论文目录 | |
| 缩略语表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-14页 |
| Abstract | 第14-21页 |
| 前言 | 第22-24页 |
| 文献回顾 | 第24-35页 |
| 第一部分 CSMD3与肺腺癌发生发展的机制研究 | 第35-58页 |
| 0 引言 | 第35页 |
| 1 材料 | 第35-39页 |
| 2 方法 | 第39-42页 |
| 2.1 细胞培养 | 第39页 |
| 2.2 荧光定量PCR | 第39-40页 |
| 2.3 免疫组化 | 第40页 |
| 2.4 TCGA数据库分析CSMD3表达量与肺腺癌患者生存期之间的关系 | 第40页 |
| 2.5 慢病毒载体敲减CSMD3表达的A549细胞系构建 | 第40-41页 |
| 2.6 CCK-8实验步骤 | 第41页 |
| 2.7 细胞划痕实验 | 第41页 |
| 2.8 细胞侵袭实验 | 第41页 |
| 2.9 人基因表达谱芯片检测CSMD3人工敲减后的差异基因 | 第41页 |
| 2.10 CSMD3人工敲减后差异基因表达量Real-timePCR验证 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-55页 |
| 3.1 CSMD3在20例肺腺癌患者癌旁-癌组织中转录水平表达差异 | 第42-43页 |
| 3.2 CSMD3在20例肺腺癌患者癌旁-癌组织中蛋白表达水平差异 | 第43页 |
| 3.3 CSMD3表达量与肺腺癌患者生存期相关性不显著 | 第43-44页 |
| 3.4 CSMD3敲减慢病毒感染A549细胞构建成功 | 第44-46页 |
| 3.5 CSMD3敲减显著提高肺腺癌A549细胞的增殖能力 | 第46页 |
| 3.6 CSMD3敲减显著提高肺腺癌A549细胞的迁移能力 | 第46-47页 |
| 3.7 CSMD3敲减显著提高了肺腺癌A549细胞的侵袭能力 | 第47-48页 |
| 3.8 CSMD3敲减条件下肺腺癌A549细胞差异基因研究 | 第48-53页 |
| 3.9 对CSMD3敲减对A549细胞差异表达基因的验证结果 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 第二部分 CSMD3通过TCTP促进上皮间质转化从而影响肺腺癌的迁移与侵袭能力 | 第58-75页 |
| 0 引言 | 第58页 |
| 1 材料 | 第58-59页 |
| 1.1 主要仪器和实验设备 | 第58-59页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第59页 |
| 1.3 组织样本收集 | 第59页 |
| 2 方法 | 第59-61页 |
| 2.1 细胞培养 | 第59页 |
| 2.2 TCGA数据库分析TCTP表达量与肺腺癌患者生存期之间的关系 | 第59-60页 |
| 2.3 TCTP敲低及过表达慢病毒载体的构建 | 第60页 |
| 2.4 WesternBlot检测TCTP以及EMT相关蛋白表达情况 | 第60页 |
| 2.5 划痕试验 | 第60页 |
| 2.6 细胞侵袭实验(侵袭小室检测)步骤 | 第60页 |
| 2.7 免疫荧光检测TCTP等目的蛋白表达情况 | 第60-61页 |
| 2.8 Real-timePCR检测miR200 家族miRNA表达量变化 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-73页 |
| 3.1 TCTP在肺腺癌组织中表达量上调 | 第61-62页 |
| 3.2 TCTP表达量与生存期相关性显著 | 第62-63页 |
| 3.3 TCTP敲减对A549细胞EMT(上皮间质转化)和迁移能力的影响 | 第63-67页 |
| 3.4 TCTP过表达显著提高A549细胞EMT过程 | 第67-72页 |
| 3.5 TCTP与miR-200s表达水平相关性显著 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 第三部分 CSMD3通过PLOD2影响A549肺腺癌细胞系的侵袭与增殖能力 | 第75-92页 |
| 0 引言 | 第75页 |
| 1 材料 | 第75-77页 |
| 1.1 主要仪器和实验设备 | 第75-76页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第76-77页 |
| 1.3 组织样本收集 | 第77页 |
| 2 方法 | 第77-78页 |
| 2.1 细胞培养 | 第77页 |
| 2.2 TCGA数据库分析PLOD2表达量与肺腺癌患者生存期之间的关系 | 第77页 |
| 2.3 免疫组化实验 | 第77页 |
| 2.4 PLOD2敲减RNAi慢病毒载体构建 | 第77页 |
| 2.5 CCK-8实验 | 第77页 |
| 2.6 细胞划痕实验 | 第77页 |
| 2.7 细胞侵袭实验 | 第77-78页 |
| 3 结果 | 第78-88页 |
| 3.1 PLOD2在20 例肺腺癌患者癌旁-癌组织中蛋白表达水平显著上调 | 第78页 |
| 3.2 PLOD2高表达与肺腺癌患者生存缩短相关性显著 | 第78-79页 |
| 3.3 PLOD2RNAi慢病毒载体构建成功 | 第79-82页 |
| 3.4 PLOD2RNAi慢病毒载体包装滴度检测结果 | 第82-83页 |
| 3.5 RealTimePCR筛选出有效PLOD2RNAi载体 | 第83-85页 |
| 3.6 敲减PLOD2显著抑制A549细胞增殖能力 | 第85-86页 |
| 3.7 敲减PLOD2显著提高A549细胞迁移的能力 | 第81-87页 |
| 3.8 敲减PLOD2显著抑制A549细胞的侵袭能力 | 第87-88页 |
| 4 讨论 | 第88-92页 |
| 小结 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-115页 |
| 个人简历和研究成果 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
