禽源肠炎沙门氏菌PmrB基因突变介导粘菌素耐药机制研究
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禽源肠炎沙门氏菌PmrB基因突变介导粘菌素耐药机制研究
论文目录
摘要
第1-4页
ABSTRACT
第4-6页
英文缩略词或符号表
第6-9页
1 前言
第9-18页
· 粘菌素概述
第9页
· 粘菌素结构介绍
第9-10页
· 粘菌素的作用机理
第10-11页
· 沙门氏菌PmrA/PmrB二元调控系统概述
第11-12页
· PmrA/PmrB二元调控系统与粘菌素耐药
第12-14页
· λRed重组
第14-17页
· 本研究目的意义
第17-18页
2 材料与方法
第18-36页
· 引言
第18页
· 材料
第18-21页
· 菌株与质粒
第18页
· 主要试剂
第18-19页
· 主要培养基及试剂的配制
第19-20页
· 主要仪器
第20-21页
· 引物设计与合成
第21页
· 方法
第21-36页
· 测定诱导耐药保存菌株的MIC值并继续诱导耐药
第21-22页
· 对 2-12和 2-12(512)沙门氏菌进行全基因组测序
第22-23页
· 重组片段的构建
第23-29页
· pKD46-rha-IS质粒的构建
第29-30页
· 重组菌株的构建
第30-32页
· PmrB突变菌株粘菌素MIC测定
第32页
· PmrB突变菌株对12种常见抗菌药的敏感性测定
第32-33页
· PmrA、PmrB基因及关联基因的表达情况
第33-36页
3 结果
第36-49页
· 保存菌株的MIC值
第36页
· 全基因组测序初步分析
第36-37页
· PCR扩增重组片段
第37-39页
· cat及sacB基因扩增
第37-38页
· cat和sacB融合PCR结果
第38-39页
· pKD46-rha-IS质粒的构建
第39-40页
· 片段rha-IS的PCR扩增
第39页
· pKD46质粒用NcoI单酶切
第39页
· rha-IS片段和线性化pKD46做无缝克隆
第39-40页
· 重组菌株的构建
第40-44页
· 质粒pKD46-rha-IS电转入 2-12鉴定
第40-41页
· 第一次重组菌株鉴定
第41-42页
· 第二次重组菌鉴定
第42-44页
· 重组菌株丢失pKD46-rha-IS质粒
第44页
· 粘菌素最小抑菌浓度测定
第44-45页
· PmrB突变菌株对12种常见抗菌药的敏感性
第45页
· PmrB及其关联基因表达量情况
第45-49页
4 讨论
第49-52页
· 突变位点的确认
第49页
· 突变菌株的构建
第49-50页
· 突变菌株对抗生素敏感性变化
第50页
· 基因表达量变化
第50-52页
全文总结
第52-53页
致谢
第53-54页
参考文献
第54-57页
本篇论文共
57
页,
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。
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