【关键词】  系统

安全有效地将外源基因转入细胞是生物技术的一个基础目标，为此近来对细胞内DNA的稳定与转运机理研究已有了快速的进展。事实上基因的表达取决于多种因素，包括胞内DNA的释放，DNA在胞浆内的稳定，DNA载体复合物在胞内的脱包装和DNA对胞核的趋向性。未来的DNA转运系统必须完全符合这些要求，才能有效地带领DNA跨过浆膜通过胞内环境到达胞核。

目前，DNA转运已成了发展疾病新疗法（如基因治疗和DNA疫苗）的中枢问题，影响着未来几年的临床医学和生物技术的发展。大多数DNA转运系统作用于三阶段（DNA浓缩和复合、内吞、入核）中之一:负电荷的DNA分子在转运前先由阳离子转染试剂浓缩并成复合体，通过内吞被细胞摄入，低pH和溶酶体酶使复合体降解，DNA从浓缩的复合体中解放出来，通过被认为是核膜孔（10nm）或细胞分裂时进入细胞核。从细胞外到核内DNA运转的低效是由于这多步骤的自然过程，每一步都会引起DNA数量的减少。因此鉴定与克服每一个DNA进入途径的障碍都可改进DNA转运和转染效率。其中有三个主要障碍:浆膜摄入太低，因稳定性差DNA分子释放不足，及缺乏核靶向。本文聚焦此三障碍描述。

1 机械与电转方法

裸DNA直接注入胞核内是最简单的，但此法一次只能注入一个细胞，虽然有效但不适于大量细胞或活体中应用，只适用于转基因生物的研究。近来用控制的非扩张性的压力介导的裸DNA转染法，用于心血管组织，可达50%的效率，但能否用于其它组织有待观察。类似的用水力（通过尾静脉快速注射）将裸DNA注入肝细胞，效率达40%。电转法很难用于体内，但可用于皮肤、角膜、上皮、肌肉等。近来报道用低压高频进行肌肉组织的转染，仅有一过性损伤，是很有意义的改进。

2 化学法