论文目录 | |
提 要 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-12页 |
Abstract | 第12-18页 |
英文词表 | 第18-23页 |
第1章 文献回顾 | 第23-39页 |
1.1 MBP 作为免疫增强剂的研究 | 第23-24页 |
1.2 卡介苗(BCG)研究现状 | 第24-26页 |
1.3 Toll 样受体家族研究现状 | 第26-35页 |
1.3.1 TLR 在细胞中的分布 | 第26-27页 |
1.3.2 TLRs 识别的配体 | 第27页 |
1.3.3 TLRs 的信号转导 | 第27-33页 |
1.3.4 TLRs 之间的相互作用对免疫系统功能的调节 | 第33-35页 |
1.4 本课题设计思路及主要研究内容 | 第35-39页 |
1.4.1 本课题的设计思路 | 第35页 |
1.4.2 本课题研究的具体内容 | 第35-37页 |
1.4.3 本课题的特色 | 第37-39页 |
第2章 MBP 联合 BCG 对小鼠淋巴细胞的作用 | 第39-59页 |
2.1 实验材料 | 第39-41页 |
2.1.1 实验动物 | 第39页 |
2.1.2 实验试剂 | 第39页 |
2.1.3 主要试剂的配制 | 第39-41页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第41页 |
2.2 主要实验方法 | 第41-46页 |
2.2.1 MBP 的分离纯化 | 第41-42页 |
2.2.2 小鼠脾脏单个核细胞的分离与培养 | 第42页 |
2.2.3 实验体系建立 | 第42-43页 |
2.2.4 CFSE 实验检测淋巴细胞增殖 | 第43页 |
2.2.5 流式细胞术检测淋巴细胞亚群 | 第43-44页 |
2.2.6 ELISA 实验检测细胞培养上清中 IFN-γ和 IL-4 的分泌 | 第44-45页 |
2.2.7 流式细胞术检测细胞因子释放 | 第45页 |
2.2.8 流式细胞术检测 CD4~+T,CD8~+T 细胞上 TLR2/TLR4 的表达 | 第45-46页 |
2.2.9 统计学处理 | 第46页 |
2.3 实验结果 | 第46-56页 |
2.3.1 MBP 联合 BCG 协同促进脾脏淋巴细胞增殖 | 第46-49页 |
2.3.2 MBP 联合 BCG 协同增加 CD4~+T 细胞亚群的比例 | 第49-50页 |
2.3.3 MBP 联合 BCG 协同诱导小鼠脾脏淋巴细胞分泌 IFN-γ28 | 第50-52页 |
2.3.4 MBP 联合 BCG 协同诱导 CD4~+T 淋巴细胞胞发生 Th1 极化 | 第52-54页 |
2.3.5 MBP 联合 BCG 增加 TLR2 以及 TLR4 在 CD4~+T 细胞上的表达 | 第54-56页 |
2.4 讨论 | 第56-57页 |
2.5 小结 | 第57-59页 |
第3章 MBP 联合 BCG 诱导 Th1 活化的机制研究 | 第59-99页 |
3.1 实验材料 | 第59-62页 |
3.1.1 实验动物 | 第59页 |
3.1.2 实验试剂 | 第59-60页 |
3.1.3 主要试剂的配制 | 第60-61页 |
3.1.4 主要实验仪器 | 第61-62页 |
3.2 主要实验方法 | 第62-67页 |
3.2.1 CD4~+T 细胞的纯化 | 第62页 |
3.2.2 CD4~+ T 细胞的活化 | 第62页 |
3.2.3 WST1 实验检测 CD4~+ T 细胞增殖 | 第62-63页 |
3.2.4 ELISA 实验检测 IFN-γ和 IL-4 分泌 | 第63页 |
3.2.5 qRT-PCR 检测 IFN-γ和 IL-4 mRNA 表达 | 第63-64页 |
3.2.6 qRT-PCR 检测 TLRs 信号通路相关分子 mRNA 表达 | 第64-65页 |
3.2.7 Western blot 检测 TLRs 信号通路相关分子蛋白表达 | 第65-66页 |
3.2.8 ELISA 实验检测 TLR2、TLR4、TLR9 封闭后 IFN-γ和IL-4 分泌 | 第66页 |
3.2.9 qRT-PCR 检测 TLR2、TLR4、TLR9 封闭后 IFN-γ和 IL-4 mRNA 表达 | 第66页 |
3.2.10 Western blot 检测 TLR2、TLR4、TLR9 封闭后 TLRs 信号 通路相关分子蛋白表达 | 第66页 |
3.2.11 qRT-PCR 检测 TLR2 封闭后 TLR4、TLR9 mRNA 表达.44 | 第66页 |
3.2.12 qRT-PCR 检测 TLR4 封闭后 TLR2、TLR9 mRNA 表达 | 第66-67页 |
3.2.13 qRT-PCR 检测 TLR9 封闭后 TLR2、TLR4 mRNA 表达 | 第67页 |
3.2.14 qRT-PCR 检测 Pam3CSK4,LPS,CPG-ODN 对 IFN-γ, TLR2、TLR4、TLR9 mRNA 表达 | 第67页 |
3.2.15 统计学处理 | 第67页 |
3.3 实验结果 | 第67-91页 |
3.3.1 CD4~+T 细胞的纯化与活化 | 第67-69页 |
3.3.2 MBP 联合 BCG 协同促进 CD4~+T 细胞增殖 | 第69-70页 |
3.3.3 MBP 联合 BCG 协同诱导 Th1 活化 | 第70-73页 |
3.3.4 MBP 联合 BCG 协同上调 TLR2、TLR4、TLR9 的表达 | 第73-74页 |
3.3.5 MBP 联合 BCG 协同活化 TLR2、TLR4 及 TLR9 介导的MyD88 依赖途径和 TRIF 依赖途径 | 第74-76页 |
3.3.6 TLR2 介导的 MyD88 依赖途径部分促进 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化 | 第76-79页 |
3.3.7 TLR4 介导的 TRIF 依赖途径通过上调 TRAF6,下调TRAF3 表达部分促进 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化57 | 第79-82页 |
3.3.8 TLR9 通过促进 MyD88 依赖途径及 TRIF/TRAF6 途径,抑制 TRIF/ TRAF3 途径显著促进 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 60活化 | 第82-85页 |
3.3.9 TLR2/TLR4/TLR9 在 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化中的相互作用 | 第85-88页 |
3.3.10 TLR2、TLR4、TLR9 信号传导在 TLR2、TLR4、TLR9激动剂诱导的 Th1 活化中的 crosstalk | 第88-91页 |
3.4 讨论 | 第91-96页 |
3.4.1 TLR2/TLR4/TLR9 促进 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化 | 第91-94页 |
3.4.2 TRAF6 和 TRAF3 在 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化中的作用 | 第94-95页 |
3.4.3 TLR2/TLR4/TLR9 在 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化中的cross-talk | 第95-96页 |
3.5 小结 | 第96-99页 |
第4章 结论 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-111页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第111-113页 |
致谢 | 第113页 |