颠茄精氨酸脱羧酶基因的克隆与功能分析
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颠茄精氨酸脱羧酶基因的克隆与功能分析
论文目录
摘要
第1-8页
Abstract
第8-10页
第一章 文献综述
第10-16页
· 颠茄概况
第10-11页
· 托品烷类生物碱的概况
第11页
· 托品烷类生物碱的生物合成途径
第11-12页
· 托品烷类生物碱生物合成途径上的基因和酶
第12-13页
· 环境因子对多胺和TAs生物合成的影响
第13-14页
· 精氨酸脱羧酶基因的相关研究
第14页
· 植物转基因技术
第14-15页
· 毛状根体系在药用植物次生代谢生产中的应用
第15-16页
第二章 绪论
第16-18页
· 研究的目的和意义
第16页
· 研究范围和内容
第16-17页
· 技术路线
第17-18页
第三章 材料与方法
第18-36页
· 实验材料及试剂耗材
第18-19页
· 植物材料
第18页
· 菌株和质粒
第18页
· 仪器和设备
第18页
· 试剂盒及试剂购买
第18-19页
· 常规试剂和培养基的配制
第19页
· 常规方法介绍
第19-23页
· 颠茄总RNA的提取与检测
第19-20页
· DNA产物的琼脂糖凝胶电泳
第20页
· 目的条带的回收
第20页
· 连接反应
第20-21页
· 大肠杆菌DH5α 感受态细胞的制备(Ca Cl2法)
第21页
· 连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞
第21-22页
· 重组质粒转化发根农杆菌C58C1感受态细胞
第22页
· 重组子的鉴定、测序
第22页
· 质粒的提取
第22页
· TPS法抽提颠茄基因组DNA
第22-23页
· Ab ADC基因的克隆与分析
第23-27页
· 颠茄总RNA的提取与检测
第23页
· 从颠茄总RNA合成第一链c DNA
第23页
· Ab ADC基因的克隆
第23-25页
· Ab ADC基因 5'RACE的获得
第25-27页
· Ab ADC基因全长c DNA的克隆
第27页
· Ab ADC基因的生物信息学分析
第27-28页
· 颠茄植物RNAi沉默载体的构建及工程菌的获得
第28-31页
· 颠茄发根培养体系的建立
第31-33页
· 工程菌的的活化
第31页
· 工程菌菌株转化颠茄外植体
第31页
· 转基因颠茄发根的PCR鉴定
第31-33页
· 转基因颠茄发根的扩大培养
第33页
· 根癌农杆菌C58C1诱导颠茄发根的建立
第33页
· 基因表达量分析
第33-34页
· Ab ADC基因的组织表达谱分析
第33-34页
· Ab ADC基因的诱导谱分析
第34页
· 转基因发根中Ab ADC基因的表达量分析
第34页
· 颠茄发根中生物碱含量的检测
第34-36页
第四章 结果与分析
第36-54页
· 颠茄Ab ADC基因的克隆
第36-37页
· Ab ADC基因的生物信息学分析
第37-43页
· Ab ADC基因的序列分析
第37-39页
· Ab ADC编码蛋白二级结构预测
第39-40页
· Ab ADC氨基酸序列与保守结构域分析
第40-42页
· Ab ADC编码蛋白信号肽和亚细胞定位预测分析
第42页
· Ab ADC分子进化树的构建
第42-43页
· Ab ADC基因的组织表达谱分析
第43-44页
· 不同处理对颠茄发根的影响
第44-47页
· 颠茄发根的获得
第44-45页
· 颠茄发根的胁迫处理
第45-47页
· 干扰载体PBIN19- Ab ADC1和PBIN19- Ab ADC2的构建及工程菌的获得
第47-48页
· 干扰载体PBIN19- Ab ADC1和PBIN19- Ab ADC2的构建
第47-48页
· 工程菌的获得
第48页
· 转基因颠茄发根的获得及分析
第48-52页
· 转基因发根的荧光定量PCR检测
第51页
· 转基因颠茄发根中生物碱含量的测定
第51-52页
· 结论与展望
第52-54页
· 结论
第52-53页
· 展望
第53-54页
参考文献
第54-59页
附录 缩略词表
第59-60页
硕士期间发表论文
第60页
参加课题
第60-61页
致谢
第61页
本篇论文共
61
页,
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