论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-8
页 |
| Abstract | 第8-20
页 |
| 前言 | 第20-70
页 |
| 1 鱼类疾病与防治 | 第20-25
页 |
| · 感染鱼类的疾病种类 | 第20-21
页 |
| · 牙鲆养殖及病害防治 | 第21-25
页 |
| · 牙鲆养殖 | 第21-22
页 |
| · 牙鲆常见疾病及防治 | 第22-25
页 |
| 2 DNA 疫苗在水产养殖中的应用 | 第25-35
页 |
| · DNA 疫苗的发展 | 第26
页 |
| · 鱼用DNA 疫苗的构建 | 第26-27
页 |
| · 核酸疫苗产品的质量控制 | 第27-33
页 |
| · 原材料的质量控制 | 第28
页 |
| · 对核酸疫苗的要求 | 第28-29
页 |
| · 质粒DNA 载体的结构 | 第28-29
页 |
| · DNA 序列信息 | 第29
页 |
| · 对工程菌的要求 | 第29
页 |
| · 培养过程的质量控制 | 第29-30
页 |
| · 纯化过程中的质量控制 | 第30
页 |
| · 最终产品的质量控制 | 第30-33
页 |
| · 鱼类DNA 疫苗的应用效果 | 第33-35
页 |
| 3 疫苗免疫途径研究进展 | 第35-51
页 |
| · 鱼用疫苗接种方法 | 第35-36
页 |
| · 疫苗微胶囊化技术平台 | 第36-38
页 |
| · 微球胶囊化技术 | 第38-40
页 |
| · 微胶囊疫苗的释放 | 第40-42
页 |
| · 口服疫苗接种传递系统 | 第42-50
页 |
| · OVDS的优越性 | 第43
页 |
| · OVDS的常用载体材料 | 第43-44
页 |
| · OVDS的制备 | 第44-47
页 |
| · PLA／PLGA微球的制备 | 第44-45
页 |
| · 海藻酸微囊的制备 | 第45-46
页 |
| · 改性淀粉微囊的制备 | 第46
页 |
| · 肠溶包衣微粒的制备 | 第46-47
页 |
| · 偶联抗原的生物囊泡制备 | 第47
页 |
| · 微粒型OVDS的小肠吸收 | 第47-48
页 |
| · 影响微粒吸收的因素 | 第48-49
页 |
| · 粒径和微粒的疏水性 | 第48
页 |
| · 微粒的剂量和给药赋形剂 | 第48-49
页 |
| · 动物种类年龄及其进食情况 | 第49
页 |
| · 提高微粒吸收率的方法 | 第49-50
页 |
| · 存在问题和发展趋势 | 第50-51
页 |
| 4 牙鲆淋巴囊肿病研究现状 | 第51-53
页 |
| 5 鱼用核酸疫苗研究目的及展望 | 第53-55
页 |
| 参考文献 | 第55-70
页 |
| 1 核酸疫苗的制备及纯化 | 第70-79
页 |
| 引言 | 第70-71
页 |
| 1 材料与方法 | 第71-77
页 |
| · 菌种和质粒 | 第71-72
页 |
| · 工具酶及试剂 | 第72
页 |
| · 重组真核表达载体的构建 | 第72-73
页 |
| · 细菌小量培养 | 第73
页 |
| · 细菌大量培养 | 第73
页 |
| · 质粒DNA 少量快速提取 | 第73-75
页 |
| · 煮沸法 | 第74
页 |
| · 碱裂解法 | 第74-75
页 |
| · 内毒素的清除 | 第75
页 |
| · 内毒素的检测 | 第75-76
页 |
| · DNA 酶切反应 | 第76
页 |
| · 质粒DNA 的纯度测定 | 第76-77
页 |
| 2 结果与讨论 | 第77-79
页 |
| · 内毒素的清除和鉴定 | 第77
页 |
| · 重组子(pEGFP-N2-LCDV-cn- MCP0.6kb)酶切鉴定 | 第77-79
页 |
| 2 淋巴囊肿病毒海藻酸盐口服微囊核酸疫苗的研制与免疫效果研究 | 第79-103
页 |
| 摘要 | 第79-80
页 |
| 1 引言 | 第80-81
页 |
| 2 材料与方法 | 第81-88
页 |
| · 材料 | 第81
页 |
| · 核酸疫苗（pDNA）的制备 | 第81
页 |
| · 海藻酸盐微球的制备工艺（载核酸疫苗） | 第81-82
页 |
| · 微球特征的检测 | 第82-84
页 |
| · 微球粒径分析 | 第82
页 |
| · 微球表面形态分析 | 第82-83
页 |
| · 傅立叶红外光谱分析 | 第83
页 |
| · 产率，载药量和包被效率检测 | 第83
页 |
| · 胃肠条件下的模拟释放 | 第83-84
页 |
| · 包被在微球中超螺旋结构的百分比的检测 | 第84
页 |
| · 微囊核酸疫苗的口服管理 | 第84-85
页 |
| · RT-PCR检测 | 第85-86
页 |
| · 绿色免疫荧光蛋白检测 | 第86
页 |
| · 病毒的分离和纯化 | 第86-87
页 |
| · 间接法酶联免疫吸附试验 | 第87-88
页 |
| 3 结果与讨论 | 第88-98
页 |
| · 载药海藻酸盐微球的特征 | 第88-90
页 |
| · 胃肠模拟条件下pDNA释放 | 第90-91
页 |
| · 载核酸疫苗海藻酸盐微球的红外光谱分析 | 第91-92
页 |
| · 超螺旋质粒的检测 | 第92-93
页 |
| · RT- PCR分析 | 第93-95
页 |
| · 绿色荧光蛋白（GFP）的检测 | 第95-97
页 |
| · 鱼对淋巴囊肿病毒（LCDV）的体液免疫响应 | 第97-98
页 |
| 4 结论 | 第98-99
页 |
| 参考文献 | 第99-103
页 |
| 3 淋巴囊肿病毒聚丙交酯乙二酸(PLGA)口服微囊核酸疫苗的研制与免疫效果研究 | 第103-130
页 |
| 摘要 | 第103-104
页 |
| 1 引言 | 第104-106
页 |
| 2 材料和方法 | 第106-110
页 |
| · 聚合物及其他试剂 | 第106
页 |
| · 核酸疫苗的制备工艺 | 第106
页 |
| · 水包油包水(W/O/W)复乳法微囊的体的合成 | 第106-107
页 |
| · 微囊体特征的检测 | 第107-108
页 |
| · 质粒（pDNA）完整的估计 | 第108-109
页 |
| · 动物口服程序 | 第109
页 |
| · RT-PCR 检测 | 第109
页 |
| · 病毒的分离与纯化 | 第109
页 |
| · MCP 的表达与免疫荧光检测 | 第109-110
页 |
| · 酶联免疫吸附试验（Indirect-ELISA) | 第110
页 |
| 3 实验结果 | 第110-120
页 |
| · 载核酸疫苗微囊体的特征 | 第110-113
页 |
| · PLGA微囊体中质粒的完整性 | 第113-115
页 |
| · RT- PCR 分析 | 第115
页 |
| · 主要衣壳蛋白的表达与免疫荧光的检测 | 第115-118
页 |
| · 牙鲆对淋巴囊肿病毒的体液免疫响应 | 第118-120
页 |
| 4 讨论 | 第120-125
页 |
| 5 结论 | 第125-126
页 |
| 参考文献 | 第126-130
页 |
| 4 淋巴囊肿病毒壳聚糖口服微囊核酸疫苗的研制和免疫效果研究 | 第130-154
页 |
| 摘要 | 第130-131
页 |
| 1 引言 | 第131-133
页 |
| 2 材料和方法 | 第133-137
页 |
| · 聚合物和试剂 | 第133
页 |
| · 核酸疫苗的制备 | 第133
页 |
| · 油包水乳化法微球的制备方法 | 第133-134
页 |
| · 载疫苗微球特征 | 第134-135
页 |
| · 包被前后质粒疫苗的完整性 | 第135
页 |
| · 壳聚糖微球中的体外释放 | 第135-136
页 |
| · 动物口服程序 | 第136
页 |
| · RT-PCR 检测 | 第136
页 |
| · MCP 的表达与免疫荧光检测 | 第136
页 |
| · 病毒的分离与纯化 | 第136
页 |
| · 酶联免疫吸附试验（Indirect-ELISA) | 第136
页 |
| · 数据分析 | 第136-137
页 |
| 3 结果 | 第137-146
页 |
| · 壳聚糖微球的特征 | 第137-138
页 |
| · 载药壳聚糖微球中核酸疫苗完整性的检测 | 第138-139
页 |
| · 载药壳聚糖微球中核酸疫苗的体外释放试验 | 第139-141
页 |
| · MCP基因表达的RT-PCR分析 | 第141-142
页 |
| · 绿色荧光蛋白的检测 | 第142-145
页 |
| · 鱼对淋巴囊肿病毒（LCDV）的体液免疫响应 | 第145-146
页 |
| 4 讨论 | 第146-150
页 |
| 5 结论 | 第150-151
页 |
| 参考文献 | 第151-154
页 |
| 论文结论 | 第154-156
页 |
| 本论文的创新点 | 第156-157
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| 附录1 英文缩写词表 | 第157-158
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| 附录2 pEGFP-N2 载体图谱及多克隆位点 | 第158-162
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| 致谢 | 第162-163
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| 个人简历 | 第163-164
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| 发表的学术论文 | 第164-165
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