论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略语 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 食物过敏 | 第11-13页 |
| 1.1.1 食物过敏及其危害 | 第11-12页 |
| 1.1.2 食物过敏原的分类 | 第12页 |
| 1.1.3 食物过敏的免疫学机制 | 第12页 |
| 1.1.4 食物过敏的治疗 | 第12-13页 |
| 1.2 鸡蛋过敏 | 第13页 |
| 1.3 鸡蛋清中主要过敏原 | 第13-16页 |
| 1.3.1 卵类黏蛋白 | 第14页 |
| 1.3.2 卵白蛋白 | 第14-15页 |
| 1.3.3 卵转铁蛋白 | 第15-16页 |
| 1.3.4 溶菌酶 | 第16页 |
| 1.4 鸡蛋清中主要过敏原分离纯化 | 第16-20页 |
| 1.4.1 沉淀法 | 第17页 |
| 1.4.2 膜分离法 | 第17页 |
| 1.4.3 色谱分离法 | 第17-20页 |
| 1.5 研究目的、意义与研究内容 | 第20-22页 |
| 1.5.1 研究目的、意义 | 第20-21页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 实验室分离纯化卵转铁蛋白和溶菌酶的研究 | 第22-42页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 材料与设备 | 第22-24页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.2 主要仪器与设备 | 第23页 |
| 2.2.3 溶液配制 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-29页 |
| 2.3.1 蛋清分离 | 第24页 |
| 2.3.2 蛋清预处理 | 第24-25页 |
| 2.3.3 阳离子交换层析分离卵转铁蛋白和溶菌酶 | 第25页 |
| 2.3.4 羟基磷灰石层析纯化卵转铁蛋白 | 第25-26页 |
| 2.3.5 凝胶层析纯化溶菌酶 | 第26页 |
| 2.3.6 SDS-PAGE | 第26-28页 |
| 2.3.7 考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第28-29页 |
| 2.3.8 蛋白质的质谱鉴定 | 第29页 |
| 2.4 结果与分析 | 第29-39页 |
| 2.4.1 凝胶层析初步分离鸡蛋清液中各过敏原蛋白的效果 | 第29-30页 |
| 2.4.2 阳离子交换层析纯化卵转铁蛋白和溶菌酶 | 第30-32页 |
| 2.4.3 不同凝胶层析纯化卵转铁蛋白的比较 | 第32-34页 |
| 2.4.4 羟基磷灰石纯化卵转铁蛋白效果 | 第34页 |
| 2.4.5 Sephacryl S-100凝胶层析纯化溶菌酶 | 第34-35页 |
| 2.4.6 纯化过程中蛋白质含量变化 | 第35-36页 |
| 2.4.7 OVT和Lys质谱鉴定结果 | 第36-39页 |
| 2.5 讨论 | 第39-41页 |
| 2.5.1 蛋清预处理条件确定 | 第39页 |
| 2.5.2 阳离子交换层析条件的选择 | 第39-40页 |
| 2.5.3 羟基磷灰石纯化条件的确定 | 第40页 |
| 2.5.4 凝胶层析条件确定 | 第40-41页 |
| 2.6 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 卵转铁蛋白和溶菌酶的实验室小试放大纯化研究 | 第42-56页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 材料与设备 | 第42-44页 |
| 3.2.1 试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.2 主要仪器与设备 | 第43页 |
| 3.2.3 溶液配制 | 第43-44页 |
| 3.3 实验方法 | 第44-46页 |
| 3.3.1 蛋清预处理 | 第44页 |
| 3.3.2 阳离子初步分离卵转铁蛋白和溶菌酶 | 第44-45页 |
| 3.3.3 羟基磷灰石纯化卵转铁蛋白 | 第45页 |
| 3.3.4 凝胶层析纯化溶菌酶 | 第45页 |
| 3.3.5 SDS-PAGE鉴定纯化的蛋白 | 第45页 |
| 3.3.6 考马斯亮蓝法测蛋白浓度 | 第45页 |
| 3.3.7 圆二色谱测蛋白二级结构 | 第45-46页 |
| 3.3.8 荧光探针分析卵转铁蛋白和溶菌酶的表面疏水性 | 第46页 |
| 3.4 结果与分析 | 第46-53页 |
| 3.4.1 卵转铁蛋白和溶菌酶的阳离子交换层析分离效果 | 第46-47页 |
| 3.4.2 卵转铁蛋白的羟基磷灰石层析分离精制 | 第47-48页 |
| 3.4.3 溶菌酶的Sephacryl S-100凝胶层析分离精制 | 第48-49页 |
| 3.4.4 样品纯度鉴定 | 第49页 |
| 3.4.5 蛋白质纯化过程中含量的变化 | 第49-50页 |
| 3.4.6 卵转铁蛋白和溶菌酶的二级结构 | 第50-52页 |
| 3.4.7 荧光探针分析卵转铁蛋白和溶菌酶的表面疏水性 | 第52-53页 |
| 3.5 讨论 | 第53-55页 |
| 3.5.1 关于阳离子交换层析初步分离卵转铁蛋白和溶菌酶的效果 | 第53-54页 |
| 3.5.2 关于卵转铁蛋白放大制备的羟基磷灰石层析效果 | 第54页 |
| 3.5.3 关于溶菌酶放大制备的凝胶层析效果 | 第54-55页 |
| 3.5.4 关于卵转铁蛋白和溶菌酶的结构变化 | 第55页 |
| 3.6 本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 卵转铁蛋白和溶菌酶纯化制备的中试工艺设计 | 第56-61页 |
| 4.1 引言 | 第56页 |
| 4.2 中试工艺路线 | 第56-58页 |
| 4.2.1 蛋清蛋黄分离操作单元 | 第56页 |
| 4.2.2 调配罐操作单元 | 第56页 |
| 4.2.3 离心操作单元 | 第56-57页 |
| 4.2.4 中空超滤浓缩操作单元 | 第57页 |
| 4.2.5 凝胶过滤层析操作单元 | 第57-58页 |
| 4.3 中试工艺各操作单元设备的选型 | 第58-60页 |
| 4.3.1 蛋清蛋黄分离机 | 第58页 |
| 4.3.2 调配罐 | 第58页 |
| 4.3.3. 超滤设备 | 第58页 |
| 4.3.4 阳离子交换层析柱 | 第58-59页 |
| 4.3.5 羟基磷灰石层析柱 | 第59页 |
| 4.3.6 凝胶层析柱 | 第59页 |
| 4.3.7 泵的确定 | 第59-60页 |
| 4.4 中试设备流程图 | 第60页 |
| 4.5 中试设备参数 | 第60页 |
| 4.6 本章小结 | 第60-61页 |
| 第五章 结论与展望 | 第61-62页 |
| 5.1 结论 | 第61页 |
| 5.2 建议与展望 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 硕士期间研究成果 | 第66-67页 |
| 附录A | 第67-68页 |
| 附录B | 第68-69页 |
| 附录C | 第69页 |
