论文目录 | |
| 中文摘要 | 第12-14
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| 英文摘要 | 第14-17
页 |
| 1 引言 | 第17-45
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| · 类风湿性关节炎动物模型的研究进展 | 第17-22
页 |
| · 单纯诱导性RA 动物模型 | 第17-20
页 |
| · 病证结合的RA 动物模型 | 第20-21
页 |
| · 转基因RA 动物模型 | 第21-22
页 |
| · Ⅱ型胶原抗体诱导的RA 动物模型 | 第22
页 |
| · 类风性关节炎主要病因 | 第22-25
页 |
| · 感染因素 | 第22-24
页 |
| · 遗传因素 | 第24-25
页 |
| · 类风湿性关节炎发病机理的研究进展 | 第25-30
页 |
| · 细胞水平 | 第25-27
页 |
| · 分子水平 | 第27-30
页 |
| · IL-17 与 RA 疾病 | 第30-33
页 |
| · IL-17 结构与成员 | 第30
页 |
| · IL-17 受体 | 第30-31
页 |
| · 作用机制 | 第31
页 |
| · 生物学作用 | 第31-33
页 |
| · 多聚蛋白聚糖酶与RA 疾病 | 第33-35
页 |
| · 结构 | 第33-34
页 |
| · 在RA 关节炎中作用 | 第34-35
页 |
| · 调节机制 | 第35
页 |
| · 软骨细胞的培养概况 | 第35-37
页 |
| · 蛋白质免疫印迹技术研究进展 | 第37-38
页 |
| · 实时定量PCR 技术研究进展 | 第38-42
页 |
| · 原理 | 第38-40
页 |
| · 在医学研究中的应用 | 第40-42
页 |
| · 本研究的目的与意义 | 第42-45
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| 2 材料 | 第45-50
页 |
| · 制备RA 动物模型的主要试剂 | 第45
页 |
| · ELISA 定量检测主要试剂 | 第45
页 |
| · 培养软骨细胞主要试剂 | 第45-46
页 |
| · 蛋白质免疫印迹主要试剂 | 第46-47
页 |
| · 实时定量PCR 主要试剂 | 第47
页 |
| · 主要仪器与设备 | 第47-48
页 |
| · 试验动物 | 第48
页 |
| · 引物合成 | 第48-50
页 |
| 3 方法 | 第50-60
页 |
| · 类风湿性关节炎动物模型的制备 | 第50-53
页 |
| · 造模方法 | 第50
页 |
| · 血清、踝关节组织的采集 | 第50
页 |
| · 关节炎指数的判定标准与发病率 | 第50-51
页 |
| · 抗Ⅱ型胶原抗体的检测 | 第51
页 |
| · IL-1β的ELISA 定量检测 | 第51-52
页 |
| · IL-17、TNF-α的ELISA 定量检测 | 第52
页 |
| · 踝关节组织病理切片的制作 | 第52-53
页 |
| · 影像学检查 | 第53
页 |
| · 数据分析 | 第53
页 |
| · 软骨细胞的培养 | 第53-54
页 |
| · 原代细胞的分离培养 | 第53
页 |
| · 传代培养 | 第53-54
页 |
| · 冻存与复苏 | 第54
页 |
| · IL-17 诱导软骨细胞 | 第54-55
页 |
| · Western blot 检测软骨细胞ADAMTS-4 的蛋白质表达 | 第55-57
页 |
| · 蛋白样品的制备 | 第55
页 |
| · SDS-PAGE 分离ADAMTS-4 基因表达产物 | 第55-56
页 |
| · ADAMTS-4 的半干式电转移 | 第56
页 |
| · ADAMTS-4 的免疫学反应 | 第56
页 |
| · 化学发光检测ADAMTS-4 的表达 | 第56-57
页 |
| · 实时定量PCR 检测软骨细胞ADAMTS-4 的转录水平 | 第57-60
页 |
| · 软骨细胞总RNA 提取和质量鉴定 | 第57
页 |
| · 软骨细胞ADAMTS-4 基因cDNA 的制备 | 第57
页 |
| · 软骨细胞ADAMTS-4 基因的PCR 扩增 | 第57-58
页 |
| · 实时定量PCR 体系确定 | 第58-59
页 |
| · 软骨细胞ADAMTS-4 mRNA 表达的实时定量PCR 检测 | 第59
页 |
| · 数据分析 | 第59-60
页 |
| 4 结果 | 第60-73
页 |
| · RA 动物模型制备结果 | 第60-64
页 |
| · RA 动物模型的临床症状 | 第60
页 |
| · RA 大鼠的体重变化 | 第60
页 |
| · 发病率 | 第60-61
页 |
| · 关节炎指数结果 | 第61-62
页 |
| · 抗CⅡ抗体的检测结果 | 第62
页 |
| · IL-1β、TNF-α和IL-17 的水平 | 第62-63
页 |
| · 踝关节组织病理学检查结果 | 第63
页 |
| · 踝关节影象学检查结果 | 第63-64
页 |
| · 软骨细胞培养结果 | 第64-65
页 |
| · 原代软骨细胞培养结果 | 第64
页 |
| · 传代软骨细胞培养结果 | 第64
页 |
| · 软骨细胞冻存复苏结果 | 第64-65
页 |
| · ADAMTS-4 免疫印迹分析结果 | 第65-67
页 |
| · 软骨细胞上清液蛋白浓度 | 第65
页 |
| · ADAMTS-4 SDS-PAGE 电泳结果 | 第65
页 |
| · ADAMTS-4 免疫分析结果 | 第65-67
页 |
| · 软骨细胞的ADAMTS-4 的实时定量PCR 结果 | 第67-73
页 |
| · 软骨细胞RNA 提取质量鉴定结果 | 第67
页 |
| · 软骨细胞ADAMTS-4 PCR 扩增片段鉴定 | 第67-68
页 |
| · 实时定量PCR 体系 | 第68-71
页 |
| · ADAMTS-4 的实时定量PCR 结果 | 第71-73
页 |
| 5 讨论 | 第73-84
页 |
| · RA 动物模型制备 | 第73-76
页 |
| · 造模方法的选择 | 第73
页 |
| · 模型动物血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平 | 第73-74
页 |
| · TNF-α在RA 中的作用 | 第74-75
页 |
| · IL-1β在RA 中的作用 | 第75
页 |
| · RA 疾病模型中IL-17 升高的意义 | 第75-76
页 |
| · 大鼠组织病理学与影像学改变 | 第76
页 |
| · 软骨细胞的培养 | 第76-79
页 |
| · 获取原代软骨细胞的方法选择 | 第76-77
页 |
| · 培养条件的选择 | 第77-78
页 |
| · 生长特点 | 第78
页 |
| · RA 中软骨细胞的作用 | 第78-79
页 |
| · ADAMTS-4 蛋白质免疫印迹结果分析 | 第79-81
页 |
| · 电转印中转膜缓冲液的选择和转膜效率 | 第79
页 |
| · 转移膜的封闭 | 第79
页 |
| · 免疫印迹中抗体的选择 | 第79-80
页 |
| · 底物化学发光的选择 | 第80
页 |
| · ADAMTS-4 蛋白质免疫印迹结果分析 | 第80-81
页 |
| · 软骨细胞ADAMTS-4 基因实时PCR 检测结果探讨 | 第81-84
页 |
| · 内参基因的选择 | 第81
页 |
| · 相对定量方法的选择 | 第81-82
页 |
| · IL-17 诱导软骨细胞后检测靶标的选择 | 第82
页 |
| · IL-17 诱导软骨细胞上调表达ADAMTS-4 的探讨 | 第82-84
页 |
| 6 结论 | 第84-85
页 |
| 致谢 | 第85-86
页 |
| 参考文献 | 第86-98
页 |
| 附录 | 第98-100
页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第100页 |
