论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| abstract | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第19-28页 |
| 1.1 .炎症性肠病 | 第19页 |
| 1.2 .间质干细胞 | 第19-22页 |
| 1.2.1 .间质干细胞的定义及特征 | 第19-20页 |
| 1.2.2 .间质干细胞与IBD | 第20-21页 |
| 1.2.3 .间质干细胞与巨噬细胞 | 第21-22页 |
| 1.3 .巨噬细胞 | 第22-24页 |
| 1.3.1 .巨噬细胞特性 | 第22页 |
| 1.3.2 .巨噬细胞与IBD | 第22-23页 |
| 1.3.3.巨噬细胞中的15-LOX-1 | 第23-24页 |
| 1.4 .研究目的、方法、实验设计及意义 | 第24-28页 |
| 1.4.1 .研究目的 | 第24页 |
| 1.4.2 .研究方法 | 第24页 |
| 1.4.3 .实验设计 | 第24-27页 |
| 1.4.4 .研究意义 | 第27-28页 |
| 第二章 巨噬细胞参与DSS诱导的IBD | 第28-40页 |
| 2.1 .实验仪器和材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 .实验动物 | 第28页 |
| 2.1.2 .主要实验仪器和耗材 | 第28-29页 |
| 2.1.3 .主要试剂和耗材 | 第29页 |
| 2.1.4 .主要溶液配制 | 第29-30页 |
| 2.2 .实验方法 | 第30-35页 |
| 2.2.1 .CD11b-DTR转基因小鼠纯合子鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.2 .清除巨噬细胞模型的构建及流式细胞术鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.3 .CD11b-DTR转基因小鼠IBD模型的构建 | 第32页 |
| 2.2.4 .H&E染色 | 第32页 |
| 2.2.5 .组织RNA提取和浓度测定 | 第32-33页 |
| 2.2.6 .RNA逆转录 | 第33-34页 |
| 2.2.7 .荧光定量PCR | 第34-35页 |
| 2.2.8 .图像与统计学分析 | 第35页 |
| 2.3 .实验结果 | 第35-38页 |
| 2.3.1 .DT能够有效清除CD11b-DTR小鼠巨噬细胞 | 第35-36页 |
| 2.3.2 .巨噬细胞清除影响DSS诱导的IBD发生发展 | 第36-38页 |
| 2.3.3 .巨噬细胞清除影响IBD小鼠结直肠、脾脏炎症因子表达水平 | 第38页 |
| 2.4 .讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 HucMSCs通过调控巨噬细胞来缓解IBD | 第40-51页 |
| 3.1 .实验仪器和材料 | 第40-42页 |
| 3.1.1 .实验动物和细胞株 | 第40页 |
| 3.1.2 .主要实验仪器 | 第40页 |
| 3.1.3 .主要试剂和耗材 | 第40-41页 |
| 3.1.4 .主要溶液配制 | 第41-42页 |
| 3.2 .实验方法 | 第42-46页 |
| 3.2.1 .HucMSCs分离培养 | 第42页 |
| 3.2.2 .HucMSCs缓解小鼠IBD模型的构建 | 第42页 |
| 3.2.3 .H&E染色及免疫组织(IHC)化学检测 | 第42-43页 |
| 3.2.4 .组织RNA提取和浓度测定 | 第43页 |
| 3.2.5 .RNA逆转录 | 第43-44页 |
| 3.2.6 .荧光定量PCR | 第44页 |
| 3.2.7 .组织蛋白提取 | 第44页 |
| 3.2.8 .Western blot | 第44-45页 |
| 3.2.9 .图像与统计学分析 | 第45-46页 |
| 3.3 .实验结果 | 第46-50页 |
| 3.3.1 .HucMSCs修复DSS诱导的IBD依赖调控巨噬细胞 | 第46-47页 |
| 3.3.2 .HucMSCs抑制炎症因子表达、促进组织细胞再生依赖调控巨噬细胞 | 第47-50页 |
| 3.4 .讨论 | 第50-51页 |
| 第四章 HucMSCs通过调节巨噬细胞15-LOX-1 的表达来缓解IBD | 第51-58页 |
| 4.1 .实验仪器和材料 | 第51页 |
| 4.1.1 .实验动物和细胞株 | 第51页 |
| 4.1.2 .主要实验仪器 | 第51页 |
| 4.1.3 .主要试剂和耗材 | 第51页 |
| 4.2 .实验方法 | 第51-52页 |
| 4.2.1 .HucMSCs缓解小鼠IBD模型的构建 | 第51-52页 |
| 4.2.2 .H&E染色及免疫组织(IHC)化学检测 | 第52页 |
| 4.2.3 .组织RNA提取和浓度测定 | 第52页 |
| 4.2.4 .RNA逆转录 | 第52页 |
| 4.2.5 .荧光定量PCR | 第52页 |
| 4.2.6 .组织蛋白提取 | 第52页 |
| 4.2.7 .Western blot | 第52页 |
| 4.2.8 .图像与统计学分析 | 第52页 |
| 4.3 .实验结果 | 第52-56页 |
| 4.4 .讨论 | 第56-58页 |
| 第五章HucMSCs来源miR-148b-5p调节巨噬细胞表达的15-LOX-1 | 第58-67页 |
| 5.1 .实验仪器和材料 | 第58-59页 |
| 5.1.1 .实验动物和细胞株 | 第58页 |
| 5.1.2 .主要实验仪器 | 第58页 |
| 5.1.3 .主要试剂和耗材 | 第58-59页 |
| 5.2 .实验方法 | 第59-62页 |
| 5.2.1 .RAW264.7和hucMSCs共培养 | 第59页 |
| 5.2.2 .HucMSCs转染miR-148b-5p mimics和 inhibitor | 第59页 |
| 5.2.3 .细胞RNA提取 | 第59页 |
| 5.2.4 .RNA逆转录 | 第59-60页 |
| 5.2.5 .荧光定量PCR | 第60页 |
| 5.2.6 .MiRNA提取 | 第60页 |
| 5.2.7 .MiRNA逆转录 | 第60页 |
| 5.2.8 .MiRNA荧光定量PCR | 第60-61页 |
| 5.2.9 .细胞蛋白提取 | 第61页 |
| 5.2.10 .Western blot | 第61页 |
| 5.2.11 .双荧光素酶报告基因 | 第61页 |
| 5.2.12 .图像与统计学分析 | 第61-62页 |
| 5.3 .实验结果 | 第62-65页 |
| 5.3.1 .预测、筛选参与调节15-LOX-1 以缓解IBD的特定分子 | 第62-63页 |
| 5.3.2.HucMSCs来源miR-148b-5p调节巨噬细胞15-LOX-1 | 第63-65页 |
| 5.4 .讨论 | 第65-67页 |
| 第六章 HucMSCs通过miR-148b-5p下调巨噬细胞表达的15-LOX-1以缓解IBD | 第67-73页 |
| 6.1 .实验仪器和材料 | 第67页 |
| 6.1.1 .实验动物和细胞株 | 第67页 |
| 6.1.2 .主要实验仪器 | 第67页 |
| 6.1.3 .主要试剂和耗材 | 第67页 |
| 6.2 .实验方法 | 第67-68页 |
| 6.2.1 .小鼠模型构建 | 第67页 |
| 6.2.2 .H&E染色及免疫组织(IHC)化学检测 | 第67-68页 |
| 6.2.3 .组织RNA提取、逆转录和荧光定量PCR | 第68页 |
| 6.2.4 .组织蛋白提取和western blot | 第68页 |
| 6.2.5 .图像与统计学分析 | 第68页 |
| 6.3 .实验结果 | 第68-72页 |
| 6.4 .讨论 | 第72-73页 |
| 第七章 结论与展望 | 第73-75页 |
| 7.1 .主要结论 | 第73页 |
| 7.2 .展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第71-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及参加会议 | 第87页 |
| 一、发表论文 | 第87页 |
| 二、参加会议 | 第87页 |
| 三、获奖情况 | 第87页 |
