论文目录 | |
摘要 | 第1-14页 |
ABSTRACT | 第14-19页 |
第一章 文献综述 | 第20-36页 |
1 带鱼研究概况 | 第20-22页 |
1.1 带鱼的资源和分布 | 第20页 |
1.2 带鱼的营养价值与保藏 | 第20-22页 |
1.3 带鱼产品的开发现状 | 第22页 |
2 高血压分类与致病因素 | 第22-27页 |
2.1 高血压在病因学上的分类 | 第23页 |
2.2 高血压的致病因素 | 第23-27页 |
3 降血压肽(ACE抑制肽)研究概况 | 第27-34页 |
3.1 生物活性肽概述 | 第27页 |
3.2 降血压肽 | 第27-28页 |
3.3 降血压肽的制备 | 第28-29页 |
3.4 降血压肽的纯化 | 第29-31页 |
3.5 降血压肽体外活性的测定 | 第31-33页 |
3.6 降血压肽体内活性的测定 | 第33页 |
3.7 降血压肽体内活性与体外活性的关系 | 第33-34页 |
4 本论文的立题依据与研究内容 | 第34-36页 |
4.1 立题依据 | 第34页 |
4.2 研究内容 | 第34-36页 |
第二章 带鱼鱼肉肌球蛋白肽的制备 | 第36-54页 |
1.引言 | 第36页 |
2 材料与仪器设备 | 第36-37页 |
2.1 材料与试剂 | 第36-37页 |
2.2 主要仪器 | 第37页 |
3 试验方法 | 第37-41页 |
3.1 带鱼鱼肉肌球蛋白的提取 | 第37-38页 |
3.2 蛋白酶的筛选 | 第38页 |
3.3 ACE抑制活性的筛选 | 第38-40页 |
3.4 单因素实验 | 第40页 |
3.5 正交实验 | 第40页 |
3.6 试验的验证 | 第40-41页 |
3.7 粗肽液的制备 | 第41页 |
3.8 数据处理与统计 | 第41页 |
4 结果与分析 | 第41-53页 |
4.1 不同蛋白酶对带鱼肌球蛋白肽ACE抑制活性的影响 | 第41-42页 |
4.2 不同ACE抑制活性测定方法对比 | 第42-43页 |
4.3 单因素对带鱼鱼肉肌球蛋白肽ACE抑制活性的影响 | 第43-46页 |
4.4 带鱼鱼肉肌球蛋白肽的制备工艺优化 | 第46-47页 |
4.5 响应面试验结果与方差分析 | 第47-52页 |
4.6 酶解液的超滤分析 | 第52-53页 |
5 本章小结 | 第53-54页 |
第三章 带鱼鱼肉肌球蛋白肽降血压作用的研究 | 第54-79页 |
1 引言 | 第54页 |
2 材料与仪器设备 | 第54-56页 |
2.1 材料与试剂 | 第54-55页 |
2.2 主要仪器 | 第55-56页 |
3 试验方法 | 第56-60页 |
3.1 带鱼鱼肉肌球蛋白肽的制备 | 第56页 |
3.2 SHRs和 WRs的预处理及分组 | 第56-57页 |
3.3 大鼠血压和心率的测定 | 第57页 |
3.4 大鼠血浆和脏器的收集 | 第57页 |
3.5 血浆生物标志物分析 | 第57页 |
3.6 免疫印迹(Western blotting) | 第57-58页 |
3.7 免疫荧光 | 第58-59页 |
3.8 血管张力的测定 | 第59-60页 |
3.9 苏木精—伊红(HE)染色 | 第60页 |
3.10 数据分析 | 第60页 |
4 结果与分析 | 第60-77页 |
4.1 SHRs和 WRs给药后24 h内收缩压变化情况 | 第60-62页 |
4.2 SHRs和 WRs长期给药收缩压变化情况 | 第62-64页 |
4.3 长期给药过程中SHRs和 WRs心率的变化 | 第64-65页 |
4.4 大鼠血浆中部分指标分析 | 第65-68页 |
4.5 带鱼鱼肉肌球蛋白肽对RAS系统的影响 | 第68-69页 |
4.6 带鱼鱼肉肌球蛋白肽对氧化应激的影响 | 第69-71页 |
4.7 带鱼鱼肉肌球蛋白肽对炎症反应的影响 | 第71-72页 |
4.8 带鱼鱼肉肌球蛋白肽对组织纤维化的影响 | 第72-73页 |
4.9 带鱼鱼肉肌球蛋白肽对血管内皮功能的影响 | 第73-75页 |
4.10 带鱼肌球蛋白肽对血管张力的影响 | 第75-76页 |
4.11 带鱼鱼肉肌球蛋白肽的毒性分析 | 第76-77页 |
5 本章小结 | 第77-79页 |
第四章 带鱼鱼肉肌球蛋白肽的纯化和氨基酸序列分析 | 第79-94页 |
1 引言 | 第79页 |
2 材料与仪器设备 | 第79-80页 |
2.1 材料与试剂 | 第79-80页 |
2.2 主要仪器 | 第80页 |
3 试验方法 | 第80-83页 |
3.1 带鱼鱼肉肌球蛋白肽的制备 | 第80页 |
3.2 首次RP-HPLC柱层析纯化 | 第80-81页 |
3.3 二次RP-HPLC柱层析纯化 | 第81页 |
3.4 三次RP-HPLC柱层析纯化 | 第81页 |
3.5 氨基酸序列的分析 | 第81-83页 |
3.6 氨基酸序列的验证 | 第83页 |
3.7 数据分析 | 第83页 |
4 结果与分析 | 第83-93页 |
4.1 首次柱层析纯化色谱分析 | 第83-84页 |
4.2 二次柱层析纯化色谱分析 | 第84-86页 |
4.3 三次柱层析纯化色谱分析 | 第86-88页 |
4.4 带鱼鱼肉肌球蛋白肽氨基酸序列分析 | 第88-91页 |
4.5 带鱼鱼肉肌球蛋白肽氨基酸序列的验证 | 第91-93页 |
5 本章小结 | 第93-94页 |
第五章 带鱼鱼肉肌球蛋白肽降血压作用的分子机理研究 | 第94-130页 |
1 引言 | 第94页 |
2 材料与仪器设备 | 第94-96页 |
2.1 材料与试剂 | 第94-96页 |
2.2 主要仪器 | 第96页 |
3 试验方法 | 第96-103页 |
3.1 A肽和E肽的合成 | 第96-97页 |
3.2 SHRs和 WRs的预处理及分组 | 第97页 |
3.3 SHRs收缩压的测定 | 第97页 |
3.4 A肽和E肽与ACE的分子对接模型设计 | 第97-98页 |
3.5 A肽和E肽的SPR试验设计 | 第98页 |
3.6 SHRs原代内皮细胞的培养 | 第98-99页 |
3.7 细胞MTT检测 | 第99页 |
3.8 ELISA和生化指标检测 | 第99页 |
3.9 Western blotting | 第99-100页 |
3.10 流氏细胞检测 | 第100页 |
3.11 荧光定量PCR(q PCR) | 第100-101页 |
3.12 免疫荧光检测 | 第101-102页 |
3.13 大鼠离体血管张力测定 | 第102-103页 |
3.14 数据分析 | 第103页 |
4 结果与分析 | 第103-129页 |
4.1 合成A肽和E肽的色谱和质谱分析 | 第103-105页 |
4.2 A肽与E肽对大鼠血压的影响 | 第105-106页 |
4.3 A肽与E肽和大鼠ACE分子对接模型分析 | 第106-110页 |
4.4 A肽与E肽和大鼠ACE分子结合强度的验证 | 第110-114页 |
4.5 SHRs肺毛细血管原代内皮细胞给药浓度的确定 | 第114-115页 |
4.6 A肽和E肽对SHRs肺部毛细血管内皮细胞RAS通路的影响 | 第115-116页 |
4.7 A肽和E肽对SHRs肺部毛细血管原代内皮细胞氧化应激的影响 | 第116-121页 |
4.8 A肽和E肽对SHRs肺部毛细血管原代内皮细胞炎症反应的影响 | 第121-123页 |
4.9 A肽和E肽对SHRs内皮细胞功能的影响 | 第123-126页 |
4.10 A肽和E肽对血管舒张作用的影响 | 第126-128页 |
4.11 RAS系统、氧化应激、炎症反应以及内皮功能关系的分析 | 第128-129页 |
5 本章小结 | 第129-130页 |
第六章 结论与展望 | 第130-133页 |
1 结论 | 第130-131页 |
2 本论文主要创新点 | 第131-132页 |
3 研究展望 | 第132-133页 |
参考文献 | 第133-147页 |
附录 :作者在攻读博士学位期间的成果清单 | 第147-148页 |
致谢 | 第148-149页 |