论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-26页 |
| · 水稻细条病的研究概况 | 第13-17页 |
| · 水稻细条病的发现及发病特点 | 第13-14页 |
| · 病原菌的分类与文化 | 第14-15页 |
| · 细条病抗性评价方法 | 第15页 |
| · 水稻细条病的抗性鉴定与抗源筛选 | 第15-16页 |
| · 水稻细条病的抗性生理研究 | 第16-17页 |
| · 水稻细条病抗性遗传及抗性QTL和基因 | 第17-19页 |
| · 水稻细条病抗性遗传 | 第17页 |
| · 水稻细条病抗性QTL研究进展 | 第17-18页 |
| · 水稻细条病抗性基因研究进展 | 第18-19页 |
| · 植物抗病相关基因的研究方法 | 第19-22页 |
| · 克隆植物抗病相关基因 | 第19-20页 |
| 1.3.1.1 鸟枪克隆法(Shotgun Cloning) | 第19页 |
| 1.3.1.2 转座子标签法(Transposon Tagging) | 第19页 |
| 1.3.1.3 图位克隆法(Map-based cloning) | 第19-20页 |
| · 寻找有表达差异的基因 | 第20-22页 |
| 1.3.2.1 mRNA差异显示技术(mRNA differential display) | 第20页 |
| · mRNA表达谱分析 | 第20页 |
| 1.3.2.3 扣除性cDNA杂交法(subtractive cDNA hybridization) | 第20-21页 |
| 1.3.2.4 抑制性扣除杂交法(suppression subtractive hybridization,SSH) | 第21页 |
| 1.3.2.5 DNA微阵列(DNA microarray) | 第21-22页 |
| · 生物信息学的方法用于抗病基因的发现和鉴定 | 第22页 |
| · 植物MYB转录因子基因的研究现状 | 第22-24页 |
| · 在植物方面已经研究出来的MYB基因及相关功能 | 第22-24页 |
| · 参与苯丙素代谢途径 | 第22-23页 |
| · 参与细胞分化、形态建成的发育调控 | 第23页 |
| · 参与植物对激素的应答 | 第23页 |
| · 参与植物对生物和非生物胁迫的应答 | 第23-24页 |
| · 参与细胞周期的调控 | 第24页 |
| · 作为一种端粒结合蛋白对染色体起保护作用 | 第24页 |
| · 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-34页 |
| · 水稻品种和来源 | 第26页 |
| · 菌株和载体 | 第26页 |
| · 引物设计 | 第26-27页 |
| · OsDRxoc1和OsDRxoc2基因序列PCR扩增 | 第27-29页 |
| · PCR产物纯化 | 第28-29页 |
| · 水稻超量表达载体和抑制表达载体的构建 | 第29页 |
| · 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第29-30页 |
| · 超量表达转基因植株GUS染色 | 第30页 |
| · 转基因植株PCR检测 | 第30-31页 |
| · 细条病接种和病情鉴定 | 第31页 |
| · 白叶枯病接种和病情鉴定 | 第31页 |
| · OsDRxoc2转基因植株干旱胁迫处理 | 第31页 |
| · OsDRxoc2转基因植株盐胁迫处理 | 第31页 |
| · 转基因植株基因表达荧光定量PCR分析 | 第31-34页 |
| · 植物总RNA的提取 | 第32页 |
| · RT-PCR | 第32-33页 |
| · 转基因植株基因表达荧光定量PCR分析 | 第33页 |
| · 分光光度法测定OsDRxoc1转基因植株叶片的叶绿素含量 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-53页 |
| · 基因OsDRxoc1和OsDRxoc2结构与功能预测 | 第34-36页 |
| · 基因OsDRxoc1和OsDRxoc2超量表达和抑制表达片段的扩增 | 第36-37页 |
| · 水稻超量表达载体和抑制表达载体的构建 | 第37-40页 |
| · pU1301-OsDRxoc2植物超量表达载体的构建 | 第37页 |
| · ds1301-OsDRxoc2植物抑制表达载体的构建 | 第37-39页 |
| · pU1301-OsDRxoc1植物超量表达载体的构建 | 第39-40页 |
| · ds1301-OsDRxoc1植物抑制表达载体的构建 | 第40页 |
| · 水稻遗传转化再生体系的建立 | 第40-41页 |
| · T0代超量表达转基因植株GUS染色分析 | 第41页 |
| · T0代转基因植株PCR检测 | 第41-42页 |
| · T0代超量表达和抑制表达转基因植株表型分折 | 第42-43页 |
| · 转基因植株病原接种鉴定和分析 | 第43-48页 |
| 3.8.1 OsDRxoc2 T1代水稻转基因植株病原接种鉴定和分析 | 第43-45页 |
| · OsDRxoc1转基因植株病原接种鉴定和分析 | 第45-48页 |
| · OsDRxoc2转基因植株干旱和盐胁迫处理 | 第48-50页 |
| · OsDRxoc2转基因植株的盐胁迫处理 | 第48-49页 |
| · OsDRxoc2转基因植株干旱胁迫处理 | 第49-50页 |
| 3.10. OsDRxoc1转基因植株叶片的叶绿素含量测定 | 第50-51页 |
| · 荧光定量RT-PCR分析 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| · 关于OsDRxoc1和OsDRxoc2基因 | 第53页 |
| · MYB蛋白可能参与了水稻与细条病菌的互作反应 | 第53-54页 |
| · 抗病相关基因的鉴定对植物抗病研究的贡献 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-57页 |
| · OsDRxoc1的超量表达提高了水稻植株对细条病菌RS105的抗性 | 第55页 |
| · OsDRxoc1的超量表达影响了水稻植株正常生长发育 | 第55-56页 |
| · 超量表达OsDRxoc2提高了水稻植株对白叶枯病菌PXO99的抗性 | 第56页 |
| · OsDRxoc2的超量表达提高了水稻植株对干旱胁迫的抗性 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-69页 |
| 附录 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第77
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