论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-6
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| ABSTRACT | 第6-11
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| 插图和附表清单 | 第11-14
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| 第一章 文献综述及立题分析 | 第14-37
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| · 细胞凋亡 | 第15-21
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| · 细胞凋亡的基本概念 | 第15-17
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| · 细胞凋亡的调控 | 第17-18
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| · 细胞凋亡与肿瘤 | 第18-21
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| · 鞘脂 | 第21-23
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| · 过氧化物酶体增殖物激活受体 | 第23-28
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| · PPARs的分布和结构 | 第24
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| · PPARs的转录调控 | 第24-28
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| · 鞘脂与细胞凋亡 | 第28-32
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| · 神经酰胺与细胞凋亡 | 第28-31
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| · 鞘氨醇与细胞凋亡 | 第31-32
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| · 鞘氨醇-1-磷酸与细胞凋亡 | 第32
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| · 过氧化物酶体增殖物激活受体与细胞凋亡调控 | 第32-36
页 |
| · PPARα与细胞凋亡 | 第32-33
页 |
| · PPARγ与细胞凋亡 | 第33-34
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| · PPARβ与细胞凋亡 | 第34
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| · PPARs与癌症相关性 | 第34-36
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| · 立题分析和实验内容设计 | 第36-37
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| 第二章 鞘脂与细胞凋亡调控 | 第37-65
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| · 材料与试剂 | 第37-40
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| · 细胞 | 第37
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| · 主要试剂 | 第37-39
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| · 主要仪器 | 第39
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| · 分析软件 | 第39-40
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| · 实验方法 | 第40-45
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| · 细胞培养及处理 | 第40
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| · 形态学检测 | 第40
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| · 细胞存活率的测定-MTT法(噻唑蓝比色法) | 第40-41
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| · 流式细胞仪检测细胞周期 | 第41
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| · 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第41
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| · DNA梯检测 | 第41-42
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| · Western blot-ECL检测方法 | 第42-43
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| · 流式细胞仪测量胞内免疫荧光 | 第43-44
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| · 细胞免疫荧光化学 | 第44
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| · 统计学分析 | 第44-45
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| · 结果及分析 | 第45-61
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| · 不同剂量11种不同鞘脂类物质对细胞存活率(MTT)的影响 | 第45-47
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| · 细胞形态学的变化 | 第47-51
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| · Annexin V-PI定量检测细胞凋亡 | 第51-52
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| · 流式细胞仪检测细胞周期 | 第52-53
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| · 神经酰胺处理短期细胞的p38MAPK的含量的变化 | 第53-54
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| · 神经酰胺短期处理细胞的ERK信号途径的影响 | 第54-55
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| · 抑制p38 MAPK对神经酰胺短期、长期处理引致细胞凋亡的影响 | 第55-56
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| · p38 MAPK的抑制剂对神经酰胺长期处理细胞引致的DNA片段化的影响 | 第56
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| · 神经酰胺长期处理导致细胞出现典型的细胞凋亡 | 第56-58
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| · Western blot检测神经酰胺对NFκB表达量变化的影响 | 第58-59
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| · 免疫细胞化学测定神经酰胺对NFκB的转位及表达的影响 | 第59-61
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| · 神经酰胺对细胞周期素依赖蛋白激酶CDK7表达的影响 | 第61
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| · 小结 | 第61-62
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| · 讨论 | 第62-65
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| 第三章 过氧化物酶体增殖物激活受体与细胞凋亡调控 | 第65-90
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| · 材料与试剂 | 第65-66
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| · 细胞 | 第65
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| · 主要试剂 | 第65
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| · 主要仪器 | 第65-66
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| · 实验方法 | 第66-71
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| · PPARα、γ基因表达的RT-PCR检测方法 | 第66-68
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| · PCR产物回收 | 第68
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| · 大肠杆菌转化 | 第68
页 |
| · 小量提取质粒DNA | 第68
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| · 大量提取质粒DNA | 第68-69
页 |
| · 序列测定 | 第69
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| · 脂质体转染 | 第69
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| · 萤光素酶的测定 | 第69-70
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| · 细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率的测定 | 第70
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| · 统计学分析 | 第70-71
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| · 结果 | 第71-87
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| · PPARα和PPARγ的RT-PCR检测方法的建立 | 第71-74
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| · 细胞中PPARγ表达的检测 | 第74-75
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| · PPARγ不同配体对细胞活性的影响 | 第75-77
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| · PPARγ不同配体对细胞周期的影响 | 第77-79
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| · PPARγ不同配体对细胞凋亡的影响 | 第79-81
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| · PPARγ不同配体对PPAR转录活性的影响 | 第81-84
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| · PPARγ激活促进细胞凋亡的机制研究 | 第84-87
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| · 小结 | 第87-88
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| · 讨论 | 第88-90
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| 第四章 鞘脂与PPAR相互作用及其在细胞凋亡调控中的作用 | 第90-110
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| · 材料与试剂 | 第90-91
页 |
| · 细胞 | 第90
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| · 主要试剂 | 第90
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| · 主要仪器 | 第90-91
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| · 实验方法 | 第91-92
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| · 细胞免疫荧光化学 | 第91
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| · 其他方法 | 第91
页 |
| · 统计学分析 | 第91-92
页 |
| · 结果 | 第92-106
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| · 神经酰胺与PPARγ配体有相似的促进细胞凋亡、抑制细胞生长作用 | 第92-94
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| · 神经酰胺对细胞中PPARγ分布的影响 | 第94-95
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| · 神经酰胺对PPARγ mRNA表达量的影响 | 第95-97
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| · 神经酰胺对PPARγ蛋白表达量的影响 | 第97
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| · 曲格列酮对PPARγ量表达量(mRNA水平和蛋白水平)的影响 | 第97-98
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| · 神经酰胺和曲格列酮对PPARγ转录活性的影响 | 第98-99
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| · 流式细胞术检测神经酰胺对PPARγ的调节作用 | 第99-100
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| · 神经酰胺促进细胞凋亡至少部分经由PPARγ激活的途径 | 第100-102
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| · 神经酰胺ERK信号通路的影响 | 第102-104
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| · 神经酰胺和PPARγ对CDK7信号通路的影响 | 第104-106
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| · 小结 | 第106-107
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| · 讨论 | 第107-110
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| 全文总结及工作展望 | 第110-113
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| 参考文献 | 第113-121
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| 附录 | 第121-126
页 |
| 致谢 | 第126页 |
