论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| · 引言 | 第9页 |
| · 课题的研究背景 | 第9-21页 |
| · 典型环境雌激素污染物：雌二醇的概况 | 第9-12页 |
| · 典型灭生性除草剂：百草枯的概况 | 第12-17页 |
| · 核糖体展示技术的研究进展 | 第17页 |
| · 核糖体展示技术的原理 | 第17-18页 |
| · 核糖体展示的优势 | 第18-19页 |
| 1.2.6 核糖体展示在模拟抗体 Anticalin 制备过程中的应用 | 第19-21页 |
| · 国内外研究现状 | 第21-22页 |
| 1.3.1 Anticalin 制备技术的研究进展 | 第21页 |
| · 核糖体展示技术适合从突变库中筛选特异模拟抗体 | 第21-22页 |
| · 研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 Anticalin 库的构建与质量鉴定 | 第23-53页 |
| · 引言 | 第23页 |
| · 材料与方法 | 第23-41页 |
| · 材料 | 第23-25页 |
| · 方法 | 第25-41页 |
| · 结果与分析 | 第41-50页 |
| 2.3.1 bbp 基因库的分段合成 | 第41-44页 |
| 2.3.2 Anticalin 模拟抗体库的合成 | 第44-46页 |
| 2.3.3 bbp 基因库序列正确性的鉴定 | 第46-47页 |
| 2.3.4 bbp 基因库测序结果 | 第47-49页 |
| 2.3.5 Anticalin 模拟抗体库容量 | 第49页 |
| 2.3.6 Anticalin 转录活性的鉴定 | 第49页 |
| 2.3.7 Anticalin 反转录活性的鉴定 | 第49-50页 |
| · 讨论 | 第50-53页 |
| 2.4.1 Lipocalin 随机突变位点的引入 | 第50-51页 |
| · 核糖体展示元件的的连接 | 第51页 |
| 2.4.3 Anticalin 文库的质量鉴定 | 第51-53页 |
| 第三章 雌二醇全抗原的合成与模拟抗体的筛选 | 第53-76页 |
| · 引言 | 第53页 |
| · 实验材料与方法 | 第53-64页 |
| · 实验材料 | 第53-55页 |
| · 方法 | 第55-64页 |
| · 结果与分析 | 第64-74页 |
| · 雌二醇半抗原和完全抗原的鉴定 | 第64-69页 |
| · 雌二醇模拟抗体的体外筛选 | 第69-74页 |
| · 讨论 | 第74-76页 |
| · 雌二醇完全抗原的合成 | 第74页 |
| · 雌二醇模拟抗体的固相筛选 | 第74-76页 |
| 第四章 雌二醇模拟抗体的性质鉴定 | 第76-96页 |
| · 引言 | 第76页 |
| · 材料与方法 | 第76-85页 |
| · 材料 | 第76-79页 |
| · 方法 | 第79-85页 |
| · 结果与分析 | 第85-93页 |
| 4.3.1 pTIG-TRX-bbp 阳性克隆子验证 | 第85-86页 |
| 4.3.2 pTIG-TRX-bbp 的诱导表达 | 第86页 |
| · 雌二醇模拟抗体的纯化 | 第86-87页 |
| 4.3.4 雌二醇模拟抗体的 Western Blot 检测 | 第87页 |
| · 雌二醇模拟抗体结合活性的检测 | 第87-88页 |
| · 雌二醇模拟抗体竞争活性的检测 | 第88-89页 |
| · 雌二醇模拟抗体特异性检测 | 第89-90页 |
| · 雌二醇模拟抗体的序列比对 | 第90-91页 |
| 4.3.9 非还原 SDS-PAGE 分析模拟抗体 E_2-A 的折叠情况 | 第91-92页 |
| 4.3.10 SPR 分析模拟抗体 E_2-A 的亲和力 | 第92-93页 |
| · 讨论 | 第93-96页 |
| · 模拟抗体的表达 | 第93-94页 |
| · 模拟抗体的纯化 | 第94页 |
| · 模拟抗体的活性鉴定 | 第94-96页 |
| 第五章 百草枯完全抗原的合成与模拟抗体的筛选 | 第96-114页 |
| · 引言 | 第96页 |
| · 实验材料与方法 | 第96-103页 |
| · 实验材料 | 第96-97页 |
| · 方法 | 第97-103页 |
| · 结果与分析 | 第103-112页 |
| · 百草枯半抗原和完全抗原的鉴定 | 第103-108页 |
| · 百草枯模拟抗体的体外筛选 | 第108-112页 |
| · 讨论 | 第112-114页 |
| · 百草枯完全抗原的合成 | 第112页 |
| · 百草枯模拟抗体的固相筛选 | 第112-114页 |
| 第六章 百草枯模拟抗体的性质鉴定 | 第114-123页 |
| · 引言 | 第114页 |
| · 材料与方法 | 第114-117页 |
| · 材料 | 第114-115页 |
| · 方法 | 第115-117页 |
| · 结果与分析 | 第117-122页 |
| 6.3.1 pTIG-TRX-bbp 阳性克隆子验证 | 第117-118页 |
| 6.3.2 pTIG-TRX-bbp 的诱导表达 | 第118-119页 |
| · 百草枯模拟抗体的纯化 | 第119页 |
| 6.3.4 百草枯模拟抗体的 Western Blot 检测 | 第119-120页 |
| · 百草枯模拟抗体结合活性的检测 | 第120-121页 |
| · 百草枯模拟抗体竞争活性的检测 | 第121页 |
| 6.3.7 SPR 分析模拟抗体 PQ-1 的亲和力 | 第121-122页 |
| · 讨论 | 第122-123页 |
| 结论 | 第123-124页 |
| 展望 | 第124-125页 |
| 参考文献 | 第125-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 附录 | 第131-132页 |
| 英文缩略 | 第132-133页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第133
页 |
