江苏部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查及其致病性研究
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江苏部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查及其致病性研究
论文目录
摘要
第2-4页
Abstract
第4-10页
符号说明
第10-12页
综述
第12-32页
1 PCV2的病原学
第12-15页
1.1 病原学背景
第12-13页
1.2 PCV的理化特性
第13页
1.3 PCV的分子生物学
第13-15页
1.3.1 病毒的基因组结构
第13页
1.3.2 编码的蛋白
第13-14页
1.3.3 PCV2致病机理
第14-15页
2 细胞培养特性
第15页
3 PCV2的流行病学
第15-16页
4 PCV2相关疾病
第16-18页
4.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征
第16页
4.2 猪皮炎与肾病综合征
第16页
4.3 猪呼吸道疾病综合征
第16-17页
4.4 增生性坏死性间质性肺炎
第17页
4.5 繁殖障碍
第17页
4.6 仔猪先天性震颤
第17-18页
5 PCV2诊断方法
第18-19页
5.1 病毒的分离与鉴定
第18页
5.2 血清学方法
第18-19页
5.2.1 酶联免疫吸附试验
第18-19页
5.2.2 间接免疫荧光试验
第19页
6 聚合酶链式反应
第19-20页
7 免疫组织化学方法技术
第20页
8 猪圆环病毒疫苗研究现状
第20-21页
9 PCV2的防控
第21-22页
10 研究的目的及意义
第22-24页
参考文献
第24-32页
第一章 江苏部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查与PCV2的分离鉴定
第32-50页
1 材料
第32-34页
1.1 试剂
第32页
1.2 仪器
第32-33页
1.3 细胞和细胞培养基的配置
第33页
1.4 分子生物学软件
第33-34页
1.4.1 序列分析软件
第33页
1.4.2 引物设计软件
第33页
1.4.3 引物设计与合成
第33-34页
2 方法
第34-39页
2.1 病料的采集和处理方法
第34-35页
2.2 病毒DNA的提取
第35页
2.3 病毒RNA的提取
第35页
2.4 病毒的PCR检测
第35-36页
2.4.1 DNA病毒检测
第35-36页
2.4.2 RNA病毒的检测
第36页
2.5 病毒的分离与鉴定
第36-37页
2.6 PCV2全基因组分段测序
第37-38页
2.7 病毒纯度测定
第38页
2.8 间接免疫荧光试验
第38页
2.9 进化树的构建
第38-39页
3 结果
第39-47页
3.1 六种常见病毒PCV1、PCV2、PPV、PRV、PRRSV和CSFV的PCR或RT-PCR扩增特异性条带大小
第39-40页
3.2 PCV2全基因组的分段测序与拼接
第40-41页
3.3 六种病毒流行病学调查结果统计
第41-43页
3.4 混合感染统计结果
第43-44页
3.5 PCV2分离株纯度检测
第44-45页
3.6 间接免疫荧光检测
第45页
3.7 PCV2分离毒株遗传进化分析
第45-47页
4 讨论
第47-49页
参考文献
第49-50页
第二章 猪圆环病毒2型分离株的致病性研究
第50-67页
1 材料
第50-51页
1.1 PCV2毒株
第50页
1.2 细胞
第50页
1.3 实验动物
第50-51页
1.4 试剂和仪器
第51页
1.4.1 主要试剂
第51页
1.4.2 主要仪器
第51页
2 方法
第51-55页
2.1 病毒的培养及TCID_(50)的测定
第51-52页
2.1.1 PCV2病毒培养液的制备
第51-52页
2.1.2 组织细胞半数感染量的测定
第52页
2.1.3 外源病毒的检测
第52页
2.2 病毒核酸的测定
第52-53页
2.2.1 荧光定量PCR引物设计
第52-53页
2.2.2 PCV2病毒DNA的提取
第53页
2.2.3 标准品的制备
第53页
2.3 分离株的动物致病性实验
第53-55页
2.3.1 实验动物的分组及处理
第53页
2.3.2 攻毒猪实验效果评定
第53-54页
2.3.3 病理组织切片的制备与HE染色
第54-55页
2.3.4 免疫组化试验
第55页
3 结果与分析
第55-64页
3.1 PCV2毒株的纯度检测
第55-56页
3.2 PCV2毒株的TCID_(50)的测定
第56页
3.3 PCV2毒株在Dulac细胞上增殖
第56页
3.4 PCV2的人工感染实验
第56-64页
2.4.1 临床表现
第56页
3.4.2 病理变化
第56-57页
3.4.3 血清抗体效价的动态变化
第57-58页
3.4.4 普通PCR方法检测血清中的病毒血症
第58页
3.4.5 普通PCR方法检测试验猪排毒情况
第58页
3.4.6 荧光定量PCR对腹股沟淋巴结、血清、鼻拭子和肛拭子中PCV2 DNA拷贝数的检测结果
第58-61页
3.4.7 PCV2病毒回收分离的结果
第61页
3.4.8 组织病理学变化
第61-64页
3.4.9 免疫组织化学检测结果
第64页
4 讨论
第64-66页
参考文献
第66-67页
全文总结
第67-68页
致谢
第68-69页
本篇论文共
69
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