作者：陈浩　丁秀云　高媛　柳晓兰　高建恩　孙启鸿

【摘要】  　　为了表达和纯化具有生物学活性的人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)D，探讨VEGFD对血管增生作用，从人胎肺组织中提取总RNA，设计特异性引物并 应用 RTPCR法扩增VEGFD成熟肽片段；经测序证明目的片段序列正确后，构建重组表达质粒pGEX5X1/VEGFD并在大肠杆菌BL21（DE3）中进行GSTVEGFD融合蛋白的表达。结果表明，融合蛋白的分子量约为38 kD，表达量占菌体总蛋白的15%以上，抗GST和抗VEGFD的抗体均能识别融合蛋白；纯化的GSTVEGFD融合蛋白与VEGFR3/Fc具有结合活性，并能刺激红白血病细胞系HEL细胞生长；在鸡胚尿囊膜实验中GSTVEGFD具有促进鸡胚尿囊膜血管生成的作用。结论：成功表达了具有生物学活性的重组人VEGFD融合蛋白，为进一步 研究 VEGFD的作用机理提供了实验模型。

【关键词】  血管内皮生长因子D；血管内皮生长因子受体3；鸡胚尿囊膜；血管生成

　　  Recombinant Human VEGFD Induces the Angiogenesis of the Chick Embryo Chorioallantoic Membrane

    Abstract    Vascular endothelial growth factorD (VEGFD) and vascular endothelial growth factor receptor2,3 (VEGFR2,3) with their corresponding signaling pathway play significant roles in the development of the embryonic vascular system and pathological lymphangiogenesis. The study was aimed to express and purify the GSTVEGFD fusion protein, and to explore the angiogenesis effect of VEGFD. The total RNA was extracted from human fe……

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