论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-6
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| 英文摘要 | 第6-13
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| 附图清单 | 第13-16
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| 附表清单 | 第16-17
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| 主要缩略词和符号表 | 第17-18
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| 第一章 文献综述 | 第18-28
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| · 真菌杀虫剂的特点和发展前景 | 第18
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| · 昆虫病原真菌基因工程研究进展 | 第18-19
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| · 真菌海藻糖相关研究进展 | 第19-21
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| · 海藻糖的理化性质 | 第19-20
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| · 胁迫环境条件下生物体细胞内海藻糖含量的变化 | 第20
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| · 海藻糖对生物分子的保护作用及其可能的作用机制 | 第20-21
页 |
| · 真菌中海藻糖的主要合成途径 | 第21
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| · 热休克蛋白相关研究进展 | 第21-24
页 |
| · 热休克蛋白的研究历史 | 第21-22
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| · 热休克蛋白的分类 | 第22
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| · 热休克蛋白的生物学功能 | 第22-24
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| · 昆虫病原真菌遗传转化方法研究进展 | 第24-26
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| · 昆虫病原真菌的遗传转化方法 | 第24-26
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| · 选择标记 | 第26
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| · 重组菌株的安全性问题 | 第26
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| · 总结与展望 | 第26-28
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| 第二章 引言 | 第28-29
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| · 研究目的意义 | 第28
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| · 主要研究内容 | 第28-29
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| 第三章 球孢白僵菌海藻糖6-磷酸合成酶基因tps/的cDNA及启动子克隆与分析 | 第29-55
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| · 材料和方法 | 第29-47
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| · 实验材料 | 第29-32
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| · 实验方法 | 第32-47
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| · 结果与分析 | 第47-54
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| · Bbtpsl基因cDNA的特异片段扩增 | 第47-49
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| · Bbtpsl基因cDNA的3'/5'RACE扩增 | 第49
页 |
| · Bbtpsl基因cDNA克隆与序列分析 | 第49-50
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| · Bbtpsl基因编码氨基酸的特征分析和高级结构预测 | 第50-53
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| · Bbtpsl基因启动子的克隆与分析 | 第53-54
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| · 讨论 | 第54-55
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| 第四章 球孢白僵菌海藻糖6-磷酸合成酶基因tpsl在胁迫条件下的转录表达差异分析 | 第55-77
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| · 材料和方法 | 第58-63
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| · 实验材料 | 第58-59
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| · 实验方法 | 第59-63
页 |
| · 结果与分析 | 第63-76
页 |
| · 球孢白僵菌孢子粉固态发酵培养 | 第63-68
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| · 球孢白僵菌孢子RNA的提取 | 第68
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| · Realtime-PCR标准曲线的获得 | 第68-70
页 |
| · 高温胁迫下球孢白僵菌菌丝中tpsl的相对表达 | 第70-71
页 |
| · 低温胁迫下球孢白僵菌菌丝中tpsl的相对表达 | 第71-72
页 |
| · 紫外胁迫下球孢白僵菌菌丝中tpsl的相对表达 | 第72-73
页 |
| · 高温胁迫下球孢白僵菌孢子中tpsl的相对表达 | 第73-74
页 |
| · 低温胁迫下球孢白僵菌孢子中tpsl的相对表达 | 第74-75
页 |
| · 紫外胁迫下球孢白僵菌孢子中tpsl的相对表达 | 第75-76
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| · 讨论 | 第76-77
页 |
| 第五章 球孢白僵菌海藻糖6-磷酸合成酶基因tpsl真核表达及功能分析 | 第77-97
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| · 材料和方法 | 第78-88
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| · 实验材料 | 第78-81
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| · 实验方法 | 第81-86
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| · 毕赤酵母高拷贝重组工程菌的筛选 | 第86-88
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| · 结果与分析 | 第88-96
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| · Bbtpsl基因的真核表达载体pPIC9K/tpsl的构建 | 第88-89
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| · 重组质粒转化毕赤酵母菌及转化子的初步筛选 | 第89-96
页 |
| · 讨论 | 第96-97
页 |
| 第六章 球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸合成酶基因tpsl重组工程菌株构建及评价 | 第97-108
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| · 材料和方法 | 第97-103
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| · 实验材料 | 第97-98
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| · 实验方法 | 第98-103
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| · 结果与分析 | 第103-106
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| · pBARGPEl/tpsl载体的构建 | 第103
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| · 球孢白僵菌基因重组转化子的初筛和PCR检测 | 第103-105
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| · 重组球孢白僵菌工程菌株抗逆性评价 | 第105-106
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| · 讨论 | 第106-108
页 |
| 第七章 球孢白僵菌热休克蛋白基因hsp70的cDNA及启动子克隆与分析 | 第108-117
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| · 材料和方法 | 第108-109
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| · 实验材料 | 第108
页 |
| · 实验方法 | 第108-109
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| · 结果与分析 | 第109-115
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| · Bbhsp70基因5'-末端与3'-末端克隆 | 第109-110
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| · Bbhsp70基因cDNA克隆与序列分析 | 第110-111
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| · Bbhsp70基因编码氨基酸的特征分析和高级结构预测 | 第111-114
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| · Bbhsp70基因启动子的克隆与分析 | 第114-115
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| · 讨论 | 第115-117
页 |
| 第八章 球孢白僵菌热休克蛋白基因hsp70在胁迫条件下的转录表达差异分析 | 第117-126
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| · 材料和方法 | 第117-119
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| · 菌株来源 | 第117
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| · 试剂 | 第117
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| · 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第117-118
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| · 引物、Taqman探针的设计与合成 | 第118
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| · 标准曲线的制备 | 第118
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| · 胁迫条件下球孢白僵菌hsp70表达的相对定量检测 | 第118-119
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| · 数据分析 | 第119
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| · 结果与分析 | 第119-124
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| · 标准曲线的获得 | 第119-121
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| · 高温胁迫下球孢白僵菌hsp70的相对表达 | 第121-122
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| · 低温胁迫下球孢白僵菌hsp70的相对表达 | 第122-123
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| · 紫外胁迫下球孢白僵菌hsp70的相对表达 | 第123-124
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| · 讨论 | 第124-126
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| 第九章 球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶基因tps2的cDNA及启动子克隆与分析 | 第126-136
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| · 材料和方法 | 第126-127
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| · 实验材料 | 第126
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| · 实验方法 | 第126-127
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| · 结果与分析 | 第127-134
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| · Bbtps2基因cDNA的特异片段扩增 | 第127-128
页 |
| · Bbtps2基因5'-末端与3'-末端克隆 | 第128-129
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| · Bbtps2基因cDNA克隆与序列分析 | 第129-130
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| · Bbtps2基因编码氨基酸的特征分析和高级结构预测 | 第130-133
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| · Bbtps2基因启动子的克隆与分析 | 第133-134
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| · 讨论 | 第134-136
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| 第十章 总结 | 第136-139
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| 第十一章 创新点 | 第139-140
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| 参考文献 | 第140-153
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| 致谢 | 第153-154
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| 作者简介 | 第154
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| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第154
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| 参与的科研项目 | 第154
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