9页
1 前言第9-18页
  · 粘菌素概述第9页
  · 粘菌素结构介绍第9-10页
  · 粘菌素的作用机理第10-11页
  · 沙门氏菌PmrA/PmrB二元调控系统概述第11-12页
  · PmrA/PmrB二元调控系统与粘菌素耐药第12-14页
  · λRed重组第14-17页
  · 本研究目的意义第17-18页
2 材料与方法第18-36页
  · 引言第18页
  · 材料第18-21页
    · 菌株与质粒第18页
    · 主要试剂第18-19页
    · 主要培养基及试剂的配制第19-20页
    · 主要仪器第20-21页
    · 引物设计与合成第21页
  · 方法第21-36页
    · 测定诱导耐药保存菌株的MIC值并继续诱导耐药第21-22页
    · 对 2-12和 2-12(512)沙门氏菌进行全基因组测序第22-23页
    · 重组片段的构建第23-29页
    · pKD46-rha-IS质粒的构建第29-30页
    · 重组菌株的构建第30-32页
    · PmrB突变菌株粘菌素MIC测定第32页
    · PmrB突变菌株对12种常见抗菌药的敏感性测定第32-33页
    · PmrA、PmrB基因及关联基因的表达情况第33-36页
3 结果第36-49页
  · 保存菌株的MIC值第36页
  · 全基因组测序初步分析第36-37页
  · PCR扩增重组片段第37-39页
    · cat及sacB基因扩增第37-38页
    · cat和sacB融合PCR结果第38-39页
  · pKD46-rha-IS质粒的构建第39-40页
    · 片段rha-IS的PCR扩增第39页
    · pKD46质粒用NcoI单酶切第39页
    · rha-IS片段和线性化pKD46做无缝克隆第39-40页
  · 重组菌株的构建第40-44页
    · 质粒pKD46-rha-IS电转入 2-12鉴定第40-41页
    · 第一次重组菌株鉴定第41-42页
    · 第二次重组菌鉴定第42-44页
    · 重组菌株丢失pKD46-rha-IS质粒第44页
  · 粘菌素最小抑菌浓度测定第44-45页
  · PmrB突变菌株对12种常见抗菌药的敏感性第45页
  · PmrB及其关联基因表达量情况第45-49页
4 讨论第49-52页
  · 突变位点的确认第49页
  · 突变菌株的构建第49-50页
  · 突变菌株对抗生素敏感性变化第50页
  · 基因表达量变化第50-52页
全文总结第52-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-57页

本篇论文共57页,点击这进入下载页面
 
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