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survivin反义寡核苷酸逆转顺铂诱导的人肺腺癌细胞凋亡耐受作用

[高血压医学论文]    

【摘要】  目的探讨survivin反义寡核苷酸逆转人肺腺癌细胞对顺铂诱导的细胞凋亡耐受的效应。 方法 1.常规体外培养A549/CDDP细胞,以脂质体包裹的survivin 反义寡核苷酸(ASODN)体外转染细胞。2.采用二苯胺反应法(DPA)测定DNA片段化、激酶法检测Caspase3酶活性及流式细胞术检测细胞凋亡率(AI),评价细胞凋亡程度。3.采用MTT法测定细胞存活率和生长抑制率, 计算 半效抑制浓度(IC50)及耐药倍数(RI)。结果 1.单用ASODN转染组DNA片段化比率、细胞凋亡率和Caspase3相对活性分别增高至(43.55±6.07)%、 (34.03±2.25)%和1.1298±0.2502,和各对照组相比较,均有显著性变化(P<0.01);而ASODN和CDDP联用组上述凋亡指标增高更为明显,分别达(76.73±2.04)%、(65.85±5.47)%和1.6805±0.2758(P<0.05)。2.转染组A549/CDDP细胞生长抑制显著,单用转染组和联合CDDP组生长抑制率分别增高达59.3%和83.7%(P<0.05)。3.ASODN转染后CDDP对细胞IC50由(225.03±10.59)μmol/L减低至(158.84±4.256)μmol/L,其RI由11.9减为8.39。结论survivin 反义寡核苷酸体外转染可降低耐顺铂人肺腺癌细胞的凋亡阈值,从而较大程度上逆转其对顺铂诱导的细胞凋亡耐受。

【关键词】  survivin基因;反义寡核苷酸;多药耐药性;细胞凋亡

 related factors, such as bcl2 family and inhibitor apoptosis family proteins(IAPs),can result in inhibition of apoptosis induced by chemotherapy agents and thereby confer to drug resistance in malignancies. Regulation of those gene expressions may reverse the apoptosis resistance to chemical agents. In the present study, we transfect cisplatinresistant human lung adenocarcinoma A549/CDDP cell lines to explore whether antisense oligodeoxynucleotides(A……

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