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猪卵泡颗粒细胞凋亡及几种影响因素的研究

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猪卵泡颗粒细胞凋亡及几种影响因素的研究
论文目录
 
中文摘要第1-8 页
英文摘要第8-10 页
1. 前言第10-21 页
  1.1 细胞凋亡简介第10-12 页
    1.1.1 细胞凋亡的发现及特征第10 页
    1.1.2 细胞凋亡与细胞程序性死亡的关系第10-11 页
    1.1.3 细胞凋亡的生物学意义第11 页
    1.1.4 细胞凋亡的调控第11 页
    1.1.5 细胞凋亡的检测方法第11-12 页
  1.2 卵泡闭锁简介第12-14 页
    1.2.1 卵泡闭锁的含义第12-13 页
    1.2.2 卵泡闭锁是生殖细胞退化方式之一第13-14 页
    1.2.3 卵泡闭锁的形态和生化特征第14 页
  1.3 卵泡闭锁的实质是颗粒细胞凋亡第14-15 页
  1.4 卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡的影响因素研究进展第15-19 页
    1.4.1 激素对颗粒细胞凋亡的影响第15-17 页
      1.4.1.1 性腺激素对卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡的影响第15-16 页
      1.4.1.2 类固醇激素对卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡的影响第16 页
      1.4.1.3 其它激素对卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡的影响第16-17 页
    1.4.2 卵巢内IGF体系对卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡的影响第17-19 页
      1.4.2.1 IGFs的分子生物学及其对卵泡发育的影响第17-18 页
      1.4.2.2 IGF-Rs、IGFBPs分子生物学及其对卵泡发育的影响第18-19 页
    1.4.3. 其它细胞因子对卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡的影响第19 页
      1.4.3.1 EGF/TGFα和bFGF对颗粒细胞凋亡的影响第19 页
      1.4.3.2 IL-1β和IL-6对颗粒细胞凋亡的影响第19 页
  1.5 本次研究的目的、意义及主要研究项目第19-21 页
    1.5.1 本次研究的目的及意义第19-20 页
    1.5.2 主要研究项目第20-21 页
2. 材料与方法第21-26 页
  2.1 体外实验用卵泡的获取及分类第21 页
  2.2 发情周期各阶段的划分及确定方法第21 页
  2.3 性未成熟母猪的确定第21 页
  2.4 性成熟母猪PMSG的注射及实验组对照组的设立第21 页
  2.5 性未成熟母猪PMSG的注射及实验组对照组设立第21-22 页
  2.6 体内实验卵巢的获取及处理方法第22 页
  2.7 体内实验卵泡的分类、计数和颗粒细胞、卵泡液的获取第22 页
  2.8 血清的获取及处理第22 页
  2.9 体外实验用颗粒细胞的获取第22 页
  2.10 卵巢及卵泡的石蜡组织学切片制作第22 页
  2.11 透射电镜样品制备及观察第22-23 页
  2.12 卵巢及卵泡石蜡组织学切片的H.E染色第23 页
  2.13 卵泡生理状态的组织学判定标准第23 页
  2.14 卵巢及卵泡石蜡组织学切片的TUNEL原位标记第23 页
  2.15 颗粒细胞涂片的H.E染色第23 页
  2.16 颗粒细胞涂片H.E染色后健康细胞与凋亡细胞判定标准第23-24 页
  2.17 颗粒细胞涂片的TUNEL原位检测第24 页
  2.18 颗粒细胞的DNA分析第24 页
  2.19 培养液的配制第24-25 页
  2.20 颗粒细胞的培养第25 页
  2.21 培养液的收集第25 页
  2.22 激素的测定第25 页
  2.23 数据处理第25-26 页
3. 结果第26-46 页
  3.1 猪卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡现象的检验及实验手段研究结果第26-28 页
    3.1.1 直观形态观察法判定卵泡生理状态准确性的检测结果第26 页
    3.1.2 卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡现象研究第26-27 页
      3.1.2.1 卵泡超微结构分析第26-27 页
      3.1.2.2 颗粒细胞DNA电泳分析结果第27 页
      3.1.2.3 卵巢及单个卵泡的TUNEL法原位标记结果第27 页
    3.1.3 细胞涂片H.E染色法判定凋亡与TUNEL法判定凋亡的相关分析第27-28 页
    3.1.4 健康卵泡与闭锁卵泡的颗粒细胞凋亡比例测定第28 页
  3.2 发情周期不同阶段猪卵泡颗粒细胞凋亡规律研究结果第28-32 页
    3.2.1 发情周期不同阶段卵巢表面各类卵泡数量的变化第28 页
    3.2.2 发情周期不同阶段卵巢表面各类卵泡中颗粒细胞的凋亡比例第28-29 页
    3.2.3 发情周期不同阶段卵巢组织学切片检测卵泡闭锁及颗粒细胞凋亡结果第29 页
    3.2.4 发情周期各阶段血清孕酮及雌激素水平的变化第29-31 页
    3.2.5 发情周期不同阶段卵巢中各类卵泡液中孕酮的浓度第31-32 页
  3.3 发情间期注射PMSG对猪卵泡发育及颗粒细胞凋亡影响的研究结果第32-36 页
    3.3.1 注射PMSG后不同时间卵巢表面各类卵泡数量的变化第32 页
    3.3.2 注射PMSG后不同阶段卵巢表面各类卵泡中颗粒细胞的凋亡比例第32-33 页
    3.3.3 PMSG注射后不同时间及情期相应阶段血清类固醇激素的变化第33-36 页
    3.3.4 PMSG注射后不同时间及情期相应阶段各类卵泡液孕酮浓度第36 页
    3.3.5 PMSG注射后不同时间卵巢组织学切片检测卵泡闭锁和颗粒细胞凋亡的结果第36 页
  3.4 性未成熟小母猪注射PMSG对卵泡闭锁及颗粒细胞凋亡影响的研究结果第36-38 页
    3.4.1 注射PMSG后不同时间卵巢表面各类卵泡数量的变化第36-37 页
    3.4.2 性未成熟仔猪注射PMSG后不同时间卵泡颗粒细胞凋亡比例第37 页
    3.4.3 性未成熟仔猪注射PMSG后卵巢组织学切片H.E染色及TUNEL标记结果第37-38 页
    3.4.4 性未成熟仔猪注射PMSG后血清类固醇激素水平的变化第38 页
    3.4.5 性未成熟仔猪注射PMSG后各类卵泡的卵泡液孕酮浓度第38 页
  3.5 性成熟母猪与性未成熟小母猪注射PMSG后卵泡闭锁及颗粒细胞凋亡的比较第38-40 页
    3.5.1 卵巢表面卵泡数量的比较第40 页
    3.5.2 各类卵泡颗粒细胞凋亡比例的比较第40 页
    3.5.3 血清类固醇激素水平的比较第40 页
  3.6 PMSG对体外培养的卵泡和颗粒细胞的细胞凋亡影响研究结果第40-43 页
    3.6.1 不同浓度PMSG对体外培养卵泡颗粒细胞的细胞凋亡影响第40-41 页
    3.6.2 颗粒细胞培养液中类固醇激素浓度第41 页
    3.6.3 PMSG对体外培养的卵泡中颗粒细胞凋亡的影响第41-43 页
    3.6.4 卵泡培养后培养液类固醇激素浓度第43 页
  3.7 IGF-I对体外培养卵泡及颗粒细胞的细胞凋亡影响研究结果第43-46 页
    3.7.1 IGF-I对体外培养卵泡颗粒细胞的细胞凋亡影响第43-44 页
    3.7.2 IGF-I对颗粒细胞分泌类固醇激素的影响第44-45 页
    3.7.3 IGF-I对培养卵泡颗粒细胞凋亡及分泌类固醇激素能力的影响第45-46 页
4. 讨论第46-54 页
  4.1 直观形态观察判定卵泡生理状态的准确性与可行性第46 页
  4.2 卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡现象的确认第46 页
  4.3 卵泡闭锁过程中细胞凋亡发生的范围及定量检测第46-47 页
  4.4 利用颗粒细胞凋亡比例来判定卵泡生理状态第47 页
  4.5 发情周期各阶段卵泡数量的变化及规律第47-48 页
  4.6 发情周期各阶段卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡的关系第48 页
  4.7 发情周期各阶段血清中类固醇激素及卵泡液中类固醇激素水平第48-49 页
  4.8 性成熟母猪PMSG处理后卵巢中各类卵泡的数量变化第49-50 页
  4.9 性成熟母猪PMSG处理后各类卵泡颗粒细胞凋亡比例第50 页
  4.10 性成熟母猪PMSG处理后外周血清及卵泡液类固醇激素水平问题第50-51 页
  4.11 性未成熟母猪PMSG处理后卵巢中各类卵泡的数量变化第51-52 页
  4.12 性未成熟母猪PMSG处理后各类卵泡中颗粒细胞凋亡发生比例第52 页
  4.13 性未成熟母猪PMSG处理后血清及卵泡液中类固醇激素浓度变化第52 页
  4.14 PMSG对培养卵泡及颗粒细胞的细胞凋亡影响第52-53 页
  4.15 PMSG对卵泡及颗粒细胞分泌类固醇激素的影响第53 页
  4.16 IGF-I对卵泡颗粒细胞凋亡的影响第53 页
  4.17 IGF-I对体外培养卵泡及颗粒细胞的生理功能影响第53-54 页
结论第54-56 页
参考文献第56-65 页
图版及图版说明第65-73 页
致谢第73-74 页
作者简介第74页

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