[高血压医学论文]
【摘要】 目的: 研究 高密度脂蛋白(HDL)抗内毒素,保护肝细胞作用. 方法 :用超离心方法分离纯化血浆脂蛋白,建立内毒素血症急性肝衰竭小鼠模型,观察HDL处理后各组肝衰竭小鼠的存活率及主要脏器的组织学改变,RTPCR检测小鼠肝细胞TNFα和IL6 mRNA表达水平. 结果:HDL对内毒素及半乳糖胺所致小鼠肝衰竭有明显保护作用, 治疗 组存活率明显高于对照组(85% vs 15%);内毒素血症肝衰竭小鼠肝脏发生了广泛的变性坏死,而HDL治疗组小鼠肝细胞仅发生了轻微变性坏死,单纯无脂蛋白血浆(LFF)则无此保护作用;内毒素小鼠肝组织TNFα和IL6 mRNA表达水平增高,HDL治疗组TNFα和IL6 mRNA表达水平接近正常. 结论:HDL具有抗内毒素血症保护小鼠肝细胞,预防肝衰竭的作用. 其作用机制可能是通过降低肝衰竭小鼠TNFα和IL6的过度表达而发挥作的.
【关键词】 脂蛋白类;内毒素;肝衰竭,细胞因子
0引言
高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein, HDL)颗粒小,蛋白质含量高,主要为apoAⅠ,Levels等[1]报道HDL可以介导细菌内毒素清除和脱毒. 内毒素血症与肝损害互为因果,在重型肝炎发病中具有重要作用. 但至今临床上尚无真正的抗内毒素药物. 我们用人血浆纯化HDL治疗急性肝功能衰竭小鼠内毒素血症, 观察其对肝脏的保护作用, 并进一步研究其机制.
1材料和方法
1.1材料
正常人新鲜血浆200 mL,密度梯度离心(日立CP100MX型超速离心机)收集密度在1.063~1.21 g/cm3的HDL部分,透析浓缩后考马斯亮蓝测定蛋白含量. 另外取最底层无脂蛋白血浆部分(LFF,d>1.21)透析浓缩. HDL纯度鉴定采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法 分离胶浓度为12%,浓缩胶浓度为6%,血浆超离心各种脂蛋白层各取25 μL加SDS制备样品,点样,恒流20 mA,样品进入分离胶后恒流30 mA,电泳3 h 30 min.
1.2方法<……
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