论文目录 | |
| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 缩略词表 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-21页 |
| 主要参考文献 | 第20-21页 |
| 第一部分 低分子量聚乙烯亚胺基因载体的构建及评价 | 第21-51页 |
| 1 仪器与材料 | 第22-24页 |
| · 仪器 | 第22-23页 |
| · 材料和试剂 | 第23页 |
| · 细胞株 | 第23-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-29页 |
| · 低分子量聚乙烯亚胺基因载体的构建 | 第24-25页 |
| · 溶剂的无水化处理 | 第24页 |
| · 普朗尼克（Pluronic）两端羟基的活化 | 第24-25页 |
| · 不同修饰度的普朗尼克低分子量聚乙烯亚胺（PluronicgPEI）的合成及纯化 | 第25页 |
| · PluronicgPEI 基因载体的性质评价 | 第25-26页 |
| · 聚合物分子量的测定 | 第25页 |
| · 核磁图谱测定 | 第25-26页 |
| · 载体材料的水解性能考察 | 第26页 |
| · PluronicgPEI/DNA 纳米复合物理化性质的考察 | 第26-29页 |
| · PluronicgPEI/DNA 纳米复合物的制备 | 第26-27页 |
| · 凝胶电泳阻滞实验 | 第27页 |
| · 粒径和 ZETA 电位测定 | 第27页 |
| · 原子力显微镜实验 | 第27页 |
| · 材料降解及释放 DNA 能力实验 | 第27页 |
| · 抗酶解能力实验 | 第27-28页 |
| · 细胞毒性实验 | 第28页 |
| · 细胞转染实验 | 第28页 |
| · LSCM 考察 PluronicgPEI/DNA 纳米复合物的入胞情况 | 第28页 |
| · 体内组织分布实验 | 第28-29页 |
| · 数据处理和统计方法 | 第29页 |
| 3 实验结果 | 第29-47页 |
| · Pluronic 两端羟基的活化 | 第29-30页 |
| · 不同修饰度的 PluronicgPEI 的合成及纯化 | 第30-31页 |
| · 聚合物分子量测定 | 第31页 |
| · 核磁图谱测定 | 第31-36页 |
| · 载体材料的水解性能考察 | 第36-37页 |
| · 凝胶电泳阻滞实验 | 第37-38页 |
| · 粒径和 Zeta 电位测定 | 第38-40页 |
| · 原子力显微镜实验 | 第40页 |
| · 材料降解及释放 DNA 能力实验 | 第40-41页 |
| · 抗酶解能力实验 | 第41-42页 |
| · 细胞毒性实验 | 第42-43页 |
| · 细胞转染实验 | 第43-44页 |
| · LSCM 考察 PluronicgPEI/DNA 纳米复合物的入胞情况 | 第44-47页 |
| · 体内组织分布实验 | 第47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| · PluronicgPEI 的水解能力对载体材料的影响 | 第47-48页 |
| · PluronicgPEI/DNA 纳米复合物的入胞情况 | 第48页 |
| 5 小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第二部分 Bcl2/Bax 的双向基因策略调节细胞凋亡的体外评价 | 第51-61页 |
| 1 仪器和材料 | 第52-53页 |
| · 仪器 | 第52页 |
| · 材料与试剂 | 第52-53页 |
| 2 实验方法 | 第53-55页 |
| · Bc12 质粒的构建 | 第53-54页 |
| · BaxsiRNA 的设计和筛选 | 第54-55页 |
| · BaxsiRNA 的设计 | 第54页 |
| · Real time PCR 检测 | 第54-55页 |
| · Bc12 质粒和 BaxsiRNA 转染对黑素细胞的影响 | 第55页 |
| · 数据处理和统计方法 | 第55页 |
| 3 实验结果 | 第55-59页 |
| · BaxsiRNA 的设计 | 第55页 |
| · Real time PCR 检测 | 第55-57页 |
| · Bc12 质粒和 BaxsiRNA 转染对黑素细胞的影响 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59页 |
| · Bcl2 与 Bax 基因协同对细胞凋亡的抑制作用 | 第59页 |
| 5 小结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-61页 |
| 第三部分 α黑素细胞刺激素配体的体内外靶向性评价 | 第61-82页 |
| 1 仪器和材料 | 第61-63页 |
| · 仪器 | 第61-62页 |
| · 材料与试剂 | 第62-63页 |
| · 实验动物 | 第63页 |
| 2 实验方法 | 第63-70页 |
| · 短肽[Arg6] αMSHND 的合成、纯化及表征 | 第63-65页 |
| · 短肽[Arg6] αMSHND 的合成 | 第63-64页 |
| · 短肽[Arg6] αMSHND 的纯化 | 第64-65页 |
| · 短肽[Arg6] αMSHND 的表征 | 第65页 |
| · αMSH 和短肽[Arg6] αMSHND 的体外亲合力比较 | 第65-66页 |
| · αMSH 和短肽[Arg6] αMSHND 的荧光标记 | 第65页 |
| · 体外亲合力比较实验 | 第65-66页 |
| · P123gPEI [Arg6] αMSHND（简写为 P123PEIMSH）的合成及纯化 | 第66-67页 |
| · 利用 SMCC 法制备 maleimided P123gPEI | 第66页 |
| · maleimided P123gPEI 与短肽[Arg6] αMSHND 偶联及产物的纯化 | 第66-67页 |
| · P123PEIMSH 的浓度依赖性考察 | 第67-68页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒的性质考察 | 第68-69页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒的制备 | 第68页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒粒径及 Zeta 电位的测定 | 第68页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒的稳定性考察 | 第68-69页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒体外靶向考察 | 第69页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒促进黑素细胞增殖效果考察 | 第69页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒体内靶向考察 | 第69-70页 |
| · 人黑素细胞组织裸鼠移植模型的建立 | 第69-70页 |
| · P123PEIMSH/（DNA+RNA）给药系统体内靶向效果评价 | 第70页 |
| · 数据处理和统计方法 | 第70页 |
| 3 实验结果 | 第70-78页 |
| · 短肽[Arg6] αMSHND 的表征 | 第70-72页 |
| · αMSH 和短肽[Arg6] αMSHND 的体外亲合力比较 | 第72-73页 |
| · P123PEIMSH 的浓度依赖性考察 | 第73页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒的性质考察 | 第73-75页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒粒径及 Zeta 电位的测定 | 第73-75页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒的稳定性考察 | 第75页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒体外靶向考察 | 第75-76页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒促进黑素细胞增殖效果考察 | 第76-77页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒体内靶向考察 | 第77-78页 |
| · 裸鼠黑素组织造模实验结果 | 第77页 |
| · P123PEIMSH/（DNA+RNA）给药系统体内靶向效果评价 | 第77-78页 |
| 4 讨论 | 第78-80页 |
| · [Arg6] αMSHND 短肽的设计与合成 | 第78-79页 |
| · P123PEIMSH 的浓度依赖性考察 | 第79页 |
| · P123PEIMSH 载基因纳米粒的性质考察 | 第79-80页 |
| · P123PEIMSH/（DNA+RNA）给药系统体内靶向效果评价 70 | 第80页 |
| 5 小结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-82页 |
| 第四部分 双向基因调控的聚阳离子纳米复合物抗凋亡作用研究及安全性评价 | 第82-97页 |
| 1 仪器与材料 | 第82-84页 |
| · 仪器 | 第82-83页 |
| · 材料与试剂 | 第83-84页 |
| · 实验动物 | 第84页 |
| 2 实验方法 | 第84-86页 |
| · 白癜风小鼠模型的建立 | 第84页 |
| · P123PEIMSH/（DNA+RNA）给药系统抗白癜风效果考察 | 第84-85页 |
| · 动物分组 | 第84-85页 |
| · 皮肤亮度治疗效果评价 | 第85页 |
| · 黑素细胞数量变化考察 | 第85页 |
| · P123PEIMSH/（DNA+RNA）给药系统安全性考察 | 第85-86页 |
| · 动物血常规及肝、肾功能检测 | 第85页 |
| · 病理组织的免疫组化检测 | 第85页 |
| · 给药系统溶血性考察 | 第85-86页 |
| · 数据处理和统计方法 | 第86页 |
| 3 实验结果 | 第86-93页 |
| · 白癜风小鼠模型造模结果 | 第86-87页 |
| · P123PEIMSH/（DNA+RNA）给药系统抗白癜风效果考察 | 第87-90页 |
| · 皮肤亮度治疗效果评价 | 第87-88页 |
| · 黑素细胞染色考察 | 第88-90页 |
| · P123PEIMSH/（DNA+RNA）给药系统安全性考察 | 第90-93页 |
| · 裸鼠血常规及肝、肾功能检测结果 | 第90-91页 |
| · 白癜风小鼠皮下组织切片观察结果 | 第91-92页 |
| · 给药系统溶血性考察 | 第92-93页 |
| · 白癜风小鼠平均体重观察结果 | 第93页 |
| 4 讨论 | 第93-95页 |
| · P123PEIMSH/(DNA+RNA)给药系统促黑细胞生长作用 | 第93-94页 |
| · P123PEIMSH/(DNA+RNA)给药系统安全性评价 | 第94-95页 |
| 5 小结 | 第95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 全文总结 | 第97-99页 |
| 主要创新点 | 第99-100页 |
| 综述 | 第100-115页 |
| 参考文献 | 第109-115页 |
| 科研工作情况简介 | 第115-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
