论文目录 | |
| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 英汉缩略词对照 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 植物抗逆分子机制 | 第9-12页 |
| 1.1.1 在逆境胁迫中直接发挥功能的蛋白 | 第9-10页 |
| 1.1.1.1 LEA蛋白 | 第9-10页 |
| 1.1.1.2 水通道蛋白 | 第10页 |
| 1.1.1.3 Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第10页 |
| 1.1.2 渗透调节因子 | 第10-11页 |
| 1.1.2.1 脯氨酸 | 第11页 |
| 1.1.2.2 甜菜碱 | 第11页 |
| 1.1.3 抗氧化防御相关酶 | 第11-12页 |
| 1.1.3.1 POD | 第11-12页 |
| 1.1.3.2 SOD | 第12页 |
| 1.1.4 感应传导胁迫信号、调控基因表达相关基因 | 第12页 |
| 1.2 植物抗逆相关转录因子 | 第12-13页 |
| 1.2.1 bZIP转录因子 | 第12-13页 |
| 1.2.2 MYB转录因子 | 第13页 |
| 1.2.3 WRKY转录因子 | 第13页 |
| 1.2.4 AP2/EREBP转录因子 | 第13页 |
| 1.3 DREB转录因子 | 第13-15页 |
| 1.3.1 DREB转录因子的结构特点 | 第14页 |
| 1.3.2 DREB转录因子的表达调控 | 第14页 |
| 1.3.3 DREB基因在植物抗逆基因工程中的作用 | 第14-15页 |
| 1.4 实时荧光定量PCR的应用 | 第15-16页 |
| 1.5 白花泡桐概述 | 第16-17页 |
| 2 引言 | 第17-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-32页 |
| 3.1 实验材料 | 第18页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 3.1.2 实验主要试剂和试剂盒 | 第18页 |
| 3.1.3 实验主要仪器 | 第18页 |
| 3.1.4 常用溶液配方 | 第18页 |
| 3.2 实验方法 | 第18-32页 |
| 3.2.1 植物材料培养及胁迫处理 | 第18-19页 |
| 3.2.1.1 材料的培养和实验取样 | 第18-19页 |
| 3.2.1.2 幼苗的胁迫处理 | 第19页 |
| 3.2.2 白花泡桐DNA的提取(CTAB法)和检测 | 第19页 |
| 3.2.2.1 白花泡桐DNA的提取 | 第19页 |
| 3.2.2.2 白花泡桐DNA的检测 | 第19页 |
| 3.2.3 白花泡桐RNA的提取和检测 | 第19-20页 |
| 3.2.3.1 白花泡桐RNA的提取 | 第19-20页 |
| 3.2.3.2 白花泡桐RNA的检测 | 第20页 |
| 3.2.4 第一链cDNA的合成 | 第20-21页 |
| 3.2.5 泡桐DREB基因保守序列的获得 | 第21-22页 |
| 3.2.5.1 设计合成引物 | 第21页 |
| 3.2.5.2 PCR扩增 | 第21-22页 |
| 3.2.6 利用3'RACE、5'RACE克隆已知保守序列的3'端、5'端序列 | 第22-27页 |
| 3.2.6.1 巢式PCR扩增3'端序列 | 第22-24页 |
| 3.2.6.2 巢式PCR扩增5'端序列 | 第24-27页 |
| 3.2.7 白花泡桐DREB基因全长序列的获得 | 第27页 |
| 3.2.8 不同胁迫处理下白花泡桐DREB基因的表达分析 | 第27-32页 |
| 3.2.8.1 实时荧光定量PCR相关引物设计 | 第27-28页 |
| 3.2.8.2 引物的特异性检测 | 第28页 |
| 3.2.8.3 检测引物二聚体 | 第28-29页 |
| 3.2.8.4 绘制梯度稀释标准曲线DNA模板的制备 | 第29-30页 |
| 3.2.8.5 不同逆境条件下目的基因表达的实时荧光定量分析 | 第30-32页 |
| 4 结果与分析 | 第32-39页 |
| 4.1 白花泡桐DREB基因序列的获得 | 第32-33页 |
| 4.1.1 白花泡桐基因组DNA、RNA检测 | 第32页 |
| 4.1.2 白花泡桐DREB保守序列的获得 | 第32页 |
| 4.1.3 DREB基因3,端、5,端序列的获得 | 第32-33页 |
| 4.1.4 DREB基因全长序列 | 第33页 |
| 4.2 白花泡桐DREB基因生物信息学分析 | 第33-36页 |
| 4.3 不同胁迫处理下白花泡桐DREB基因的表达分析 | 第36-39页 |
| 4.3.1 引物的特异性检测 | 第36-37页 |
| 4.3.2 引物二聚体检测 | 第37页 |
| 4.3.3 不同胁迫下目的基因表达的实时荧光定量分析结果 | 第37-39页 |
| 5 结论与讨论 | 第39-41页 |
| 5.1 白花泡桐DREB基因的克隆 | 第39页 |
| 5.2 白花泡桐DREB基因全长序列的分析 | 第39-40页 |
| 5.3 白花泡桐DREB基因的不同胁迫条件下表达分析 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-49页 |
| ABSTRACT | 第49-50页 |
