论文目录 | |
| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 上篇 文献综述 | 第14-95页 |
| 第一章 枯草芽孢杆菌的快速鉴定及定量分析 | 第15-24页 |
| 摘要 | 第15页 |
| ABSTRACT | 第15-16页 |
| 1. 基于16S rRNA/DNA的枯草芽孢杆菌分子鉴定及定量分析 | 第16-17页 |
| · 基因组DNA的获得 | 第16页 |
| · 16SrRNA基因片段的获得 | 第16页 |
| 1.3 通过16S rRNA基因片段分析对微生物进行分类鉴定 | 第16-17页 |
| 2. MALDI-TOF-MS在细菌检测和鉴定中的应用 | 第17-20页 |
| · MALDI-TOF-MS的基本原理 | 第17-18页 |
| · 分析的主要成分 | 第18-20页 |
| 参考文献 | 第20-24页 |
| 第二章 枯草芽孢杆菌遗传操作系统研究进展 | 第24-47页 |
| 摘要 | 第24页 |
| ABSTRACT | 第24-25页 |
| 1. 芽孢杆菌整合载体研究进展 | 第25-30页 |
| · 同源序列重组整合 | 第25-26页 |
| · 非常规重组整合 | 第26-27页 |
| · 枯草芽孢杆菌整合载体的整合方式 | 第27-29页 |
| · 芽孢杆菌整合载体的应用及前景 | 第29-30页 |
| 2. 枯草芽孢杆菌表达系统研究进展 | 第30-36页 |
| · 启动子的结构及调控方式 | 第30-33页 |
| · 枯草芽孢杆菌中的σ因子 | 第33-36页 |
| 3. 枯草芽孢杆菌感受态研究新进展 | 第36-42页 |
| · 枯草芽孢杆菌自然转化的过程 | 第36-37页 |
| · 枯草芽孢杆菌感受态的形成机制 | 第37-39页 |
| · 晚期感受态蛋白的种类和功能 | 第39-41页 |
| · 感受态信息素调节的意义 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 第三章 生物活性非核糖体环肽合成机制的研究进展 | 第47-95页 |
| 摘要 | 第47页 |
| ABSTRACT | 第47-48页 |
| 1. 非核糖体大环肽类抗生素的结构特点 | 第48-49页 |
| 2. 非核糖体大环肽类抗生素的多样性 | 第49-50页 |
| 3. 非核糖体大环肽抗生素的生物活性 | 第50-53页 |
| · 抗细菌作用 | 第52页 |
| · 抗病毒的作用 | 第52-53页 |
| 4. 非核糖体肽合成酶的作用机理 | 第53-62页 |
| · 模块的主要结构域 | 第54-58页 |
| · 非核糖体合成肽的校正 | 第58-59页 |
| · 非核糖体肽的脂质化机理 | 第59-60页 |
| · 非核糖体肽中D-氨基酸的生成 | 第60-62页 |
| 5. 非核糖体合成酶硫脂结构域 | 第62-71页 |
| · 肽链环化酶的结构以及催化机理 | 第63-64页 |
| · 离体的TE结构域催化环化反应的研究 | 第64-65页 |
| · TE结构域的酶学特征 | 第65-68页 |
| · 结合TE结构域的化学酶法途径合成新的环肽 | 第68-71页 |
| 6. 载体蛋白翻译后的修饰以及应用 | 第71-74页 |
| 7. “裁剪酶”介导的非核糖体肽的结构和功能多样性 | 第74-78页 |
| · 非核糖体肽的甲基化 | 第74-76页 |
| · “裁剪酶”向NRPS中引入杂环元素 | 第76页 |
| · “裁剪酶”催化氧化交联形成刚性肽链骨架 | 第76-77页 |
| · “裁剪酶”催化NRPS卤化 | 第77-78页 |
| 8. 真核生物中的NRPS合成酶家族 | 第78-79页 |
| 9. 基因工程技术重组NRPS生产线 | 第79-83页 |
| · 结构域或模块重组构建基因NRPSs菌株 | 第79-82页 |
| · 定点突变策略构建基因NRPSs菌株 | 第82页 |
| 9.3 “突变合成”(mutasynthesis approach)构建基因工程NRPSs菌株 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 下篇 研究内容 | 第95-186页 |
| 第一章 应用16S rDNA序列分析法和MALDI-TOF-MS技术快速准确鉴定枯草芽孢杆菌 | 第96-116页 |
| 摘要 | 第96页 |
| ABSTRACT | 第96-98页 |
| 1. 材料和方法 | 第98-102页 |
| 2. 结果与分析 | 第102-110页 |
| 2.1 不同菌株16S rDNA的克隆和测序 | 第102-103页 |
| 2.2 不同菌株的16S rDNA序列分析 | 第103页 |
| · 菌株B3、38、43、49、55、85的系统发育分析 | 第103-104页 |
| · 枯草芽孢杆菌标准菌株在m/z为200～2000范围的信号谱带分析 | 第104页 |
| · 供试菌株在m/z为200～2000范围的信号谱带分析 | 第104-106页 |
| · B3菌株在不同培养基产生的谱带 | 第106-107页 |
| · 菌株的抑菌活性检测 | 第107-108页 |
| · 菌株产生的脂肽化合物的MALDI-TOF-MS分析 | 第108-110页 |
| 3. 小结 | 第110-112页 |
| 讨论 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-116页 |
| 第二章 枯草芽孢杆菌脂肽合成调控区ycxD和aspB3基因编码产物转氨酶活性的研究 | 第116-152页 |
| 摘要 | 第116页 |
| ABSTRACT | 第116-119页 |
| 1. 材料和方法 | 第119-127页 |
| 2. 结果与分析 | 第127-145页 |
| · ycxD与asp基因大肠杆菌表达载体的构建 | 第127-128页 |
| · AspB3蛋白突变体的表达载体的构建 | 第128-130页 |
| · 重组YCXD、AspB3蛋白以及AspB3蛋白突变体的纯化 | 第130-132页 |
| · AspB3和YcxD蛋白转氨酶活性的检测 | 第132-135页 |
| · AspB3转氨酶基本酶学性质的研究 | 第135-139页 |
| · AspB3蛋白系统发育分析 | 第139-141页 |
| · AspB3蛋白序列比对以及活性位点的分析 | 第141-143页 |
| · AspB3突变体酶活性的检测 | 第143页 |
| · AspB3蛋白空间结构的预测 | 第143-145页 |
| 3. 小结 | 第145-146页 |
| 讨论 | 第146-148页 |
| 参考文献 | 第148-152页 |
| 第三章 枯草芽孢杆菌高效分泌表达HpaG_(Xooc)蛋白体系的建立以及重组蛋白生物活性的检测 | 第152-186页 |
| 摘要 | 第152页 |
| ABSTRACT | 第152-154页 |
| 第一节 HpaG_(Xooc)蛋白在枯草芽孢杆菌中的分泌表达体系的建立 | 第154-163页 |
| 1. 材料与方法 | 第154-158页 |
| 2. 结果与分析 | 第158-163页 |
| 3. 小结 | 第163页 |
| 第二节 枯草芽孢杆菌基因工程菌表达HpaG_(Xooc)分析 | 第163-176页 |
| 1. 材料和方法 | 第163-168页 |
| 2. 结果与分析 | 第168-176页 |
| 3. 小结 | 第176页 |
| 第三节 枯草芽孢杆菌表达的重组蛋白生物活性的分析 | 第176-180页 |
| 1. 材料和方法 | 第176-177页 |
| 2. 结果与分析 | 第177-180页 |
| 3. 小结 | 第180页 |
| 讨论 | 第180-182页 |
| 参考文献 | 第182-186页 |
| 附录 | 第186-190页 |
| 致谢 | 第190-191页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第191
页 |
