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江苏部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查及其致病性研究

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江苏部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查及其致病性研究
论文目录
 
摘要第2-4页
Abstract第4-10页
符号说明第10-12页
综述第12-32页
1 PCV2的病原学第12-15页
  1.1 病原学背景第12-13页
  1.2 PCV的理化特性第13页
  1.3 PCV的分子生物学第13-15页
    1.3.1 病毒的基因组结构第13页
    1.3.2 编码的蛋白第13-14页
    1.3.3 PCV2致病机理第14-15页
2 细胞培养特性第15页
3 PCV2的流行病学第15-16页
4 PCV2相关疾病第16-18页
  4.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征第16页
  4.2 猪皮炎与肾病综合征第16页
  4.3 猪呼吸道疾病综合征第16-17页
  4.4 增生性坏死性间质性肺炎第17页
  4.5 繁殖障碍第17页
  4.6 仔猪先天性震颤第17-18页
5 PCV2诊断方法第18-19页
  5.1 病毒的分离与鉴定第18页
  5.2 血清学方法第18-19页
    5.2.1 酶联免疫吸附试验第18-19页
    5.2.2 间接免疫荧光试验第19页
6 聚合酶链式反应第19-20页
7 免疫组织化学方法技术第20页
8 猪圆环病毒疫苗研究现状第20-21页
9 PCV2的防控第21-22页
10 研究的目的及意义第22-24页
参考文献第24-32页
第一章 江苏部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查与PCV2的分离鉴定第32-50页
1 材料第32-34页
  1.1 试剂第32页
  1.2 仪器第32-33页
  1.3 细胞和细胞培养基的配置第33页
  1.4 分子生物学软件第33-34页
    1.4.1 序列分析软件第33页
    1.4.2 引物设计软件第33页
    1.4.3 引物设计与合成第33-34页
2 方法第34-39页
  2.1 病料的采集和处理方法第34-35页
  2.2 病毒DNA的提取第35页
  2.3 病毒RNA的提取第35页
  2.4 病毒的PCR检测第35-36页
    2.4.1 DNA病毒检测第35-36页
    2.4.2 RNA病毒的检测第36页
  2.5 病毒的分离与鉴定第36-37页
  2.6 PCV2全基因组分段测序第37-38页
  2.7 病毒纯度测定第38页
  2.8 间接免疫荧光试验第38页
  2.9 进化树的构建第38-39页
3 结果第39-47页
  3.1 六种常见病毒PCV1、PCV2、PPV、PRV、PRRSV和CSFV的PCR或RT-PCR扩增特异性条带大小第39-40页
  3.2 PCV2全基因组的分段测序与拼接第40-41页
  3.3 六种病毒流行病学调查结果统计第41-43页
  3.4 混合感染统计结果第43-44页
  3.5 PCV2分离株纯度检测第44-45页
  3.6 间接免疫荧光检测第45页
  3.7 PCV2分离毒株遗传进化分析第45-47页
4 讨论第47-49页
参考文献第49-50页
第二章 猪圆环病毒2型分离株的致病性研究第50-67页
1 材料第50-51页
  1.1 PCV2毒株第50页
  1.2 细胞第50页
  1.3 实验动物第50-51页
  1.4 试剂和仪器第51页
    1.4.1 主要试剂第51页
    1.4.2 主要仪器第51页
2 方法第51-55页
  2.1 病毒的培养及TCID_(50)的测定第51-52页
    2.1.1 PCV2病毒培养液的制备第51-52页
    2.1.2 组织细胞半数感染量的测定第52页
    2.1.3 外源病毒的检测第52页
  2.2 病毒核酸的测定第52-53页
    2.2.1 荧光定量PCR引物设计第52-53页
    2.2.2 PCV2病毒DNA的提取第53页
    2.2.3 标准品的制备第53页
  2.3 分离株的动物致病性实验第53-55页
    2.3.1 实验动物的分组及处理第53页
    2.3.2 攻毒猪实验效果评定第53-54页
    2.3.3 病理组织切片的制备与HE染色第54-55页
    2.3.4 免疫组化试验第55页
3 结果与分析第55-64页
  3.1 PCV2毒株的纯度检测第55-56页
  3.2 PCV2毒株的TCID_(50)的测定第56页
  3.3 PCV2毒株在Dulac细胞上增殖第56页
  3.4 PCV2的人工感染实验第56-64页
    2.4.1 临床表现第56页
    3.4.2 病理变化第56-57页
    3.4.3 血清抗体效价的动态变化第57-58页
    3.4.4 普通PCR方法检测血清中的病毒血症第58页
    3.4.5 普通PCR方法检测试验猪排毒情况第58页
    3.4.6 荧光定量PCR对腹股沟淋巴结、血清、鼻拭子和肛拭子中PCV2 DNA拷贝数的检测结果第58-61页
    3.4.7 PCV2病毒回收分离的结果第61页
    3.4.8 组织病理学变化第61-64页
    3.4.9 免疫组织化学检测结果第64页
4 讨论第64-66页
参考文献第66-67页
全文总结第67-68页
致谢第68-69页

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