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利用农杆菌介导法和基因枪法获得转BRi基因玉米材料
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利用农杆菌介导法和基因枪法获得转BRi基因玉米材料
论文目录
 
中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-28页
　　· 玉米转基因技术的发展和应用现状第11-21页
　　　　· 高效遗传转化体系的建立第11-13页
　　　　　　· 基因转化受体系统第11-13页
　　　　· 转基因技术及其应用第13-16页
　　　　　　· 基因枪轰击法第13-14页
　　　　　　· 花粉管通道法第14页
　　　　　　1.1.2.3 其他外源 DNA 直接转移法第14-15页
　　　　　　· 载体转化法-农杆菌介导法第15-16页
　　　　· 农杆菌介导玉米愈伤组织遗传转化的影响因素第16-18页
　　　　　　· 受体材料第16-17页
　　　　　　· 培养基第17页
　　　　　　· 农杆菌菌株和载体第17页
　　　　　　· 农杆菌菌液浓度和浸染时间第17页
　　　　　　· 培养温度第17-18页
　　　　· 转基因玉米的检测技术第18页
　　　　　　· 基于蛋白质的检测方法第18页
　　　　　　· 基于核酸的检测方法第18页
　　　　　　· 其他检测技术第18页
　　　　· 转基因玉米商业化现状第18-19页
　　　　　　· 发达国家的现状第18-19页
　　　　　　· 发展中国家的商业化情况第19页
　　　　· 转基因玉米的安全性问题第19-21页
　　　　· 转基因玉米的发展趋势第21页
　　· 高直链淀粉玉米的遗传育种研究第21-28页
　　　　· 高直链淀粉玉米的研究现状第21-22页
　　　　· 高直链淀粉玉米研究的兴起第22-23页
　　　　1.2.3 ae 型高直链淀粉玉米的育种方法第23-24页
　　　　　　· 回交转育法第23-24页
　　　　　　· 家系选择法第24页
　　　　　　· 轮回选择法第24页
　　　　· 利用基因工程技术创造高直链淀粉玉米第24-28页
　　　　　　· 淀粉合成有关的酶及其作用机制第24-26页
　　　　　　· 与高直链淀粉有关的基因功能研究第26页
　　　　　　1.2.4.3 利用 RNAi 技术获得高直链淀粉植株第26-28页
　　· 本研究的目的和意义第28页
2 材料与方法第28-39页
　　· 试验材料第28-29页
　　　　· 受体材料第28页
　　　　· 目的基因、载体、菌株与质粒第28-29页
　　　　· 酶与各种生化试剂第29页
　　· 试验方法第29-39页
　　　　· 培养基第29-30页
　　　　· 愈伤组织受体系统第30页
　　　　· 农杆菌介导第30页
　　　　　　· 浸染强度的优化第30页
　　　　　　· 农杆菌介导转化第30页
　　　　· 基因枪转化第30-34页
　　　　　　· 大肠杆菌细胞的转化第30-31页
　　　　　　· 小量试剂盒法提取质粒第31页
　　　　　　· 大量法提取质粒第31-32页
　　　　　　2.2.3.4 微弹的制备(6 枪量)第32-33页
　　　　　　· 基因枪参数优化和基因枪转化第33-34页
　　　　· 抗性愈伤的筛选，分化和植株再生第34页
　　　　　　· 抗性愈伤的筛选，分化和植株再生第34页
　　　　　　2.2.4.2 生根壮苗培养基中 ABT 浓度的确定第34页
　　　　· 转基因植株的分子检测第34-39页
　　　　　　2.2.5.1 PCR 检测第34-35页
　　　　　　2.2.5.2 RT-PCR 检测第35-36页
　　　　　　2.2.5.3 Southern blotting第36-39页
3 结果与分析第39-49页
　　· 幼胚转化受体系统的建立和生根壮苗培养基中生根粉最佳浓度的确定第39-40页
　　　　· 幼胚转化受体系统的建立第39页
　　　　· 生根壮苗培养基中生根粉最佳浓度的确定第39-40页
　　· 农杆菌介导转化参数的优化第40-42页
　　　　3.2.1 齐 319 最适浸染强度的确定第40-41页
　　　　3.2.2 18-599 最适浸染强度的确定第41-42页
　　· 基因枪转化体系的优化第42-44页
　　　　· 愈伤组织的预处理第42-43页
　　　　· 钨粉浓度第43页
　　　　· 质粒浓度第43-44页
　　· 转基因植株的获得和分子检测第44-49页
　　　　· 愈伤组织的筛选和分化第44-45页
　　　　· 转基因植株的获得第45页
　　　　· 转化植株的分子检测第45-49页
　　　　　　3.4.3.1 PCR 检测第45-47页
　　　　　　3.4.3.2 RT-PCR 检测第47页
　　　　　　3.4.3.3 Southern blotting 检测第47-49页
4 讨论第49-51页
　　4.1 II 型愈伤组织获得的限制性因素第49-50页
　　· 农杆菌转化体系的优化第50页
　　· 基因枪转化体系的优化第50-51页
5 结论第51-53页
参考文献第53-59页
致谢第59-60页
攻读硕士期间发表论文情况第60 页

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