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中国北方棉区棉花立枯病菌融合群鉴定及优势融合群的特异性检测

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中国北方棉区棉花立枯病菌融合群鉴定及优势融合群的特异性检测
论文目录
 
中文摘要第1-11页
Abstract第11-14页
1 引言第14-33页
  · 棉花立枯病的研究概况第14-18页
    · 棉花立枯病的发病规律第14-15页
      · 症状第14页
      · 病害循环第14-15页
      · 发病条件第15页
    · 病原第15-17页
    · 病害防治第17-18页
  · 立枯丝核菌的分类概况第18-24页
    · 分类特征第18页
    · 国际分类框架第18-19页
    · 菌丝融合群分类法在丝核菌上的应用第19-24页
      · 多核丝核菌及融合群划分第19-22页
      · 双核丝核菌及融合群划分第22-24页
  · 分子生物学技术在立枯丝核菌遗传多样性研究中的应用第24-27页
    · 血清学技术和GC含量第24页
    · DNA分子标记技术的应用第24-27页
      · Southern杂交技术和DNA的限制性酶切片段长度多态性(RFLP)第24-25页
      · RAPD用于融合群的划分第25页
      · 扩增片段长度多态性(AFLP)第25-26页
      1.3.2.4 简单重复序列(Simple Sequence Repeats,SSR)第26-27页
      · 同工酶分析方法第27页
      · ISSR标记技术第27页
  · 核糖体DNA在丝核菌系统演化研究中的意义及作用第27-30页
    · 真菌rDNA特异性扩增的通用引物第28页
    · rDNA序列分析在丝核菌系统演化研究中的应用第28-30页
  · 特异性引物对的合成第30-31页
  · 本研究的目的意义第31-33页
2 材料方法第33-45页
  · 棉花立枯病标本的采集及菌株的分离与鉴定第33页
    · 田间病株采集第33页
    · 病田土壤诱发第33页
    · 病原物的分离纯化第33页
  · 菌株的培养性状及核相观察第33页
  · 菌丝融合群测定第33-34页
  · 供试菌株DNA的提取第34-35页
    · 提取试剂第34页
    · 所用仪器第34-35页
    · DNA提取步骤第35页
  2.5 棉花立枯病菌的5.8S rDNA-ITS区序列分析第35-37页
    · 供试菌株及试剂第35-36页
    · PCR扩增第36-37页
    · 特异性扩增片段的回收第37页
    · 回收产物检测第37页
  · 特异扩增片段的克隆第37-38页
    · 克隆反应体系的建立第37-38页
    · 转化第38页
    · 单克隆检测第38页
  · 序列测定及分析第38页
  · 优势融合群AG4-HG-I菌株及双核丝核菌菌株的致病性测定第38-39页
    · 麦粒培养基的配制第38页
    · 棉花种子的处理筛选第38-39页
    · 温室接种测定致病性第39页
  · 双核丝核菌的生防效果测定第39页
  · AG4-HG-I融合群的ISSR体系的建立及遗传多样性分析第39-45页
    · 供试菌株与引物第39-41页
    · ISSR反应体系的优化第41-42页
    · 引物筛选第42页
    · 特异性引物的合成第42页
      · 引物设计区段的确定第42页
      · 引物设计第42页
    · 特异性引物的验证第42-45页
      · 利用各融合群菌株DNA的验证第43页
      · 从土壤中提取DNA验证该特异性引物第43-44页
      · PCR扩增检测第44-45页
3 结果与分析第45-65页
  · 北方地区棉花立枯病菌的融合群构成第45-51页
  · 病原菌的培养性状及核相观察第51-53页
    · 培养性状观察第51-52页
    · 菌株的核相观察第52-53页
  3.3 棉花立枯病菌的5.8S rDNA-ITS区序列分析第53-55页
    · PCR扩增结果第53页
    3.3.2 棉花立枯病菌不同融合群菌株的5.8S rDNA-ITS区序列分析第53-55页
  · 棉花立枯病菌不同融合群菌株的系统发育关系分析第55页
  · 优势融合群AG4-HG-I菌株及双核丝核菌的致病性测定第55页
  · 双核丝核菌的生防效果测定第55-57页
  · AG4-HG-I融合群的ISSR分析及特异性引物的合成第57-65页
    · ISSR反应体系的建立和优化第57-58页
    · 引物筛选第58-59页
    · 特异性引物的合成第59-62页
    · 特异性引物的检测第62-65页
      · 引物对AG4-HG-I及其他融合群菌株的特异性扩增第62页
      · 引物对土壤真菌DNA的特异性扩增第62-64页
      · 特异性引物对的灵敏度检测第64-65页
4 讨论第65-69页
  · 关于从土壤中分离丝核菌的方法问题第65页
  · 关于北方棉区棉花立枯病的融合群组成第65-66页
  · 关于立枯丝核菌的核相第66页
  · 关于优势融合群AG4-HG-I的致病性第66-67页
  · 关于双核丝核菌的生防效果第67页
  · 关于特异性引物的合成第67-69页
5 结论第69-70页
参考文献第70-80页
致谢第80-81页
攻读学位期间发表论文情况第81 页

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