论文目录 | |
中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
缩略语/符号说明 | 第13-15页 |
前言 | 第15-21页 |
研究现状、成果 | 第15-19页 |
研究目的、方法 | 第19-21页 |
一、脊髓运动神经元和星形胶质细胞的分离、培养和鉴定 | 第21-66页 |
1.1 对象和方法 | 第21-51页 |
1.1.1 实验材料和器械 | 第21-40页 |
1.1.1.2 脊髓运动神经元的分离、培养和纯化 | 第26页 |
1.1.1.3 脊髓运动神经元的鉴定 | 第26-27页 |
1.1.1.4 脊髓运动神经元体外基因转染 | 第27-29页 |
1.1.1.5 细胞迁移实验 | 第29-30页 |
1.1.1.6 细胞黏附实验 | 第30页 |
1.1.1.7 免疫焚光染色 | 第30-31页 |
1.1.1.8 Dil轴突染色 | 第31-32页 |
1.1.1.9 免疫印迹实验(Western-blot) | 第32-34页 |
1.1.1.10 荧光实时定量PCR(Real-time PCR) | 第34-39页 |
1.1.1.11 细胞电生理检测(Patch-clamp) | 第39页 |
1.1.1.12 统计分析 | 第39-40页 |
1.1.2 结果 | 第40-51页 |
1.1.2.1 形态学结果 | 第40页 |
1.1.2.2 鉴定结果 | 第40-41页 |
1.1.2.3 体外基因传递 | 第41页 |
1.1.2.4 细胞迁移实验 | 第41页 |
1.1.2.5 细胞黏附实验 | 第41-42页 |
1.1.2.6 免疫荧光染色 | 第42-43页 |
1.1.2.7 轴突染色(DiI) | 第43-45页 |
1.1.2.8 TO-PR03染色 | 第45页 |
1.1.2.9 免疫印迹实验(Western-blot) | 第45-47页 |
1.1.2.10 荧光实时定量PCR(Real-time PCR) | 第47-48页 |
1.1.2.11 细胞电生理检测(Patch-clamp) | 第48-51页 |
1.2 星形胶质细胞的分离、培养和鉴定 | 第51-59页 |
1.2.1 对象和方法 | 第51-54页 |
1.2.1.1 星形胶质细胞的的分离、培养和纯化 | 第51-52页 |
1.2.1.2 星形胶质细胞的鉴定 | 第52页 |
1.2.1.3 体外基因转染 | 第52页 |
1.2.1.4 细胞迁移实验 | 第52页 |
1.2.1.5 细胞黏附实验 | 第52页 |
1.2.1.6 免疫荧光染色 | 第52-53页 |
1.2.1.7 免疫印迹实验(Western-blot) | 第53页 |
1.2.1.8 荧光实时定量PCR(Real-time PCR) | 第53-54页 |
1.2.1.9 细胞电生理检测(patch-clamp) | 第54页 |
1.2.2 结果 | 第54-59页 |
1.2.2.1 形态学及鉴定结果 | 第54页 |
1.2.2.2 体外基因传递 | 第54页 |
1.2.2.3 细胞迁移实验 | 第54页 |
1.2.2.4 细胞黏附实验 | 第54-55页 |
1.2.2.5 免疫荧光染色 | 第55-56页 |
1.2.2.6 免疫印迹实验(Western-blot) | 第56-57页 |
1.2.2.7 荧光实时定量PCR(Real-time PCR) | 第57-58页 |
1.2.2.8 细胞电生理检测(Patch-clamp) | 第58-59页 |
1.3 讨论 | 第59-65页 |
1.3.1 脊髓运动神经元的功能和特性 | 第59-61页 |
1.3.2 星形胶质细胞的功能和特性 | 第61-63页 |
1.3.3 体外基因传递方法和作用 | 第63-65页 |
1.4 小结 | 第65-66页 |
二、脊髓运动神经元和星形胶质细胞的相互作用 | 第66-79页 |
2.1 对象和方法 | 第66-67页 |
2.1.1 星形胶质细胞的分离、培养和纯化 | 第66-67页 |
2.1.2 体外基因转染 | 第67页 |
2.1.3 免疫荧光染色 | 第67页 |
2.1.4 免疫印迹试验(Western-blot) | 第67页 |
2.1.5 RT-PCR实验 | 第67页 |
2.2 结果 | 第67-74页 |
2.2.1 形态学结果 | 第67页 |
2.2.2 免疫荧光染色 | 第67-69页 |
2.2.3 免疫印迹试验(Western-blot) | 第69-73页 |
2.2.4 Real-time PCR检测结果(RT-PCR) | 第73-74页 |
2.3 讨论 | 第74-77页 |
2.3.1 脊髓运动神经元和星形胶质细胞之间的相互作用 | 第74-75页 |
2.3.2 脊髓运动神经元和星形胶质细胞之间的代谢藕联 | 第75-77页 |
2.4 小结 | 第77-79页 |
三、抑制Raf/Erk/MERK信号通路水平对脊髓损伤修复的作用 | 第79-100页 |
3.1 对象和方法 | 第79-83页 |
3.1.1 实验材料和器械 | 第79页 |
3.1.2 实验分组 | 第79页 |
3.1.3 脊髓损伤动物模型制作 | 第79-80页 |
3.1.4 运动功能评分及行为学测试 | 第80页 |
3.1.5 脊髓标本取材 | 第80页 |
3.1.6 BDA顺行示踪 | 第80-81页 |
3.1.7 脊髓冰冻切片的制备 | 第81页 |
3.1.8 免疫组化染色 | 第81-82页 |
3.1.9 神经树突染色(Dlf Labeling) | 第82页 |
3.1.10 免疫印迹实验(Westem-blot) | 第82页 |
3.1.11 脊髓电生理检查(patch-clamp) | 第82-83页 |
3.1.12 数据及图像统计分析 | 第83页 |
3.2 结果 | 第83-94页 |
3.2.1 BMS评分及行为学结果 | 第84-86页 |
3.2.2 免疫荧光染色结果 | 第86-92页 |
3.2.3 Western-blot 结果 | 第92-93页 |
3.2.4 BDA顺行示踪 | 第93页 |
3.2.5 脊髓切片场电位记录 | 第93-94页 |
3.3 讨论 | 第94-99页 |
3.3.1 脊髓损伤后微环境的改变 | 第94-95页 |
3.3.2 Raf/Erk/Merk信号通路在脊髓损伤中作用机制 | 第95-99页 |
3.4 小结 | 第99-100页 |
全文结论 | 第100-101页 |
论文创新点 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-116页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第116-117页 |
附录 | 第117-135页 |
综述 脊髓损伤治疗研究进展 | 第135-159页 |
参考文献 | 第145-159页 |
致谢 | 第159页 |