论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第15-27页 |
| 1.1 抗菌肽概述 | 第15-22页 |
| 1.1.1 抗菌肽简介 | 第15页 |
| 1.1.2 抗菌肽的分类 | 第15-18页 |
| 1.1.2.1 昆虫抗菌肽 | 第16页 |
| 1.1.2.2 鱼类抗菌肽 | 第16页 |
| 1.1.2.3 哺乳动物抗菌肽 | 第16-17页 |
| 1.1.2.4 两栖类动物抗菌肽 | 第17页 |
| 1.1.2.5 其他来源动物抗菌肽 | 第17页 |
| 1.1.2.6 植物源抗菌肽 | 第17-18页 |
| 1.1.2.7 微生物源抗菌肽 | 第18页 |
| 1.1.3 抗菌肽的制备方法 | 第18-20页 |
| 1.1.3.1 自然提取法 | 第18-19页 |
| 1.1.3.2 化学合成法 | 第19页 |
| 1.1.3.3 基因工程法 | 第19页 |
| 1.1.3.4 酶解法 | 第19-20页 |
| 1.1.4 抗菌肽的生物活性 | 第20-21页 |
| 1.1.4.1 广谱抗细菌活性 | 第20页 |
| 1.1.4.2 抗真菌活性 | 第20页 |
| 1.1.4.3 抗病毒活性 | 第20-21页 |
| 1.1.4.4 抗原虫活性 | 第21页 |
| 1.1.4.5 抗肿瘤活性 | 第21页 |
| 1.1.5 抗菌肽的作用机理 | 第21-22页 |
| 1.1.5.1 对细胞膜损伤 | 第21-22页 |
| 1.1.5.2 细胞内损伤 | 第22页 |
| 1.2 抗菌肽的应用前景及存在的问题 | 第22-25页 |
| 1.2.1 抗菌肽的应用前景 | 第23-24页 |
| 1.2.1.1 在动植物转基因工程的应用 | 第23页 |
| 1.2.1.2 在食品工业的应用 | 第23页 |
| 1.2.1.3 在临床医疗的应用 | 第23-24页 |
| 1.2.1.4 在畜牧养殖业的应用 | 第24页 |
| 1.2.2 抗菌肽应用存在的问题 | 第24-25页 |
| 1.3 鱼鳞研究利用现状 | 第25页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 1.5 本研究的主要内容 | 第26-27页 |
| 第2章 鲫鱼鱼鳞抗菌肽粗酶解液的制备工艺研究 | 第27-52页 |
| 2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第27-29页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-37页 |
| 2.2.1 鱼鳞中主要成分测定 | 第29-30页 |
| 2.2.1.1 水分含量测定 | 第29-30页 |
| 2.2.1.2 灰分含量测定 | 第30页 |
| 2.2.1.3 蛋白质含量测定 | 第30页 |
| 2.2.1.4 粗脂肪含量测定 | 第30页 |
| 2.2.2 鱼鳞粗酶解液制备工艺方法 | 第30-31页 |
| 2.2.2.1 制备工艺流程 | 第30页 |
| 2.2.2.2 鱼鳞预处理 | 第30页 |
| 2.2.2.3 酸提鱼鳞胶原蛋白 | 第30-31页 |
| 2.2.2.4 酶解和灭酶 | 第31页 |
| 2.2.2.5 离心 | 第31页 |
| 2.2.2.6 旋蒸浓缩 | 第31页 |
| 2.2.3 抑菌活性测定 | 第31-32页 |
| 2.2.3.1 菌悬液的制备 | 第31页 |
| 2.2.3.2 抑菌圈测定 | 第31-32页 |
| 2.2.4 蛋白酶的筛选 | 第32-33页 |
| 2.2.5鱼鳞粗酶解液制备单因素实验 | 第33-34页 |
| 2.2.5.1 鱼鳞胶原蛋白提取酸浓度 | 第33页 |
| 2.2.5.2 鱼鳞胶原蛋白酸提液料比 | 第33页 |
| 2.2.5.3 鱼鳞胶原蛋白提取温度 | 第33页 |
| 2.2.5.4 鱼鳞胶原蛋白提取时间 | 第33-34页 |
| 2.2.5.5 蛋白酶添加量 | 第34页 |
| 2.2.5.6 酶解时间 | 第34页 |
| 2.2.6 响应面法优化鱼鳞粗酶解液制备工艺 | 第34-35页 |
| 2.2.7 胶原蛋白提取率的测定 | 第35-37页 |
| 2.2.7.1 试剂配制 | 第35页 |
| 2.2.7.2 羟脯氨酸标准曲线的建立 | 第35页 |
| 2.2.7.3 鱼鳞中羟脯氨酸含量测定 | 第35-36页 |
| 2.2.7.4 鱼鳞粗酶解液中羟脯氨酸含量测定 | 第36页 |
| 2.2.7.5 胶原蛋白提取率的计算 | 第36-37页 |
| 2.2.8 数据处理 | 第37页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第37-51页 |
| 2.3.1 鱼鳞中主要成分测定结果 | 第37页 |
| 2.3.2 蛋白酶筛选结果 | 第37-38页 |
| 2.3.3 鱼鳞粗酶解液制备单因素实验结果 | 第38-43页 |
| 2.3.3.1 提取酸浓度对粗酶解液抑菌性的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.3.2 酸提液料比对粗酶解液抑菌性的影响 | 第39页 |
| 2.3.3.3 提取温度对粗酶解液抑菌性的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.3.4 提取时间对粗酶解液抑菌性的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.3.5 蛋白酶添加量对粗酶解液抑菌性的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.3.6 酶解时间对粗酶解液抑菌性的影响 | 第42-43页 |
| 2.3.4 响应面优化鱼鳞粗酶解液制备工艺结果及分析 | 第43-49页 |
| 2.3.4.1 响应面优化试验设计及结果 | 第43-45页 |
| 2.3.4.2 回归模型建立与方差分析 | 第45-46页 |
| 2.3.4.3 各因素间交互作用响应面分析 | 第46-49页 |
| 2.3.4.4 鱼鳞粗酶解液最佳制备工艺条件的确定与验证 | 第49页 |
| 2.3.5 胶原蛋白提取率测定结果 | 第49-51页 |
| 2.3.5.1 羟脯氨酸标准曲线建立 | 第49-50页 |
| 2.3.5.2 鱼鳞胶原蛋白提取率 | 第50-51页 |
| 2.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第3章 鲫鱼鱼鳞抗菌肽的分离纯化及其性能分析 | 第52-73页 |
| 3.1 实验材料、试剂与仪器 | 第52-55页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第53-54页 |
| 3.1.3 实验仪器设备 | 第54-55页 |
| 3.2 实验方法 | 第55-64页 |
| 3.2.1 鱼鳞抗菌肽粗酶解液的制备 | 第55页 |
| 3.2.2 透析除盐 | 第55页 |
| 3.2.3 Sephadex G-15 凝胶过滤层析 | 第55-56页 |
| 3.2.3.1 Sephadex G-15 装柱、平衡 | 第55-56页 |
| 3.2.3.2 上样、洗脱和收集 | 第56页 |
| 3.2.3.3 Sephadex G-15 的清洗和再生 | 第56页 |
| 3.2.4 Sephadex G-50 凝胶过滤层析 | 第56-57页 |
| 3.2.4.1 Sephadex G-50 装柱、平衡 | 第56页 |
| 3.2.4.2 上样、洗脱和收集 | 第56-57页 |
| 3.2.4.3 Sephadex G-50 的清洗和再生 | 第57页 |
| 3.2.5 纤维素DEAE-52 离子交换层析 | 第57-59页 |
| 3.2.5.1 装柱、平衡 | 第57-58页 |
| 3.2.5.2 上样、洗脱和收集 | 第58页 |
| 3.2.5.3 纤维素DEAE-52 的清洗和再生 | 第58-59页 |
| 3.2.6 SDS-PAGE电泳分子质量测定 | 第59-61页 |
| 3.2.6.1 电泳试剂配制 | 第59-60页 |
| 3.2.6.2 分离胶与浓缩胶的配制 | 第60页 |
| 3.2.6.3 样品蛋白与Marker处理 | 第60-61页 |
| 3.2.6.4 SDS-PAGE电泳 | 第61页 |
| 3.2.6.5 脱色、染色与拍照 | 第61页 |
| 3.2.7 鱼鳞抗菌肽广谱抑菌活性测试 | 第61页 |
| 3.2.8 鱼鳞抗菌肽的MIC和 MBC测定 | 第61-62页 |
| 3.2.9 鱼鳞抗菌肽的抗氧化性能测试 | 第62-64页 |
| 3.2.9.1 羟自由基(·OH)清除能力的测定 | 第62-63页 |
| 3.2.9.2 DPPH自由基(DPPH·)清除能力测定 | 第63页 |
| 3.2.9.3 超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除能力测定 | 第61-64页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第64-71页 |
| 3.3.1 Sephadex G-15 凝胶过滤层析结果分析 | 第64-65页 |
| 3.3.2 Sephadex G-50 凝胶过滤层析结果分析 | 第65页 |
| 3.3.3 DEAE-52 阴离子交换层析结果分析 | 第65-66页 |
| 3.3.4 SDS-PAGE电泳结果 | 第66-67页 |
| 3.3.5 鱼鳞抗菌肽广谱抑菌活性结果 | 第67-68页 |
| 3.3.6 鱼鳞抗菌肽MIC和 MBC测定结果 | 第68-69页 |
| 3.3.7 鱼鳞抗菌肽抗氧化性测试结果 | 第69-71页 |
| 3.3.7.1 羟自由基(·OH)清除能力测定结果 | 第69-70页 |
| 3.3.7.2 DPPH自由基(DPPH·)清除能力测定结果 | 第70-71页 |
| 3.3.7.3 超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力测定结果 | 第71页 |
| 3.4 本章小结 | 第71-73页 |
| 第4章 鲫鱼鱼鳞抗菌肽在果蔬及其制品方面的应用研究 | 第73-91页 |
| 4.1 实验材料、试剂与仪器 | 第73-75页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第73页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第73-74页 |
| 4.1.3 实验仪器设备 | 第74-75页 |
| 4.2 实验方法 | 第75-81页 |
| 4.2.1 鱼鳞抗菌肽对新鲜果蔬防腐保鲜效果测试 | 第75-79页 |
| 4.2.1.1 鱼鳞抗菌肽对新鲜水果防腐保鲜试验 | 第75-76页 |
| 4.2.1.2 果实外观感官评价 | 第76页 |
| 4.2.1.3 果实失重率测定 | 第76页 |
| 4.2.1.4 果实呼吸强度测定 | 第76-77页 |
| 4.2.1.5 果实丙二醛(MDA)含量测定 | 第77-78页 |
| 4.2.1.6 多酚氧化酶(PPO)活性测定 | 第78页 |
| 4.2.1.7 过氧化物酶(POD)活性测定 | 第78-79页 |
| 4.2.2 鱼鳞抗菌肽对鲜榨果蔬汁防腐保鲜效果测试 | 第79-81页 |
| 4.2.2.1 鱼鳞抗菌肽对鲜榨蔬菜汁抑菌保鲜试验 | 第79-80页 |
| 4.2.2.2 鲜榨黄瓜汁的色泽变化测定 | 第80页 |
| 4.2.2.3 鲜榨黄瓜汁稳定系数的测定 | 第80-81页 |
| 4.2.2.4 鲜榨黄瓜汁的pH变化测定 | 第81页 |
| 4.2.2.5 鲜榨黄瓜汁中菌落总数测定 | 第81页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第81-89页 |
| 4.3.1 鱼鳞抗菌肽对李子防腐保鲜试验 | 第81-86页 |
| 4.3.1.1 果实外观感官评价 | 第81-82页 |
| 4.3.1.2 果实失重率测定结果 | 第82-83页 |
| 4.3.1.3 果实呼吸强度测定结果 | 第83-84页 |
| 4.3.1.4 果实丙二醛(MDA)含量测定结果 | 第84页 |
| 4.3.1.5 多酚氧化酶(PPO)活性测定结果 | 第84-85页 |
| 4.3.1.6 过氧化物酶(POD)活性测定结果 | 第85-86页 |
| 4.3.2 鱼鳞抗菌肽对鲜榨黄瓜汁抑菌保鲜试验 | 第86-89页 |
| 4.3.2.1 鲜榨黄瓜汁的色泽变化测定结果 | 第86-87页 |
| 4.3.2.2 鲜榨黄瓜汁稳定系数的测定结果 | 第87-88页 |
| 4.3.2.3 鲜榨黄瓜汁的pH变化测定结果 | 第88-89页 |
| 4.3.2.4 鲜榨黄瓜汁中菌落总数测定结果 | 第89页 |
| 4.4 本章小结 | 第89-91页 |
| 第5章 论文总结、创新点与展望 | 第91-94页 |
| 5.1 论文总结 | 第91-92页 |
| 5.2 创新点 | 第92-93页 |
| 5.3 展望 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-105页 |
| 硕士研究生期间发表的论文 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
