桦褐孔菌NRPS/PKS在3种宿主中的表达



桦褐孔菌NRPS/PKS在3种宿主中的表达

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桦褐孔菌NRPS/PKS在3种宿主中的表达

论文目录
摘要	第1-5页
Abstract	第5-10页
1 引言	第10-18页
· 桦褐孔菌黑色素的研究	第10-12页
· 桦褐孔菌概述	第10页
· 桦褐孔菌黑色素的形成途径	第10-11页
· 桦褐孔菌NPM基因簇的概述	第11-12页
· 利用构巢曲霉研究桦褐孔菌NRPS/PKS的策略	第12-14页
· 构巢曲霉的研究背景	第12-13页
· 酿酒酵母构建葡萄糖淀粉酶表达载体的优势	第13-14页
· NRPS/PKS基因分段表达的宿主选择策略	第14-15页
· 次级产物的提取技术	第15-16页
· 本文的研究目的和意义	第16-18页
2 对摇瓶发酵和异源表达的桦褐孔菌的产物进行抗氧化能力的鉴定	第18-26页
· 材料	第18-20页
· 菌株	第18-19页
· 主要试剂	第19页
· 主要仪器设备	第19页
· 基本溶液和培养基的配方	第19-20页
· 试验方法	第20-23页
· 样品的准备	第20页
· 制备葡聚糖凝胶G-50的悬浮液	第20-22页
· 样品的浓缩	第22页
· 清除自由基	第22-23页
· 结果与分析	第23-24页
· 小结	第24-26页
3 利用酵母同源重组构建glaA融合蛋白表达载体	第26-44页
· 材料	第26-28页
· 菌株	第26-27页
· 主要试剂	第27页
· 主要仪器设备	第27页
· 基本溶液和培养基的配方	第27-28页
· 试验方法	第28-38页
· 所需目的基因片段的克隆	第28-32页
· 利用酿酒酵母同源重组构建质粒	第32-38页
· 结果与分析	第38-41页
· 基因的克隆与检测	第38页
· 转化子的鉴定	第38-40页
· 检测提取的质粒	第40-41页
· 讨论与分析	第41-42页
· 小结	第42-44页
4 利用构巢曲霉葡萄糖淀粉酶基因进行异源蛋白表达	第44-62页
· 材料	第44-46页
· 菌株	第44页
· 主要试剂	第44-45页
· 主要仪器设备	第45页
· 基本溶液和培养基的配方	第45-46页
· 试验方法	第46-56页
· 获取共转片段	第46-50页
· 转化并检测	第50-53页
· 蛋白表达	第53-56页
· 结果分析	第56-60页
· 基因的克隆与检测	第56-60页
· 讨论与分析	第60-61页
· 小结	第61-62页
5 通过不同的宿主分段表达基因NRPS/PKS	第62-84页
· 材料	第62-64页
· 菌株	第62页
· 主要试剂	第62-63页
· 主要仪器设备	第63页
· 溶液及培养基的配方	第63-64页
· 实验方法	第64-74页
· 制备桦褐孔菌的cDNA	第64-65页
· 关键基因的克隆	第65-67页
· 基因与表达载体的连接	第67-68页
· 转化及鉴定	第68-69页
· 融合蛋白的表达	第69-71页
· 蛋白纯化	第71-73页
· 蛋白体外反应并检测	第73-74页
· 结果分析	第74-81页
· 目的基因NRPS/PKS NRPS和NRPS/PKS_PKS的克隆	第74页
· 载体的双酶切检测	第74-75页
· 重组载体的检测和重组菌株的筛选	第75-78页
· 重组载体的表达	第78-79页
· 液相分析	第79-81页
· 讨论与分析	第81-82页
· 小结	第82-84页
6 结论	第84-86页
参考文献	第86-92页
致谢	第92-94页
作者简历	第94-96页
	第96页

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